导图社区 生物选修3
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生物选修3
基因工程。
基因工程的基本的操作。
目的基因的获取
从基因文库中获取目的基因。
基因组文库。
cDNA文库
人工合成目的基因。
蛋白质-氨基酸系列-mRNA-目的基因
mRNA-目的基因
PCR
变性
复性(退火)
延伸
特点
高温断开H键
DNA聚合酶耐高温
目的基因表达载体的构建。
切割DNA同种限制酶
单酶切
缺点 自身环化 连接反向
双酶切
有效的避免单酶切的缺点
子主题
将目的基因导入受体细胞中。
受体细胞 全能性高
动物(受精卵)
显微注射法
植物(受精卵体细胞)植物组织培养
基因枪法
花粉管通道法
农杆菌转化法
利用ti制粒用tDNA转移到染色体上
微生物.Ca离子处理法
感受态 增大壁的通透性
目的基因的检测与鉴定。
个体水平
最简单
观察形状
分子水平
是否导入(DNA分子杂交)
转录(DNA-RNA分之杂交)
翻译(抗原抗体杂交)
利用标记基因筛选
细胞工程。
植物组织培养(细胞-个体)
原理.全能性
培养基
固体培养基 营养 蔗糖 氨基酸 水 无机盐 维生素
生长素(根) 细胞分裂素(芽) 生比芽 高-根的分化 中-与桑组织 低_芽的生长
高压蒸汽灭菌
外植体
立体的组织 器官 细胞
消毒处理
外植体_(脱分化)_愈伤组织_(再分化)_胚状体_(发育)_完整植株
脱分化
条件(生比分)要高 (无光)
再分化
条件(生比分)要低 (有光)
胚状体
人工种子
应用
快速繁育植物后代
花药离体培养(有性生殖)
作物脱毒 取茎尖
工业生产药物
诱变育种
植物体细胞杂交 (包括植物组织培养)
两步 一融合 二植物组织培养
第一步.去壁
酶解法 植物(纤维素酶和果胶酶) 细菌(溶菌酶)
机械法 先用略高的溶液(质壁分离)
融合
可以得到 五种细胞 A B AA BB AB
原理 膜的流动性
方法 物理 振动 离心 电激 (植物只有物理.化学) 化学PEG(聚乙二醇)
成功标志 再生细胞壁
筛选
选择培养
优点 克服远缘杂交不亲和
动物细胞培养 (基础技术) (用于验毒)
原理 细胞增殖
培养基 液体培养基 营养成分 (葡萄糖 氨基酸 水 无机盐 维生素 动物血浆或血清) 加入一定的抗生素(消灭细菌)
至于百分之五的CO2恒温培养箱
过程
离体的组织器官 用胰蛋白酶(胶原蛋白酶)处理 单细胞 悬浮液 贴壁生长 原代培养 然后再用胰蛋白酶处理 单细胞悬浮液(分瓶) 传代培养
可以加入诱导因子 控制分化方向
单细胞悬浮液 10代(原代培养) 绝大部分 凋亡 少数细胞 细胞株 __50代__绝大部分凋亡(传代培养) 少数细胞 细胞系(遗传物质发生改变)
核移植
提现了细胞核的全能型
克隆
分子克隆
DNA复制 RNA复制 PCR
细胞克隆
有丝分裂 动物细胞培养 二分裂
个体克隆
植物组织培养 营养生殖
核移植 胚胎分割 二分裂
试管婴儿
体外受精 早起胚胎培养 胚胎移植
单克隆抗体的制备
子主题可以得到 五种细胞 A B AA BB AB
融合 生物方法(灭活的病毒) 物理 化学
筛选一(选择培养)
筛选二多孔培养法 抗原抗体杂交
优点。特异性强，灵敏度高，产量大。
胚胎工程。
目的 提高繁殖能力
生态工程。
目的 提高能量利用率(使能量更多的流向对人类有益的部分)
原理
物质循环再生 (实现了物质循环利用 能量多级利用) (无废物农业) (粪)
物种多样性 (生物物种改变 稳定性改变)
协调与平衡 (适用) (K值)
整体性 利益 (经济效益) 收入 (生态)污染 (社会)
系统学与工程学原理 (食物链改变) 整体部分大于部分的之和(桑基鱼塘 猪沼茶)
克隆.是无性生殖 试管婴儿.有性生殖
代谢
同化方式
自养
异养
异化
需氧型
厌氧性
兼性厌氧型
愈伤组织
特点，排列疏松无规则_无定形状态_高度液泡化_薄壁
