导图社区 28策:绝渡逢舟
miRNA研究套路,包含阻断分子(供体细胞沉默分子,阻断外泌体合成,观察受体细胞内表型变化等内容。
医学,介绍了 胃母细胞瘤(Gastroblastoma)、丛状纤维黏液瘤(plexiform fibromyxoma)、周细胞瘤(Pericytoma)、伴GLI1基因重排的恶性上皮样肿瘤(Malignant Epithelioid Neoplasm with GLI1 Gene Rearrangements)的内容。
免疫评分及免疫参数的思维导图,主要内容有简介、预后免疫参数、免疫评分(Immunoscore)和免疫背景参数、预测性免疫参数。
中性粒细胞是最丰富的粒细胞类型,占人类所有白细胞的40%至70%。作为宿主抵抗入侵病原体的第一道防线,中性粒细胞具备固有的吞噬能力,可以吸收纳米颗粒和吞噬死亡的红细胞,并在激活后清除外来病原体和加载靶点;而且,还能跨血管迁移到临近组织。是执行体内医学任务的天然候选者。
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28策:绝渡逢舟
miRNA与靶基因的结合
发生在受体细胞内
表达、分泌、外泌体中的miRNA是否被接受
一般见于5分以上的文章
研究套路
概况
上半部分
检测供体细胞的miRNA变化
表达、分泌、外泌体中的miRNA是否接受
内含miRNA变化
下半部分
受体细胞接受miRNA,明确miRNA源自外源导入
解释miRNA的功能表型及下游机制
十大步骤
供体细胞的培养上清中加入受体细胞,观察受体表型
检测外泌体内差异分子
验证是否参与细胞功能
阻断分子(供体细胞沉默分子)
阻断外泌体合成
观察受体细胞内表型变化
分离、鉴定外泌体
电镜
粒径分析
WB、免疫荧光
观察受体细胞摄入外泌体
亲脂性荧光染料标记外泌体
受体细胞产生主变量表达+表型
在检测主变量表达变化的同时检测miRNA前体的变化
动物实验
在供体细胞操作分子,用供体细胞的外泌体,注入动物模型
分子机制
miRNA-靶基因或分子通路
操作供体细胞主变量,观察受体细胞表型
操作供体细胞,受体细胞的靶基因或通路
可以增加创新性
基因变化的原因
供体细胞分泌增加?
通过囊泡分泌增加?
外泌体结合机制
rescue步骤
原则:围绕主变量是关键
主变量改变依赖于细胞交互