色谱法

色谱法知识总结，包括色谱图信息、色谱峰参数、色谱法理论、色谱定量分析方法等内容，很详细，需要的可以看看。

色谱法

• 色谱图
  • 色谱图信息
    • 色谱峰个数：判断样品中所含组分最少个数
    • 色谱峰保留值：定性分析
    • 色谱峰面积/峰高：定量分析
    • 色谱峰保留值/区域宽度：评价色谱柱的柱效能
    • 色谱峰两峰间距离：评价固定相与流动相的选择适宜性
  • 色谱峰参数
    • 峰高h:mV、mA、mm定量分析参数之一
    • 峰的区域宽度：度量色谱分离效率
      • 标准偏差：c他越大组分越分散
      • 半峰宽：
      • 峰底宽
    • 峰面积：
• 色谱法理论
  • 两组分分离必要条件
    • 两组分分配系数要有差异
    • 区域变宽速度要小于区域分离速度
  • 等温线：Cs-Cm
    • 线性等温线：理想型Cs=Kcm
    • 凸性等温线:K随组分浓度增加减小。吸附色谱常见
      • 原因：固定相表面活性中心的不均一性
      • 保留时间随样品量增加减少
      • 拖尾不利因素：
        • 利用峰面积进行定量时影响峰面积积分精度与重现性
        • 利用峰高定量时影响检测灵敏度
        • 定性分析时影响保留值与组分性质的相关性
        • 影响组分之间相互分离程度
      • 防拖尾方法
        • 控制组分的量
        • 流动相中加入水/醇极性试剂
        • 吸附剂改性，如键合
    • 凹形等温线：K随组分浓度增加增加。
  • 塔板理论
    • 塔板数越多分离能力越强。塔板数和塔板高度是衡量柱效的指标
    • （ms+mm）^N
    • n=5.54（tR/W0.5）^2=16(tR/W)^2
    • 优点：导出了流出曲线数学模型，给出了评价柱效的有效方法
    • 缺点：无法解释谱带扩张，柱效与流动相流速的关系，影响柱效的因素
  • 速率理论
  • 色谱分离方程式
    • 分离度方程：
    • 改善分离度措施
      • 增大选择因子阿尔法。越大固定相选择性越好，分离效果越好。阿尔法=1时无论柱效多高R=1，两组分不可分离。
      • 增大柱效n。增加柱长/选择性能优良的色谱柱，可提高n
      • 增大容量因子k
• 色谱定量分析方法
  • 定量校正因子
  • 分析方法
    • 归一化法：简便，定量结果与进样量无关，受操作影响小不能用于微量杂质的含量检测
    • 外标法：操作简单，计算方便，不用校正因子，不加内标物，要严格控制进样量与操作条件
    • 内标法
      • 要求：内标物是试样中不存在的物质，是纯物质，含量已知杂质峰不干扰的较纯物质
      • 分类
        • 内标校正因子法
        • 内标工作曲线法
        • 内表对比法
      • 优点：受操作条件影响小，进样体积不严格，定量准确。但难选合适内标