3、生药的鉴定

这是一篇关于生药的鉴定的思维导图，主要内容有生药鉴定、生药鉴定的一般程序方法、生药的基源鉴定、生药的性状鉴定等。

3、生药的鉴定

• 生药鉴定
  • 定义
    • 综合利用传统的和现代的检测手段，依据（中国药典）、有关政策法规、相关专著和资料，对生药进行真实性、纯度、品质优良的评价，以确保生药的真实性和有效性
  • 意义
    • 生药种类繁多，产区广泛，历史悠久。由于历代本草记载，地区用语，使用习惯的不同，类同品、代用品，民间药物不断涌出，加之一些生药外形相似的因素，导致生药的同名异物，同物异名现象普遍存在，从而严重影响中药化学、药理学研究的科学性、制剂生产的正确性、临床应用的有效性和安全性。因此，开展生药的鉴定，在判断生药的真伪、评价生药质量优劣、保证药品的安全有效等方面，有十分重要的意义。
  • 不良事件
    • 广防己被误当做防己；关木通被误当做木通。由于含有肾毒性马兜铃酸而导致急性肾衰竭。
• 生药鉴定的一般程序方法
  • 生药的取样
    • 同批生药包件的取样原则
      • ＜5件
        • 逐件取样
      • 5～99件
        • 随机取样5件
      • 100～1000件
        • 按照5%取样
      • ＞1000件
        • 按照超过部分的1%取样
      • 贵重生药全部逐个取样鉴定
    • 每一包件的取样量
      • 一般生药
        • 100～500g
      • 粉末状生药
        • 25g
      • 贵重生药
        • 5～10g
    • 抽取总量过多
      • 四分法
  • 生药的常规检查
    • 杂志检查
      • （1）取规定量的样品，摊开，用肉眼或者放大镜观察，取出杂质 （2）通过适当筛选，将杂质分离 （3）将各类杂质分别称重，计算在供试品中所含的百分数
    • 水分测定
      • 烘干法
        • 适用范围
          • 不含或少含挥发性成分
        • 方法
          • （1）取供试品2－5g，平铺于干燥的扁形称量瓶中，精密称定，在100－105℃中干燥5h （2）瓶盖盖好，移至干燥管，冷却30min并称重 （3）再次在100－105℃干燥1h，冷却称重，直至连续两次称重的差异不超过5mg为止 （4）根据减失的重量，计算其水分含量
      • 甲苯法
        • 适用范围
          • 含有挥发性成分
        • 方法
          • （1）取甲苯约250ml，加少量蒸馏水，在分液漏斗中充分振摇后放置分层，弃水层，蒸馏后备用 （2）取供试品适量（相当于含水2－4ml），精密称定，置500ml短颈烧瓶，加甲苯200ml （3）连接水分测定管以及直形冷凝管，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满水分测定管的狭长部分 （4）烧瓶加热，等待甲苯沸腾后，调节温度，使每秒溜出两滴 （5）当测定管刻度部分的水量不再增加，将冷凝管内甲苯收集，继续蒸馏5min，冷至室温 （6）使水分与甲苯完全分离，测定其水量并计算百分比
      • 减压干燥法
        • 适用范围
          • 含有挥发性的贵重物品
        • 方法
          • （1）培养皿中加入新鲜的五氧化二磷干燥剂适量，使铺成0.5－1cm的厚度，放入减压干燥器中。 （2）取供试品2－4g，混合均匀，分取0.5－1g，置于已在供试品同样条件下称重的称瓶中，精密称定。 （3）放入减压干燥器中，减压至2.67kPa（20mmHg）以下，持续30分钟，室温放置24h （4）在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管，打开活塞，使得内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，取出后迅速测定其水分百分比数
    • 灰分测定
      • 影响生药灰分含量的因素
        • （1）来源于自然的泥沙，为硅酸盐类：可以通过采收加工过程中清洗的方法降低到正常范围 （2）生药本身的细胞内含物，为草酸钙：是生药自身组织的内含物，可以通过测定酸不溶性灰分（衡量泥沙含量的重要指标）的方法，消除生药自身内含物对灰分值 的影响
      • 方法
        • 总灰分的测定
          • （1）取供试品3－5g，置坩埚中，称定重量 （2）缓缓炙热，避免燃烧，至完全碳化，升温至500－600℃，使得完全灰化并至恒重 （3）若供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热蒸馏水或10%硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，水浴蒸干，再灰化 （4）根据残渣重量计算含灰分百分数
        • 酸不溶性灰分
