微生物的实验室培养思维导图

高中生物选修一微生物的实验室培养，知识点总结及复习引导，高中生物学习必备。包含培养基、无菌技术、实验操作、保藏方法。

微生物的实验室培养

• 培养基
  • 按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质
  • 成分
    • 基本
      • 碳源
        • 无机碳源
          • CO2、NaHCO3
        • 有机碳源
          • 牛肉膏、蛋白胨、糖类
      • 氮源
        • 无机氮源
          • N2、NH4+、NO3-
        • 有机氮源
          • 牛肉膏、蛋白胨、尿素
      • 水
      • 无机盐
    • pH、特殊营养物质、O2...
      • 霉菌
        • pH酸性
      • 细菌
        • pH中性偏碱性
      • 乳酸杆菌
        • 维生素
  • 种类
    • 物理性质
      • 液体培养基
        • 工业生产
      • 半固体培养基
        • 观察微生物运动
      • 固体培养基
        • 鉴定保藏菌种
      • 凝固剂：琼脂
    • 功能
      • 选择培养基
        • 培养金黄色葡萄球菌加高浓度食盐
        • 培养酵母菌霉菌加青霉素
      • 鉴别培养基
        • 伊红-美蓝鉴别乳制品，饮用水是否含有大肠杆菌
    • 成分
      • 天然培养基
        • 含有化学成分不明确的天然成分
      • 合成培养基
        • 培养基成分明确
• 无菌技术
  • 关键
    • 防止外来杂菌入侵
  • 措施
    • 衣着、手进行清洁、消毒（温和方式杀死物体表面或内部部分微生物不包括芽孢、孢子）
    • 器皿、接种用具、培养基
      • 灭菌
    • 实验在酒精灯火焰附近进行
    • 避免已灭菌的材料用具与周围物品接触
  • 常用消毒灭菌方法
    • 消毒方法
      • 煮沸消毒法
      • 巴氏消毒法
        • 75度煮30min
        • 80度煮15min
    • 灼烧灭菌
      • 将微生物接种工具或其他金属用具直接在酒精灯外焰灼烧
    • 干热灭菌
      • 灭菌物品（玻璃器皿、金属用具）放入干热灭菌箱160-170度 加热1-2h
    • 高压蒸汽灭菌
      • 蒸汽灭菌锅内水加热煮沸，将其原有的冷空气彻底排除
    • 紫外线或化学药品消毒
      • 破坏DNA
• 实验操作
  • 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
    • 步骤
      • 1. 计算
      • 2. 称量
        • 牛肉膏放称量纸上称量 操作迅速
      • 3. 溶化
        • 将牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯不断用玻璃棒搅拌 ：防止琼脂糊底，烧杯破裂，补加蒸馏水，调节pH
      • 4. 灭菌
      • 5. 倒平板
        • 冷却至50度左右
    • 平板倒置的原因
      • 防止皿盖上水珠落入培养基造成污染，使培养基表面水分更好的挥发
    • 培养基的选择
      • 放在恒温箱中保温1—2天，没有菌落的为合格
  • 纯化大肠杆菌
    • 方法
      • 平板划线法
      • 稀释涂布平板法
        • 活菌计数
    • 核心
      • 防止杂菌污染，保证培养物纯度
• 保藏方法
  • 频繁使用
    • 临时保藏
      • 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上
      • 4度冰箱中保藏
      • 缺点
        • 时间短，易被污染或产生变异
  • 长期保存
    • 甘油管藏
      • 1ml甘油（灭菌） 1ml菌液
      • -20度冷冻箱中保存