导图社区 植物细胞工程
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植物细胞工程
植物体细胞杂交
原理
植物细胞的全能性
分裂分化后,仍具有产生完整生物体/分化成其他细胞的潜能
细胞分化→基因的选择性表达;基因的选择性表达→细胞分化/细胞凋亡
植物体细胞融合
原生质体制备
原生质体与原生质层
原生质体=细胞-细胞壁
原生质层=细胞膜~液泡膜之间所有
去细胞壁
纤维素酶
果胶酶
酶的专一性
+无机盐离子/甘露醇
防止吸水胀破
原生质体融合
方法
物理法
电融合法 离心法
化学法
聚乙二醇(PEG)融合法
高Ca²+—高pH融合法
细胞膜的流动性
完成标志
重新产生细胞壁
质壁分离实验
种类(AB融合)
AA BB AB 共3种
优点
打破生殖隔离→远缘杂交育种
番茄-马铃薯植株无法收获
基因表达不是孤立的
区别
有性杂交
A₁A₂ 无法联会
无性杂交
2A₁2A₂ 可以联会
植物组织培养
工具
MS培养基
+蔗糖 ∵离体→异养 需补充能量,可维持渗透压
葡萄糖× ∵葡萄糖易于吸收→渗透压迅速改变→细胞死亡
加入其他物质→等渗
操作
接种外植体
消毒
酒精-无菌水- 次氯酸钠溶液-无菌水
诱导愈伤组织
切段→切口处生长愈伤组织
脱分化
诱导生芽
细胞分裂素为主
诱导生根
IAA(生长素)为主
顺序
自然:先根后芽
有胚供能
组培:先芽后根
若先根--载体蛋白×→无法吸收培养基养分
先芽→光合作用供能
炼苗、移植