免疫沉淀反应思维导图

免疫沉淀反应主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下，按适当比例所形成的可见沉淀物现象。下图为免疫沉淀反应导图笔记，给大家参考。

免疫沉淀实验

• 免疫沉淀反应的基本原理
  • 沉淀反应（precipitation）
    • 定义
      • 是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同，并根据所形成的沉淀物计算待测抗原或抗体的含量。
    • 分类
      • 液体内沉淀试验
        • 1.环状沉淀反应
        • 2.絮状沉淀试验
        • 3.免疫浊度测定
      • 凝胶内沉淀试验
        • 1.单向扩散试验
        • 2.双向扩散试验
      • 凝胶免疫电泳技术
        • 1.对流免疫电泳
        • 2.火箭免疫电泳
        • 3.免疫电泳
        • 4.免疫固定电泳
    • 特点
      • 1.阶段性
        • 抗原抗体特异性结合，快速但不可见。
        • 形成肉眼可见的大的免疫复合物。（沉淀线或沉淀环的观察）
      • 2.特异性
      • 3.可溶性抗原
      • 4.一般为多克隆抗体——易交联成网状结构
• 液相免疫沉淀试验
  • （一） 环状沉淀试验
    • 是将已知抗血清和待检抗原反应，在液面交界处特异性结合形成白色环状沉淀。
  • （二）免疫浊度测定
    • 当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。
    • 方法
      • 1.透射比浊法（turbidimetry)
      • 2.散射比浊法（nephelometry)
        • ①速率散射比浊法(rate nephelometry)
        • ②终点散射比浊法(endpoint nephelometry)
• 凝胶内免疫沉淀试验 (gel phase precipitation)
  • 定义
    • 可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。
  • 分类
    • 一、单向扩散试验(single diffusion test)
      • 平板法
        • 将一定量的抗体混入琼脂凝胶中，使待测抗原在凝胶中自由扩散，与相应抗体结合形成沉淀环，沉淀环大小与抗原浓度呈正相关。
        • 影响因素：抗体质量 标准曲线 质控血清 结果与真实含量不符：单克隆抗体；多克隆抗体；可 出现假性降低与增高 双环现象：不同扩散率抗原性相同的两个组分
    • 二、双向扩散试验 （double diffusion test ）
      • 平板法
        • 鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一
      • 应用
        • 1.抗原或抗体的存在与否以及相对含量的估计
        • 2.抗原或抗体相对分子量的估计
        • 3.抗原性质的分析
        • 4.抗体效价的滴定
        • 5.抗原或抗体纯度的鉴定
      • 步骤
        • 1.抗原或抗体的存在与否以及相对含量的估计
        • 2.抗原或抗体相对分子量的估计
        • 3.抗原性质的分析
        • 4.抗体效价的滴定
        • 5.抗原或抗体纯度的鉴定
    • 三　免疫电泳技术 (immunoelectrophoresis technique)
      • 分类
        • 1. 对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis)
        • 2. 火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis )
        • 3. 免疫电泳(immunoelectrophoresis)
        • 4. 免疫固定电泳(immuno fixationel ectrophoresis)
• 免疫沉淀反应的应用
  • 临床应用
    • 主要用于血液、体液中蛋白质的测定。
    • 稳定性好，敏感度高，精确度高，简便快速。
    • 对流免疫电泳与火箭免疫电泳技术已不推荐使用。
    • 免疫固定电泳分辨力强，敏感度高，常用于M蛋白的鉴定与分型。
    • 免疫电泳扩散时间长，影响因素多，结果不易分析。