复合生化试验

这是一篇关于复合生化试验的思维导图，主要内容包括：克氏双糖铁试验，动力-靛基质-脲酶试验，IMViC试验。每种试验都详细描述了其原理、培养基、试验方法、结果判断以及应用。

复合生化试验

• 克氏双糖铁试验
  • KIA试验
  • 原理：1.细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖（乳糖浓度是葡萄糖的十倍），葡萄糖被分解后只能产生少量的酸 (8--11h内斜面和底层变黄) (>11h后细菌和氧作用下，培养基的斜面所含氨基酸发生降解，释放氨类中和斜面的酸） (18--24h后斜面变成碱性为红色，底面仍为酸性黄色） 2.细菌分解乳糖则产生大量的酸，酸能中和斜面产生的碱，使整个培养基成黄色 3. 细菌分解培养基中含硫氨基酸，可产生硫化氢，与培养基中枸橼酸铵铁产生黑色硫化亚铁沉淀
  • 培养基：KIA琼脂（牛肉膏、酵母浸膏、蛋白胨、乳糖、葡萄糖、枸橼酸铵铁）
  • 指示剂：酚红指示剂
  • 方法：接种针挑取待检菌，穿刺接种KIA深层，距管底3--5mm，斜面由上到下划线，35℃培养18--24h
  • 结果：1.K/K：不发酵糖类（粪产碱杆菌） 2.K/A：葡萄糖发酵乳糖不发酵（志贺氏菌） 3.K/A －+：葡萄糖发酵，乳糖不发酵，不产气，产生硫化氢（斜面碱性红色/底面酸性黑色）（沙门氏菌、普通变形菌） 4.A/A + －：葡萄糖和乳糖发酵，产气，不产生硫化氢（大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠杆菌属） 5.有气泡产生--产气
  • 应用：肠杆菌科细菌鉴别（都发酵葡萄糖）
• 动力-靛基质-脲酶试验
  • MIU试验
  • 原理：1.蛋白胨含有色氨酸，水解色氨酸形成靛基质，加入靛基质试剂形成玫瑰吲哚 2.产生脲酶的细菌将尿素分解成碱性物质 3.半固体培养基可以观察细菌动力
  • 培养基：动力-靛基质-脲酶培养基（尿素、蛋白胨）
  • 指示剂：酚红（黄--红）
  • 方法：穿刺接种到MIU培养基内35℃培养18--24h（看结果前加试剂）
  • 结果：1.动力（阳性--接种线变宽、变模糊、培养基变混浊 阴性--无变化） 2.靛基质（阳性--试剂与培养基接触形成玫瑰红色 阴性--无色） 3.脲酶（阳性--培养基全部变成桃红色 阴性--不变色）
  • 应用：肠杆菌科细菌鉴定（MIU+KIA同用）
• IMViC试验
  • 鉴别细菌最常用的生化试验
  • I 靛基质（吲哚）试验
  • M 甲基红试验
  • V VP试验
  • C 枸橼酸盐利用试验