吸光光度法

此篇导图与吸光光度法有关，其内容主要讲述分光光度计，显色反应和显色条件的选择以及分子发光分析法与紫外吸收光谱法等内容

吸光光度法

• 基本原理
  • 物质对光的选择性吸收
    • 吸收光谱
  • 朗伯比尔定律
    • A=lg（I0:It）A=kbc
  • 偏离朗伯比尔定律的原因
    • 仪器偏离：非单色光的影响
    • 浓度限制：浓度过高使A和c偏离定律
    • 化学偏离
• 分光光度计
  • 单波长单光束分光光度计
  • 双波长分光光度计
• 显色反应和显色条件的选择
  • 显色反应的选择
    • 灵敏度高
    • 选择性好
    • 显色剂在测定波长处无明显吸收
    • 反应生成的有色化合物组成恒定
  • 显色条件的选择
    • 显色剂用量
    • 酸度
    • 显色温度
    • 显色时间
    • 干扰的消除
      • 加入掩蔽剂
      • 选择适当的显色条件
      • 分离干扰离子
      • 选择适当的光度测量条件
  • 显色剂
    • 无极显色剂
    • 有机显色剂
      • 红移与蓝移
      • 偶氮类显色剂
      • 三苯甲烷类显色剂
  • 三元配合物在光度分析中的应用特性
    • 稳定 灵敏度与对比度高 选择性高
• 吸光度测量条件的选择
  • 入射光波长的选择
    • 无干扰：γmax
    • 有干扰：吸收最大 干扰最小
  • 参比溶液的选择
    • 扣除非待测组分的吸收
  • 吸光度读数范围的选择
    • T：70%~10% A：0.15~1.0
• 吸光光度法的应用
  • 单组分含量测定
    • A~C标准曲线法 高含量：示差法
  • 多组分分析
    • 各组分γmax互不干扰：在各自γmax处按单组分测量
    • γmax处a对b无干扰，b对a有干扰：吸光度的加和性原则
    • 各组分γmax互有干扰：解联立方程组
  • 酸碱解离常数的测定
    • 弱酸弱碱离解常数的测定：截距法
  • 配合物组成及稳定常数的测定
    • 摩尔比法：固定金属离子浓度，改变配体浓度，以A对R/M作图
      • 条件稳定常数要足够大
    • 等摩尔连续变化法 JOB法
      • 要求仅形成一种配比的配合物
  • 双波长分光光度法的应用
    • 混合物的测定
    • 混浊试样的测定：消除背景吸收
• 紫外吸收光谱法
  • 有机化合物电子跃迁的类型
    • σ-σ* n-σ* Π-Π* n-Π*
  • 影响紫外吸收光谱的因素
    • 溶剂 pH 空间效应
  • 紫外吸收光谱法的应用
    • 定性分析：计算γmax 比较吸收光谱 同分异构与顺反异构的确定 纯度检查
• 分子发光分析法
  • 分子荧光分析法
  • 基本原理
    • 分子的激发与失活
    • 激发光谱与发射光谱
    • 荧光强度F与浓度的关系
  • 影响荧光强度的因素
    • 荧光与结构
    • 荧光与环境因素
  • 荧光分析仪器
    • 荧光计 荧光分光光度计
  • 分子荧光分析法的应用
    • 无机化合物的分析
    • 生物与有机化合物的分析
  • 化学发光分析法