导图社区 色谱分析法导论
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色谱导论
概述
利用物质在做相对运动的两相之间反复多次的分配过程而产生差速迁移,从而实现混合物的分离分析的方法
方法及其分类
色谱过程
基本条件:具备相对运动的两相(固定相、流动相)
两相
固定相:固体、液体
流动相:气体、液体、超临界流体
色谱法分类
按两相状态分类
流动相
气体色谱法
液体色谱法
超临界流体色谱法
固定相
相应气体色谱法
气-固色谱法
气-液色谱法
相应液体色谱法
液-固色谱法
液-液色谱法
按分离机制分类
吸附色谱法
分配色谱法
离子交换色谱法
分子排阻色谱法
按操作形式分类
按固定相操作形式分类
柱色谱法
平面色谱法
纸色谱法PC
薄层色谱法TLC
应用领域广泛
选择性好,分离效能高,灵敏度高,分析速度快,高容量,高灵活性,条件温和
色谱与其他仪器连用技术
基本原理
色谱法基本原理
先解决组分的分离问题,然后进行定量定性分析
根据分离机制不同排列
利用样品中不同组分在固定相和流动相中溶解度的差别来实现分离
利用样品中不同组分对固定相表面的活性吸附中心的吸附能力的差别而实现分离
根据被分离组分分子的线团尺寸不同而进行分离
利用样品组分离子对离子交换剂的亲和能力的差别而进行分离
基本理论
塔板理论
由理论板数与色谱参数之间的关系可得色谱峰越窄,塔板数越多,理论塔板高度越小,柱效能越高,对组分分离效果越好
速率理论
色谱图及专业术语
色谱图:基线(仪器与操作条件已恒定)、色谱峰、峰高 H 、峰面积 A、标准差、半峰宽、峰宽 W
保留值:保留时间、死时间、调整保留时间、保留体积、死体积、调整保留体积、相对保留值(越大=固定相或色谱柱对分离混合物的选择性强)
分配系数和容量因子
分配系数
组分的特征常数
组分在两相之中达到分配平衡后,其在固定相和流动相的浓度之比
仅和组分,固定相和流动相的性质以及温度有关
容量因子
组分在两相之中达到分配平衡后,其在固定相和流动相的质量之比
分离度
描述相邻两组分在色谱柱中分离情况的参数
影响因素
两组分保留值之差
两组分峰差
比移值
平面色谱图上斑点位置的基本参数
平面色谱图作定性分析的基本参数
系统适用性实验
意义:实验判定色谱系统是否符合规定要求
内容
色谱柱的理论板数n:评价色谱柱的分离效能
分离度:评价待测物质与被分离物质之间的分离程度,是衡量色谱系统分离效能的关键指标
灵敏度:评价色谱系统检测微量物质的能力
拖尾因子:评价色谱峰的对称性
重复性:用于评价色谱系统连续进样时响应值的重复性能(峰面积、平均校正因子小于等于2.0%)