检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质

实验检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质。

1. 糖类的检测

• 选材
  • 含糖量较高白色或近于白色的植物组织
• 制备组织样液
  • 待测组织样液2ml+刚配置的斐林试剂1ml
    • 呈现蓝色
• 显色反应
  • 50至65摄氏度温水，加热约2min
    • 生成砖红色沉淀
• 结论
  • 组织样液中含有可溶性还原糖

2. 脂肪的检测

• 方法一
  • 花生种子匀浆+三滴苏丹Ⅲ染液
    • 呈现橘红色
• 方法二
  • 取材
    • 花生种子（浸泡），将子叶切成薄片
  • 制片
    • 取最理想的薄片放在载玻片的中央
    • 2-3滴苏丹Ⅲ染液，染色三分钟
    • 去浮色（1-2滴体积分数为50%的酒精溶液）
  • 制成临时装片
    • 滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片
  • 观察
    • 先在低倍镜下找到已着色颗粒，再用高倍显微镜观察
  • 结论
    • 圆形小液滴呈橘红色，说明植物组织中有脂肪存在

3. 蛋白质的检测

• 选材与制备
  • 蛋清稀释液或豆浆滤液
• 显色反应
  • 待测组织样液2ml，双缩脲试剂A液1ml，摇匀
  • 双缩脲试剂B液4滴
    • 摇匀后变紫色
• 结论
  • 组织样液中存在蛋白质

4. 斐林试剂与 双缩脲试剂 的区分

• 一同
  • 都含有NaOH和硫酸铜两种成分
• 三不同
  • 使用原理不同
    • 斐林试剂的实质是新配制的硫酸铜溶液 双缩脲试剂的实质是碱性环境中的二价铜离子
  • 使用方法不同
    • 鉴定还原糖时将甲乙两液等量混匀后立即使用 鉴定蛋白质时先加A液1ml摇匀，然后再加B液4滴 振荡摇匀。
  • 硫酸铜溶液的浓度不同
    • 斐林试剂中硫酸铜溶液的质量浓度为0.05g/ml 双缩脲试剂中硫酸铜溶液的质量浓度为0.01g/ml

5. 实验注意事项

• 选材
  • 不宜选有颜色的材料，因为有颜色的材料会干扰实验结果
• 预留样品
  • 物质鉴定中预留组织样液做对照组
• 待测液处理
  • 用蛋清做蛋白质鉴定材料，必须充分稀释，防止蛋清粘在试管内壁
• 材料处理
  • 脂肪鉴定时用体积分数为50%的酒精洗去浮色 不能用清水，因为染料溶于有机溶剂不溶于水。
• 实验条件
  • 检测还原糖时，必须水浴加热，若不加热，则无砖红色沉淀出现
• 结果观察
  • 鉴定非还原糖如蔗糖时 如果与斐林试剂混合 水浴加热后的现象不是无色。而是浅蓝色（氢氧化铜的颜色）