导图社区 第十一章 体液中酶的生化检验
第十一章 体液中酶的生化检验知识梳理，包括临床诊断中常用的酶与同工酶、酶检测在临床上的应用等内容。
第八章 荧光免疫试验的思维导图， 荧光免疫试验是以荧光物质标记抗体和抗原，通过与相应抗原或抗体发生特异性结合反应，以此对待测物进行定位、定性和定量分析的检测技术。
第六章 免疫沉淀试验的思维导图，分享了基本原理、液相免疫沉淀实验、凝胶内免疫沉淀试验、临床应用的知识，一起来看看吧。
第五章 免疫凝集实验的思维导图，内容有基本原理、直接免疫凝集试验、间接免疫凝集试验、抗人球蛋白红细胞免疫凝集试验（Coombs试验）、自身红细胞凝集试验、临床应用、常用试剂的方法特点、主要影响因素，一起来看。
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体液中酶的生化检验
概述
基础概念
酶
是活细胞赖以生存的基础，是能催化生物体内化学反应的一类特殊蛋白质
本质：蛋白质（绝大部分）或核酸（极少数，核酶）
高效率、高特异性、可调节性
酶促反应
由酶所催化的反应
酶活性
酶催化化学反应的能力
底物
酶催化所作用的物质
产物
酶促反应的生成物
酶的特异性
酶对作用物的选择性
激活剂
加速酶促反应的物质
抑制剂
减慢甚至终止酶促反应的物质
分类
除凝血酶和纤溶酶外，血清酶与血浆酶基本一致．根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况
血清酶
血浆特异酶/血浆固有酶
非血浆特异酶
外分泌酶
细胞酶
一般代谢酶（大多数）
组织专一酶
血清酶变化机制
合成异常
合成减少
肝损伤导致合成酶的功能受损（ChE 、 LCAT）
酶基因变异引起酶合成减少铜氧化酶）
合成增多
增生性疾病（骨骼疾病， ALP )
恶性肿瘤（前列腺癌， ACP )
酶的诱导作用（乙醇， YGT )
释放增加
大多数血清酶增高的主要机制
排除异常
肾功能减退，血清 AMY 活性升高可能因酶排泄障碍而在血液中滞留
胆道梗阻，血清 ALP 升高的原因是梗阻区 ALP 合成加强， ALP 排泄受阻而逆流入血
大多数酶，不存在以上的清除机制
血清酶的半寿期是指酶失活至原来活性一半时所需时间（ T 1/2 )，可以表示酶从血中清除的快慢。不同血清酶甚至血清酶的同工酶之间半寿期差别很大．这些有助于了解同一疾病不同酶升高持续时间的差异
影响血清酶的因素
生理变异
性别
大多数差异不大
CK、ALP、r-GT等：男＞女
年龄
饮食
大多数不受其影响
高脂、高糖饮食后 ALP 活性升高
酬酒可使血清 r- GT 升高，如未累及肝脏，戒酒后酶活性下降
禁食数天可导致血清 a ﹣淀粉酶( AMY ）下降
运动
多使酶升高
妊娠
病理变化
酶合成异常
大多数是在肝脏中合成，当肝功能障碍时酶浓度常下降．此外酶基因变异也可引起特定酶减少或消失
酶释放增加
酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制
影响因素
细胞内、外酶浓度的差异
酶在细胞内的定位和存在的形式
酶蛋白分子量的大小
酶清除异常
不同的疾病和不同的酶从血液中清除的时间和机制不同，同一疾病不同酶恢复正常的时间也不一样，这和酶的半寿期以及一些其他因素有关
临床诊断中常用的酶与同工酶
丙氨酸氨基转移酶ALT/谷丙转氨酶GPT
依据
参与蛋白质代谢的酶，加快蛋白质氨基酸的转化
广泛存在于各器官组织，以肝脏中的含量最多
这些组织发生损伤或坏死时，酶从这些组织细胞中释放，致使血清中的 ALT 活性升高
临床意义
常作为判断肝细胞受损的灵敏指标
肝胆疾病：传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎等
心血管疾病：心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等
药物和毒物：氯丙嗓、异烟耕、水杨酸制剂及乙醇、铅、汞或有机磷等
