导图社区 电泳技术
这是一篇关于电泳技术的思维导图，主要内容有电泳分类、电泳方法、条件、基本原理。希望对你有帮助！
一张思维导图带你学习层析分离技术，内容有基本概念、层析的分类、层析的核心、层析分离、常用的支持剂、层析的基本操作。
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电泳技术
分类
纸电泳：以滤纸为支持体的电泳技术
操作：
选择缓冲液
层析用滤纸
点样
电泳
显色及分析
薄膜电泳
支持体：薄膜
优点：分辨力较高、简便、快速、区带清晰、易于定量、便于保存
广泛应用于蛋白质和同工酶等的分离分析
薄膜的处理与放置
平衡
电泳：E 10~25V/cm，0.5～2h
显色
薄层电泳
将支持物与缓冲液调制成适当厚度的薄层进行电泳。
常用支持物：淀粉、琼脂、纤维素粉、硅胶等
缓冲液选择
支持物处理
薄层板制作
加样：挖沟、混合样品、填埋
分析：印染
凝胶电泳
支持物：多孔凝胶
琼脂糖凝胶
用途：分离、鉴定核酸
基本操作：
配制缓冲液贮备液
水平型琼脂糖凝胶制备
样品的制备与点样
染色
样品回收
聚丙烯酰胺凝胶
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法
PAGE应用广泛，可用于蛋白质、酶、核酸等生物分子的分离、定性、定量及少量的制备，还可测定分子量、等电点等
分类：垂直管型盘状电泳、垂直板型电泳；连续、不连续、梯度、SDS凝胶电泳
分离原理
电荷效应
分子筛效应
浓缩效应
具有电泳和分子筛的双重作用，分辨力高
最常用聚丙烯酰胺凝胶，原因：机械强度好，透明有弹性，稳定，无吸附作用和电渗作用，可制成不同孔径的凝胶
SDS-凝胶电泳
原理：
十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种可以根据蛋白质的分子量分离样本中蛋白的技术。在电荷的影响下分离大分子称为电泳。在SDS-PAGE中使用的凝胶是聚丙烯酰胺，使蛋白质呈线性化的试剂是SDS。 因此得名SDS-PAGE。
凝胶制备
电极缓冲液
样品处理及加样
染色与固定
脱色
分析
等电聚焦电泳
原理：电泳系统中加进两性电解质载体，当通直流电时，两性电解质载体即形成一个由阳极到阴极连续增高的pH梯度。P进入时，不同的P移动到与其等电点相当的pH位置上，从而使不同等电点的P得以分离。
优点：分辨率高，区带清晰、窄，加样部位自由，重现性好，可测定P或多肽的等电点。
缺点：需无盐溶液，不适用于在等电点不溶解或发生变性的Pr。
pH梯度支持介质的制备
聚焦电泳
检测
两性电解质载体的除去
毛细管电泳
原理：离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。
特点：
高灵敏度，高分辨率，高速度(在250s内能分离10种蛋白质)；
样品少，只需纳升级的进样量，
成本低，只需少量(几毫升)流动相和价格低廉的毛细管
应用：可检测多种样品，且可分离分析多种组分，的生物活性分子等的快速分析，以及DNA序列分析和DNA合成中产物纯度测定等
电泳方法
按电场分：常压（<500V，适用大分子）、高压（>500V，适用小分子）
支持体分：自由电泳、区带电泳
仪器装置分：水平式、垂直式、悬架式
区带电泳
移界电泳
等速电泳
条件
水溶液（缓冲液）、支持物（区带电泳）、电场（电泳仪、电泳槽）
基本原理
电泳简介
特点：快速、准确、重现性好
定义：指带电粒子在电场中向与其自身 带相反电荷的电极移动的现象
移动方向：带电性质决定
泳动度：带电颗粒在单位电场强度下的移动速度。
影响因素
颗粒本身：带电、大小、形状
外界因素：电场强度E、pH、离子强度I、电渗、缓冲液粘度及温度等。
