导图社区 基因工程
基因工程实施的过程为：目的基因的筛选和获取、目的基因的扩增、目的基因载体的构建、目的基因的转入、目的基因的检测等等。
本思维导图主要介绍了木产品的原料及将原料加工成木制产品前所需要做的准备。包括原木的种类、特性和缺陷，造材时应遵循的原则，原木进入车间加工前的准备，以及各种加工产品种类名称等。
木材加工设备分为排锯机、圆锯机、带锯机和各种联锯等，其中带锯机是木材制材过程中常用的设备，本篇思维导图主要展示了带锯机的种类、技术特性、结构装置及其作用和安装主要事项.
这是一篇描述木材基本构造的思维导图，主要讲述了木材的基本组成，尤其是关于木材树干除树皮外的部分结构特征。
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基因工程
流程
目的基因的筛选和获取
筛选
通过序列数据库、序列对比工具等应用筛选
目的基因的扩增
技术
PCR技术
原料
耐高温的DNA连接酶（Taq酶）
两种不能互补的引物
已知部分基因序列
四种脱氧核苷酸（或dNTP)
目的基因
变性（90℃以上）
复性（55℃~65℃）
目的基因中C-G碱基对越多，所需温度越高
延伸（72℃）
至少到第三轮才产生目的基因
DNA扩增计算
DNA分子数
目的基因数量（等长DNA分子数）
不等长DNA分子数
2n
消耗引物数
含有引物1（引物2）的DNA分子数
消耗引物1（引物2）数
RNA扩增
（复制次数比DNA多一次）
目的基因载体的构建
载体结构
启动子（RNA聚合酶的结合位点）
终止子
复制原点（DNA聚合酶的结合位点）
标记基因（至少一个，且在受体细胞中不能含有该基因）
载体类型
质粒（原核生物和部分真核生物细胞中含有）
噬菌体
动物病毒
工具
限制酶
本质
蛋白质
作用特点
作用于特定DNA序列的特定位点
含有限制酶的生物，其限制酶不切割自身DNA分子的原因
该生物细胞内不含有该限制酶所能识别的DNA序列
该生物细胞中能被该限制酶所识别的基因序列已经被甲基化
切割类型
平末端
黏性末端
DNA连接酶
作用于DNA分子片段之间
举例
E.coliDNA连接酶
只能连接黏性末端
来源于大肠杆菌
T4DNA连接酶
既能连接黏性末端，也能连接平末端
来源于T4噬菌体
载体要求
能整合到受体细胞的DNA分子上（如Ti质粒）或能进行自我复制（如质粒）
含多个限制酶酶切位点
具有某些标记基因
对受体细胞无害
目的基因的转入
转入方法
花粉管通道法
适用于开花的植物
可以避免组织培养
农杆菌转化法
适用于双子叶植物和裸子植物
感受态细胞法
适用于微生物
显微注射法
适用于动物细胞的受精卵
将载体直接注入卵细胞后进行动物细胞培养
目的基因的检测
PCR技术、琼脂凝胶电泳法
分子水平检测
通过标记基因筛选出含有载体的受体细胞
通过琼脂凝胶电泳法，再筛选出含有目的基因的受体细胞
有时也能用DNA印迹法进行筛选
通过抗原-抗体杂化技术检测
个体水平检测
检测个体是否表达出相应的性状
DNA的提纯
材料
2.0mol/L NaCl溶液 95%冷酒精、二苯胺试剂、蒸馏水、研磨液、新鲜洋葱
原理
DNA在酒精中溶解度小，蛋白质在酒精中的溶解度较大
蛋白质中有氨基，能与水形成氢键，DNA中没有
DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同
蛋白质工程
从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构（技术上有一定难度，通常用计算机进行分析）→推测应有的氨基酸序列（中心原则）→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需蛋白质
以基因工程为基础，通过改造基因来改造现有的蛋白质或合成新的蛋白质
基因定点突变技术
应用
转基因抗虫植物
转基因抗病植物
转基因抗除草剂植物
改良植物的品质
提高动物的生长速率
改善产品的品质
通过乳腺生物反应器生产人类所需的蛋白质
培养人体器官，避免免疫排斥反应
基因治疗
体内基因治疗
体外基因治疗
缺点
不能彻底解决疾病根源
原因
致病基因仍然存在