磷酸吡哆醛缺乏症（也称维生素B6缺乏症）
应用评价
能够反映肝细胞损害程度，是肝脏疾病时观察疗效、判断预后的重要指标之一。但 ALT 存在于多种组织，缺乏特异性，且能造成肝细胞膜通透性改变原因较多
LT 活性变化与肝脏病理组织改变并不完全一致，在严重肝损伤时并不升高。因此肝功能损害需要综合其他情况来判断
检测方法
连续监测法（属于酶偶联法）
方法学评价
缺陷是存在谷氨酸脱氢酶（ GLDH ）和内源性丙酮酸的干扰，但采用双试剂及底物启动的模式，和（或）延长延滞期可消除部分干扰
IFCC 推荐法建议试剂中添加5﹣磷酸吡哆醛，其目的是使脱辅基的酶恢复酶活性，提高结果的准确性，特别是部分肿瘤化疗病人和肾病病人会出现脱辅基的酶
参考区间
卫生部发布了关于 ALT 的行业标准，反应温度37℃,试剂中不含5﹣磷酸叱哆醛时，成年人参考区间为：男性9~50U／L，女性7~40U/L
天冬氨酸氨基转移酶AST/谷草转氨酶GOT及其同工酶
AST 和 ALT 是人体内糖和蛋白质互相转变所需的酶
AST 催化天门冬氨酸和 a ﹣戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸
广泛分布于全身各组织，尤其以心、肝和肾中最为丰富，在细胞内定位于线粒体和胞质
当这些组织细胞损伤或坏死时，胞浆内AST释放入血，是其活性升高
AST 在心肌细胞中含量最高，心肌梗死时活性增高
各种肝病
肌炎、胸膜炎、肾炎、肺炎
连续监测法（340nm）
8-40U/L
y-谷氨酰基转移酶GGT/y-谷氨酰转肽酶y-GTP或GGTP
是一种含硫基的线粒体酶，参与体内谷眺甘肽的代谢
肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富，但血清中 GGT 主要来自肝胆系统
GGT 在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此肝内合成进或胆汁排出受阻时，血清中 GGT 升高
肾脏疾病：血清中 GGT 活性升高不明显
肝脏疾病
诊断恶性肿瘤肝转移和肝癌术后复发情况，阳性率可达90%
GGT 同工酶 II 与 AFP 联合检测可原发性肝癌的检测阳性率明显升高
嗜酒或长期服用某种药物（苯巴比妥、苯妥英钠、安替比林）、口服避孕药
碱性条件下 GCNA 与甘氨酰甘氨酸反应的方法
男性：11--50U/L 女性：7--32U/L
肝胆疾病血清酶检验
a-淀粉酶AMY/AMS及其同工酶
属于糖苷链水解酶
主要存在于胰腺和唾液腺中
同工酶
唾液型（ S - AMY ）
胰腺型（ P - AMY )
正常人血清中 AMY 主要由肝脏产生， AMY 分子量小，可通过肾小球滤过出现在尿液中。 AMY 是唯一能正常时出现于尿液中的血清酶
急性胰腺炎和流行性腮腺炎
急性胰腺炎发病后2h血 AMY 开始升高，12-24h达高峰，2-5天降至正常。尿 AMY 于发病后12-24h开始升高，下降也比血清慢。因此急性胰腺炎后期测定尿 AMY 意义更大
急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后
血清与尿中同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急慢性胆囊炎
对硝基酚麦七糖苷法
血清 AMY :≤220U/ L 尿 AMY :≤1200U/ L
脂肪酶LPS/甘油三酯酶/甘油三酯脂酰水解酶
是分解脂肪的酶，催化脂肪水解为甘油和脂肪酸
来源于胰腺，少数来自胃肠粘膜，可由肾小球滤过，并由肾小管全部重吸收，所以尿液中测不到脂肪酶活性
主要用于急性胰腺炎的诊断
酗酒、乙醇性胰腺炎、胰腺癌、慢性胰腺炎以及肝胆疾病时有不同程度的升高
酶偶联比色法
酶偶联法：1-54U/L；比浊法：0-7.9U/ L
胰腺疾病血清酶检验
肌酸激酶CK及其同工酶
CK 能催化高能磷酸键在肌酸和 ATP 之间转换，生成磷酸肌酸和ADP的可逆反应
