导图社区 白细胞计数、嗜酸性粒细胞计数
白细胞一般有活跃的移动能力,它们可以从血管内迁移到血管外,或从血管外组织迁移到血管内。因此,白细胞除存在于血液和淋巴中外,也广泛存在于血管、淋巴管以外的组织中。
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白细胞计数、嗜酸性粒细胞计数
白细胞检验
白细胞种类
嗜色细胞
中性粒细胞N
机体防御和抵抗病原菌的侵袭
嗜酸性粒细胞E
限制嗜碱性粒细胞在速发型变态反应 中的作用,参与对寄生虫的免疫反应
嗜碱性粒细胞B
参与速发型变态反应
淋巴细胞L
单核细胞M
白细胞计数
定义:测定单位体积外周血中各种白细胞的总数
方法
血细胞分析仪法
显微镜计数法
原理
将全血用稀HAC稀释一定倍数,破坏RBC 后,充入牛鲍血细胞计数板,在普通光学显微镜下计数一定范围内的白细胞数量,经换算WBC数/L。
步骤
加白细胞 稀释液0.38ml于一小试管中
采血加血:用微量吸管吸取20 μl末梢血,用干棉球顺微量吸管口擦去微量吸管外余血,将其插入稀释液底部,轻轻将血放出,并吸取上清液洗涤微量吸管2~3次(注意每次不能冲浑稀释液),混匀
充液:用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴,充入计数池与盖片的缝隙中,静置2-3min,使白细胞下沉
计数计算:在显微镜下计数,低倍镜下计算 四角4个大方格内白细胞总数
WBC/L=N/4×10×10 6 ×20
报告方式: ×10 9 /L
参考值:(4.0~10.0)×10 9 /L(成人)
质量控制
采血时间的影响
最好固定采血时间
计数误差
有核红细胞影响
经验控制
嗜酸性粒细胞计数
采用直接计数法
检测原理
用适当的稀释液将血液稀释一定倍数,破坏大部分红细胞和其他白细胞,并使嗜酸性粒细胞染色,混匀后充入计数池内,计数一定体积内嗜酸性粒细胞数
加稀释液:加稀释液0.38ml于一小试管中
采血及稀释:用微量吸管吸取20 μl末梢血插入稀释液底部,混匀
充池:用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴,充入计数池与盖片的缝 隙中,室温静置2-3min,使白细胞下沉
计数:在低倍镜下计数两个计数池10个大方格内嗜酸性粒细胞总数
EOS/L=N/10×10×10 6 ×20
参考值:(0.05~0.5)×10 9 /L
标本采集时间
最好固定标本的采集时间(如上午8时或下午3时)
稀释液
稀释液中的丙酮等为嗜酸性粒细胞的保护剂,若嗜酸性粒细胞 被破坏,可适当增加其用量;但中性粒细胞破坏不全,则可适当减少其 用量
混匀
及时混匀,混匀过程中不宜过分震荡,以免嗜酸性粒细胞破碎
嗜酸性粒细胞形态
计数范围
四角和中央共10个大方格内的嗜酸性粒细胞
完成时间
血液稀释后应在30分钟至1小时内计数完毕
评价
显微镜计数法:费时费力,重复性差,不如血液分析仪法; 嗜酸性粒细胞直接计数法准确性较高
血液分析仪法:操作简便重复性好;适合于大批量的标本集中检测;用于筛查;仪器较贵
稀释液:伊红-丙酮,保护嗜酸性粒细胞
稀释液各组分作用:蒸馏水— 低渗溶解红细胞 乙 酸— 可加速红细胞溶解,同时乙酸能固定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨认 染 料— 使核略着色,且易与白细胞稀释液区别