天然药物化学-糖和苷

天然药物化学糖和苷思维导图，包括单糖的立体化学、糖和苷的分类、糖的化学性质、苷键的裂解、糖的核磁共振性质等。

糖和苷

• 糖的提取与分离
  • 提取
    • 杀酶保苷（迅速处理防止水解）
      • 采集材料（新鲜）→迅速加热干燥→冷冻保存
    • 溶剂法
      • 糖类
        • 水或稀醇（冷或热）
      • 苷类
        • 根据极性选择溶剂（大多数是醇/水）
  • 分离
    • 色谱分离
      • 活性炭柱色谱（水溶性：氨基酸、糖类及某些苷类）
        • 活性炭是非极性的，为反向物理吸附，洗脱液水、乙醇
        • 特点
          • 优点
            • 上样量大，分离效果较好，来源容易，价格低廉
          • 缺点
            • 吸附力级别无理想测定方法
          • 规律
            • MW↑（极性↓）→吸附力↑：多糖>单糖
              • ？？？多糖和单糖极性
        • 洗脱顺序
          • H2O→10%→20%→30%→50%→70%EtOH
            • 无机盐→单糖→ 二糖 →三糖 →多糖
      • 纤维素色谱（反向分配色谱）
        • 原理
          • 同纸色谱（分配层析）
          • 溶剂系统：水、丙酮、水饱和的正丁醇等
        • 洗脱顺序
          • 水→EtOH
            • 无机盐→单糖→二糖→三糖
              • 水溶性大先出
      • 离子交换柱色谱
        • 阴阳离子指的是被分离物质嘛？硼酸络合物呈什么性
        • 阳离子（酸性、中性、粘多糖）
          • 型号：CM-cellulose
          • 洗脱剂
            • pH相同，离子强度不同的缓冲液
          • 规律
            • 酸性基团多，MW大，直链→吸附力↑
        • 阴离子（中性多糖的硼酸络合物）
          • 型号：DEAE-cellulose
          • 洗脱剂
            • 不同浓度硼酸盐液
        • 离子交换层析
          • 糖的硼酸络合物（可用）
            • 不必制成衍生物
            • 直接用水溶液进行分离
          • 糖自动分析仪
            • 显色
              • 3,5-二羟基甲苯-浓硫酸
            • 波长
              • 425nm
            • 上样量
              • 每种组成不超过1mg
            • 洗脱剂
              • 四硼酸钾的缓冲溶液
      • 凝胶柱色谱（分子筛）
        • 葡聚糖凝胶Sephadex G-10/15/200（数字是吸水量。数字越大适用的分子量越大）
        • 琼脂糖凝胶Sepharose，Bio-GelA
        • 聚丙烯酰胺凝胶Bio-GelP
      • 制备性区域电泳
        • 毛细管柱 物质再电场的迁移下发生分离
        • 装柱
          • 水+玻璃粉→胶状物
            • 玻璃粉的作用：硅醇基表面带有电荷 冷却夹层的作用：迁移过程会产生热量 电泳分离效果好
          • 冷却夹层
        • 电泳缓冲液
          • 0.05M硼砂/水
        • 电泳
          • • 上端+，下端• 1.2~2V/cm, 30~35 mA • 5~12 hr
        • 处理
          • 推出、切割、洗脱、检测
  • 精制
    • 蛋白质去除
      • 多糖和蛋白质同属于大分子，水溶性好，单纯溶剂不易分开 利用蛋白质易变形的特点
      • Sevag法（温和，5次）
        • CHCl3：戊醇/丁醇：多糖水=5:1:25→剧烈振摇20min→离心除两相间变性蛋白
      • 三氟三氯乙烷法（温和，2次）
        • CF3CCl3（1:1）→搅拌10min→离心取水层（2次）
      • 三氯醋酸法
        • 3%CCl3COOH→不浑浊→5~10℃过夜→离心出沉淀
      • 酶解法
        • 胃/胰/木瓜/链蛋白酶
      • 糖蛋白的处理
        • 硼氢化钾（OH-）
    • 酸性多糖的分离
      • 季铵盐沉淀法
        • 季铵氢氧化物+酸性糖（含-COOH）→沉淀
        • 常用季铵盐
          • CTAB/CTA-OH：十六烷基三甲胺溴化物/氢氧化物
          • CP-OH：十六烷基吡啶
        • 操作
          • 1~10%CTAB/CP-OH+0.1~1%多糖溶液（搅拌下）
          • 季铵盐浓度不同→分离不同酸性多糖
        • 酸性多糖↓
          • 乳化剂与酸性多糖→↓
        • 中性多糖↓
          • 增加pH→糖酸性↑，也可以硼砂络合反应使其带上酸性
    • 不同极性多糖的分离
      • 分级沉淀/分级溶解法
        • 塘水溶液：逐步加乙醇/丙酮→↓
          • 酸性多糖，pH=2~4
          • 多糖，pH=7
          • 操作迅速，以防酸水解苷键
        • 醚化/乙酰化（溶于醇）：逐步加小极性溶剂（乙醚）→↓
• 多糖结构的测定
  • 纯度测定
    • 方法
      • 超离心法
      • HPCE
      • 凝聚色谱法 柱h：d＞40
      • 旋光测定法
        • 不同浓度乙醇↓，比较
      • 官能团摩尔比法，RI，HPLC
  • MV
  • 单糖组成的确定
  • 单糖之间连接位置的决定
  • 糖链连接顺序的决定