生物选修一专题二课题三

生物选修一专题二课题三分离纤维素微生物的分离

分解纤维素的微生物的分离

• 基础知识
  • 纤维素
    • 基本组成单位
      • 葡萄糖
    • 分布
      • 主要分布在植物根，茎，叶等器官的细胞壁
  • 纤维素酶
    • 应用
      • 将秸秆等废弃物转变为酒精，处理服装面料，牲畜饲料等
    • 组成
      • 是一种复合酶，至少包括三种酶，即C1酶，Cx酶，葡萄糖苷酶
    • 反应过程
• 实验设计
  • 土壤取样
    • 取样条件
      • 富含纤维素的环境中
  • 选择培养
    • 液体培养基
      • 目的：增加纤维素分解菌的浓度(富集微生物)
        • 要达到此目的需要：震荡培养 原因：可以增大微生物与营养物质的接触面积，增加液体培养基中的溶氧量
      • 本配方中纤维素作为主要碳源，只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖
  • 梯度稀释
  • 鉴别
    • 原理
    • 方法：刚果红染色法
      • 方法一
        • 先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应
          • 不需灭菌
          • 优点
            • 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用
          • 缺点
            • 操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂
      • 方法二
        • 在倒平板时就加入刚果红
          • 需灭菌
          • 缺点
            • 有些微生物会降解刚果红，形成透明圈，与纤维素分解菌相混
          • 优点
            • 操作简单，不存在菌落混杂
      • 鉴别培养基(固体)
        • 用稀释涂布平板法接种
  • 挑选产生透明圈的菌落
• 操作提示
  • 复习微生物技术
  • 选择培养的操作方法
• 结果分析与评价
• 延伸
  • 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵
  • 纤维素酶测定方法是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖含量进行含量测定
• 形成以纤维素分解菌为中心的透明圈
• 纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物
• 红色复合物
• 纤维素+刚果红(CR)
• 葡萄糖
• 纤维二糖
• 纤维素