第1章_组织学绪论

组织学绪论重点内容。介绍了物质对应的技术、制备方法、 染色、四大组织、 技术、 原位杂交技术等。

组织学绪论

• 物质对应的技术
  • 过碘酸希夫反应（PAS反应）是指糖被强氧化剂过碘酸氧化后，形成多醛。后者再与无色的品红硫酸复合物（即希夫试剂）结合，形成紫红色反应产物。PAS反应显示聚糖和糖蛋白的糖链，即多糖。
  • 免疫组织化学术是根据抗原与抗体特异性结合的原理，检测组织中肽和蛋白质的技术。
  • 原位杂交术原理是用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核糖核酸按碱基配对的原则，进行特异性原位结合，即杂交，然后通过对标记物的显示和检测，而获知待测核酸的有无及相对量。
• 组织学（histology）是研究机体微细结构及其相关功能的科学
• 制备方法
  • 火棉胶包埋：制作较大组织块（如眼球、脑）
  • 冷冻切片：保存酶的活性和脂类物质
  • 涂片：血液、体液、培养细胞等
  • 铺片：疏松结缔组织、肠系膜等
  • 磨片：骨、牙等硬组织
• 染色
  • 碱性染料（在溶液中带正电荷）：苏木精、甲苯胺蓝、碱性品红等
  • 酸性染料（在溶液中带负电荷）：伊红、橙黄G、亮绿等
  • 银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还原而显示，称此为亲银性，有些结构无直接还原作用，需加入还原剂方能显色，则称为嗜银性。
• 原位杂交技术
  • 用一条碱基序列已知、经特殊标记的核苷酸链作为探针，与待检DNA或mRNA片段进行杂交。
• 技术
  • 电子显微镜术
    • 透射电镜术：用超薄切片机切片（需制备超薄切片50-80nm），再经醋酸铀和柠檬酸铅染色（电子染色）。当电子束投射到密度大、吸附重金属多的结构(如溶酶体)时,电子被散射的多,因此,射落到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片上早黑或深灰色习惯称该结构为高电子密度(electron-density);反之早浅灰色称低电子密度。透射电镜的分辨率可达到0.2nm。
    • 扫描电镜术：取材要求同透射电镜，但不需要超薄切片，组织块用戊一醛和鋨酸固定后经脱水、干燥再于其表面喷镀薄层金膜。观察时电镜发射极细的电子束在标本表面扫描,标本表面散射的电子(称二次电子)被探测器收集形成电信号传送到显像管在荧光屏上显示标本表面的立体构像。用扫描电镜能观察较大的组织表面,因其景深长,凹凸不平的结构也能清晰成像故图像具有立体感。扫描电镜的分辨率为2nm
  • 光学显微镜：0.2um，切片厚度1-10um
• 四大组织
  • 上皮
  • 肌肉
  • 神经
  • 结缔
• 选择题
  • A.组织学研究内容包括细胞、组织、器官和系统
  • B.细胞是人体结构和功能的基本单位
  • C.许多形态相似、功能相关的细胞，与细胞外基质形成的细胞群，称为组织
  • D.器官是在胚胎发育早期由几种不同组织发育分化和有机结合形成，在机体内执行比组织更高一级的特定生理功能
  • E.许多结构相似、功能相关的器官联合在一起构成系统
  • F.细胞外基质由细胞产生，参与构成细胞生存的微环境
• 电子密度大
  • 在荧光屏上较暗
  • 电子束不易通过
  • 照片上图像较深
  • 分子量不一定较大
  • 不一定不易与染料结合
• HE染色：苏木精+伊红
  • 组织学中最常用的染色方法是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色法,简称 HE 染色法(HE staining)。
  • 苏木精使细胞核和细胞质中的核糖体、粗面内质网等酸性物质染成紫蓝色，伊红使细胞质和细胞外基质中的碱性成分染成淡红色。与碱性染料亲和力强、易被染色的特性称嗜碱性(basophilia);与酸性染料亲和力强、易被染色的特性称嗜酸性(aci- dophilia);若与两种染料的亲和力都不强,则称中性(neutrophilia )。
  • 某些结构成分如肥大细胞的胞质颗粒,当用碱性染料甲苯胺蓝等染色时,不是呈现染料的蓝色,而是呈紫红色,这种染色特性称为异染性(metachromasia)
  • 当用硝酸银染色时,有些组织结构可直接使银离子还原为银颗粒而呈黑色,称为亲银性(argen- taffin),有些组织结构需加入还原剂才能显色,称为嗜银性(argyrophilia)。
    • 高尔基体是中性，能被硝酸银染成黑色。 酸性细胞：浆液细胞，浆细胞，肥大细胞，嗜碱性粒细胞，单核细胞 酸性物质：细胞核，核糖体，粗面内质网（有核糖体），淋巴细胞胞质，尼氏体 碱性细胞：巨噬细胞，嗜酸性细胞，浆液性细胞，粘液性细胞（弱嗜碱性） 碱性物质：胶原纤维，弹性纤维