仪器:锥形瓶*2、量筒100ml、烧杯、培养皿*6、蒸馏水250ml、试管*6
上午:
1.BP平板:0.3g+95ml蒸馏水、加热后高温灭菌--加入CM303后、配置平板培养皿*6.
2.配置0.75%生理盐水(0.1875g+250ml水)、分装为225ml+9ml*6(试管);
下午:
配置样品匀液,生理盐水225+25g样品--拍打--为1:10(P1)* -3(试管)、稀释1:100(P2) -*3(试管);每个稀释度分别取0.3、0.3、0.4ml接种于BP平板上。(无菌涂布棒,若BP板表面有水珠,可放在25-50℃培养箱中干燥)
24-48h、
35-37℃
培养
选择同一稀释度3个平板所有
菌落数合计在20-200CFU之间的平板来计算
从典型菌落中至少选择5个可疑菌落进行鉴定试验,分别做染色镜检、血浆凝固酶试验;同时划线接种到血平板35-37℃培养18-24h后观察形态,金黄色葡萄球菌菌落较大,圆形、光滑凸起、湿润、金黄色(白色),菌落周围可见完全透明融血圈
计算:若最低稀释度<20CFU按公式1;
若某一稀释度大于200,但下一稀释度上没有典型菌落或者数量不在20-200之间,计算该稀释度上的菌落,按公式1;
若2个连续稀释度平板都在20-200CFU之间,按公式2;