导图社区 自动生化分析技术
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第五章 自动生化分析技术
概述
自动生化分析技术的发展
自动生化分析仪的主要类型
实验室信息系统
LIS定义：是借助计算机技术、网络技术、数字化与智能化技术等现代技术手段对临床实验，室内样本信息和各种自动化仪器运行信息进行收集、处理、存储、输送、分析、应用的综合管理系统。
自动生化分析技术带来的变革
发展趋势
分立式自动生化分析仪的结构与功能
定义：是按人工操作方式编排程序，并以有序的机械操作代替手工操作，按程序依次完成加样、加试剂、搅拌、反应杯保温孵育、吸光度检测等各项操作。
样本和试剂处理系统
样本盘或样本架
试剂盘和试剂瓶
取液装置
样品针功能：液面感应，防撞，阻塞报警
反应系统
反应盘和反应杯。
混匀装置
保温装置
测定系统
光路系统
信号检测器
清洗系统
计算机控制系统
干化学式生化分析仪的结构和功能
干化学式生化分析仪主要结构
取样装置、干片试剂、恒温装置、检测系统、计算机控制系统。
干片试剂的基本结构
干化学式生化分析仪的独特性能
优点：一次性吸样头防止污染、结构简单、高环保节能、能够消除可能干扰目标化学反应的物质
缺点：空气湿度和温度对检测结果影响大，该化学试剂成本相高
自动生化分析仪常用分析方法
终点法
定义：样本中待测物与试剂发生特定的化学反应生成系统可检测的产物，当反应达到平衡时产物不再增加，吸光度不改变，根据平衡点吸光度的大小即能算出被测物浓度，这种方法称为终点法。
分类
一点终点法：在反应达到平衡时，选择一个测光点的吸光度计算待测物浓度。
两点终点法：常应用于具有双试剂的测定项目中。两点终点法能有效消除样本溶血、黄疸和脂浊等造成的吸光度干扰。
优点：终点法参数设置简单，反应时间较长，精密度好。
固定时间法（苦味酸法测定肌酐）
连续监测法
定义：是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线的线性期内4个以上测光点测定吸光度，计算单位时间吸光度变化值，此即为酶促反应的初速度，其大小与被测酶活性成正比。
结果计算公式
K值
理论K值
实测K值
校准K值
比浊法
定义：是通过测定微粒性物质对光的散射或透射强度来测定物质的浓度，主要用于测定能形成悬浮体的颗粒物质。
化学比浊法
免疫比浊法
自动生化分析仪的参数设置
基本分析参数
项目名称
样本量与试剂量
样本体积分数（SVF）：样本量合适剂量有样本体积分数来决定。是样本体积与反应总体积的比值，SVF越大，灵敏度越高，但线性范围越窄。因此，要将SVF设定在一个合适的值，不宜随意修改，否则会影响测量灵敏度和检测上线。
试剂的选择
温度的选择
分析方法选择
测定时间选择
终点法（充分考虑干扰问题）
延迟时间：只在速率法中试剂与样本混匀开始到监测期第一个测光点之间的时间段。
监测时间：延迟期后酶促反应再过量底物存在的情况下以恒定的速度进行，此阶段为线性反应器分析仪的监测时间及选在比期。
波长选择
波长大小的选择
单波长和双波长的选择
单波长法：是用一个波长检测物质的光吸收强度的方法，当测定体系中只含有一种成分或混合溶液中待测物的吸收峰与其他共存物质的吸收峰无重叠时，可选择该方法。
双波长法：是指当干扰物有较大吸收峰或溶液浑浊时，会出现光散射和非特异性光吸收，从而影响检测结果的准确性，需要采用两个不同波长及测量波长（主波长）和参比波长（次波长）同时测定。
使用次波长的目的
特殊分析参数的设置
试剂吸光度检查
试剂空白吸光度
试剂空白速率：在反应温度下，某些试剂于检测过程的短时间内，可能发生较为明显的自身分解等变化，使测定结果偏高或偏低，设置此参数便能在袋待测物反应的吸光度变化速率中减去试剂空白速率，从而消除或减少这类误差。
酶活性测定准确度的监测
线性检查
弹性速率设置
底物消耗限值
样本性状监测
线性范围的选择
自动生化分析仪的操作流程
仪器准备
室内质控分析
设定均值和标准差
质控图暂定均值和标准差的建立
常用均指和标准差的建立。
失控的处理程序（分析失控原因及其处理的步骤）
特殊质控项目的处理方法
样本检测
项目录入
样本上机及测定
急诊检验
过程监控
检验报告审核
内容的完整性
数据的有效性
结果的符合性
结果的正确性
报告的时效性
检验危急值
危急值：是指某项或某类检验结果异常升高或降低，一旦出现这样的检验，结果表明患者可能正处于有生命危险的边缘状态，需立刻报告给临床医生，以便其立即采取相应的治疗措施，否则将会因为错过最佳的治疗时机而使患者的生命安全受到威胁。
危急值项目
危急值的处理步骤
仪器的维护保养
每日维护
每周维护
每月维护
不定期维护
检测系统的校准和性能评价
检测系统的校准
检测系统：测定一个检验项目除了涉及自动生化分析仪，还涉及仪器所使用的试剂、校准品、质控品和检测程序等，如有手工操作步骤，还应包括操作人员这些要素组成的分析测量系统称为监测系统。
校准的定义：也称定标，是指在规定条件下，为确定测量仪器或测量系统所指示的值、实物量距或参考物质所代表的值与相对应有标准所复现的量值之间关系的一组操作。
校准方法
选择合适的校准品及校准品的数量，类型和浓度。
确定校准验证的频度。
校准类型有单点校准，两点校准和多点校准。
校准品
定义：校准品或校准物，是含有已知量的待测物，用以校准监测系统的测定值。
作用：是为了给检测结果赋值，并减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差。
酶活性测定的校准
检测系统主要的性能指标
准确度和精密度
分析速度
加样周期
测试循环周期
实用性