磷酸肌酸的高能磷酸键是肌肉收缩时能量的直接来源
为二聚体结构，由 M 和 B 两个亚基构成，可组成三种同工酶
CK - MM （主要存在于骨骼肌中）
CK - BB （脑、平滑肌）
CK - MB （心肌是其唯一器官）
心肌梗死：AMI 发生后4-8h, CK 开始升高；12-48h达高峰，可达正常上限的10-12倍；2-4天后降至正常。 CK - MB 是目前公认的诊断 AMI 较有价值的生化指标
CK-MB增高，CK-MM增高为主，CK-MB/CK活性比＜6%→判断心肌梗死
病毒性心肌炎
皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤等
脑膜炎、脑血管意外、甲状腺功能低下
非疾病因素：剧烈运动，各种插管及手术等
甲亢、长期卧床者
酶偶联法
大量腺苷酸激酶AK可因溶血是CK假性增高
男性：38--174U/ L 女性：26--140U/ L
乳酸脱氢酶LD及其同工酶
参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶
由 M 和 H 两个亚基组成的四聚体，形成五种结构不同的同工酶
LD1(H4）
LD2(H3M)
主要存在于肾、心肌和红细胞
LD3(H2M2)
脾脏、肺脏
LD4(HM3）
LD5(M4)
横纹肌和肝脏
连续检测法（340nm）
正向反应
逆向反应
LD - L 法：109--245U/ L LD - P 法：200--280U/L
碱性磷酸酶ALP及其同工酶
广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶
它不是单一的酶，而是一组同功酶，分为
生殖细胞型GCAP
胎盘型PALP
肠型IAP
非特异组织型TUAP
在酶蛋白合成后，经过不同形式的修饰加工，形成的肝型、胆型、肾型、骨骼型等酶的多种形式
骨骼疾病：变形性骨炎、向俊病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等
肝胆疾病：阻塞性黄痘、肝硬化、肝坏死、原发性和继发性肝癌时明显升高；肝细胞性黄痘升高不明显
肿瘤：乳腺癌、肺癌等
其他疾病：甲状腺及甲状旁腺功能亢进、遗传性 ALP 过多症
药物：巴比妥类、抗生素类
连续检测法（405nm）
女性
1-12岁<500U/ L ; >15岁40-150U/ L
男性
1-12岁＜500U/ L ; 12-15岁＜750U/ L ; >25岁40-150U/ L
酸性磷酸酶ACP及其同工酶
是一种在酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶
人血清酸性磷酸酶的最适 pH 为4.5-7
ACP 前列腺含量最多，主要存在于巨噬细胞，定位于溶酶体内
ACP 同工酶
前列腺 ACP
非前列腺 ACP
血清中 ACP 测定主要作为前列腺癌的辅助诊断、疗效观察及预后判断
连续监测法（405nm）
成人总酶活性：0-9U/L；前列腺 ACP :0-3U/L
胆碱酯酶ChE
一类催化酰基胆碱的水解酶
真性胆碱酯酶（ AChE ）
主要存在于胆碱能神经末梢突触间隙
假性胆碱脂酶（ PChE )/血清胆碱酯酶
临床上测定的 ChE 主要由肝细胞合成
含有有机磷的杀虫剂能抑制红细胞内的 AChE 和血清中的 PChE
有机磷和甲丙氨酯类杀虫剂中毒时，血清ChE 活性明显降低，并与临床症状相一致
评价肝细胞合成功能的灵敏指标：各种慢性肝病，如肝炎、肝脓肿、肝硬化患者中，约有50％患者 ChE 活性降低
羊水中 AChE 的测定可以用于神经管缺陷的产前诊断
丁酰硫代胆碱法
5000-12000 U /L
5‘-核苷酸酶5’-NT
髓过氧化物酶MPO
酶检测在临床上的应用
血清酶测定在临床诊断中的作用
病变组织或器官的定位
组织细胞损伤程度诊断
临床疾病诊断
同工酶及其亚型检测的临床意义
详见书P189
F2A744B59594F035AF1E4A6FB3D4ADA3