          • （1）取上方所得灰分，在坩埚中加入稀盐酸10ml，表面皿覆盖后水浴加热10min （2）表面皿用热蒸馏水5ml冲洗，洗液并入坩埚，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用蒸馏水洗于滤纸上，至不再显氯化物为止 （3）滤渣连同滤纸滤过，坩埚内中，干燥，炽灼至恒重，根据残渣含量计算酸不溶成分
    • 浸出物的测定
      • 水溶性浸出物
        • 冷浸法
          • （1）取供试品4g，精密称定，置于250—300ml烧瓶中 （2）精密加水100ml，密塞冷浸，前6h振摇，再静置18h （3）干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液20ml，置于蒸发皿中，水浴蒸干。 （4）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
        • 热浸法
          • （1）取供试品2～4g，称定重量，置250—300ml烧瓶中，精密加蒸馏水50—100ml，密塞，称定重量，静置1h （2）连接回流冷凝管，加热沸腾，保持沸腾1h （3）放冷取下烧瓶，密塞，称定重量，用水补足缺失水分，摇匀，干燥器滤过 （4）精密量取滤液25ml，置干燥蒸发皿中，水浴蒸干。 （5）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
      • 醇溶性浸出物
        • 按照水溶性浸出物测定法测定，但热浸法需要在水浴上加热，溶剂选用稀乙醇、95%乙醇、无水乙醇
      • 醚溶性浸出物
        • （1）取供试品2～4g，称定重量，置于恒重蒸馏瓶的脂肪抽出器中，用乙醚作为融媒，水浴加热4～6h （2）用少量乙醚冲洗回流器，洗液接入蒸馏瓶，低温蒸出乙醚 （3）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
• 生药的基源鉴定
  • 定义
    • 利用植（动）物分类学的基础知识和方法，对生药的基源进行鉴定，确定物种，给出原植动物的正确学名
  • 步骤
    • (1）实地调査和采集标本 (2）观察、记录植物形态 (3）核对文献进行鉴定：《中国植物志》、《中国高等植物图鉴》、《中国中药资源丛书》、《中药志》、《中华本草》和《常用中药材品种整理与质量研究》等。 (4）核对标本：对有疑问的生药进行最后鉴定
• 生药的性状鉴定
  • 形状
    • 是指干燥药材的形状。 观察时一般不需预处理，如观察很皱缩的全草、叶或花类，可先浸湿使软，展平后观察。
    • 天麻的红棕色芽顶称为“鹦鹉嘴”
    • 党参跟头具有多数疣状突起的茎痕称为“狮子盘头”
  • 大小
    • 细小种子类生药在放大镜下观察：车前子，菟丝子
  • 色泽
    • 一般应在日光灯下观察。色泽变化与药材质量有关。
    • 黄芩主要含黄芩苷、汉黄芩苷等，如保管或加工不恰当，黄芩苷在黄芩酶作用下水解成葡萄糖醛酸与黄芩素，黄芩素具有三个邻位酚羟基，易氧化成醌类而显绿色，黄芩变绿后质量降低。
    • 玄参要黑，丹参要紫，黄连要黄
  • 表面
    • 是指药材的表面特征是光滑还是粗糙，有无皱纹、皮孔或毛茸等。
    • 白花前胡根的根头部有叶鞘残存的纤维毛状物，是区分紫花前胡根的重要特征；马钱子表面密生银灰色绢状绒毛；蕨类植物根茎常常带有叶柄残基和鳞片
  • 质地
    • 是指接触生药时感知的特征，可分为软硬轻重、黏性粉性
    • 富含淀粉，折断时有粉尘，谓之粉性，如山药；质地柔软，含油润泽，谓之柔润，如当归；质地坚硬，断面半透明或有光泽，谓之角质，如郁金
  • 断面
    • 指药材折断时的现象和状态，如易折断或不易折断。如不易折断可用切断或破碎后观察断面特征和断面的颜色，并注意折断时有无粉尘飞扬及看断面
    • 如苍术易折断，断面放置易起霜；甘草断裂有粉尘；厚朴折断面有小亮星；何首乌有云锦纹
  • 气
    • 生药的特殊香气臭气
    • 薄荷，麝香，肉桂
  • 味
    • 品尝生药的味感
    • 乌梅，木瓜，山楂越酸越好；黄连黄柏越苦越好；甘草党参越甜越好
• 生药的显微鉴定
  • 定义
    • 生药的显微鉴定是利用显微镜对生药及成方制剂中各药的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。 通常适用于性状鉴定不易识别的生药，性状相似不易区别的多来源生药、破碎生药、粉末生药以及用粉末生药制成的丸散锭丹等中药成方制剂的鉴定。
  • 观察生药切片粉末后含物时
    • 淀粉粒
      • 甘油—醋酸试液，蒸馏水
        • 再用偏振光显微镜观察未糊化淀粉粒的偏光现象
    • 糊粉粒
      • 甘油装片
    • 菊糖
      • 水合氯醛试液装片，不加热
  • 注意事项：为了使得生药组织切片或粉末的细胞、组织能观察清楚，需要用水合氯醛试液装片透化，为了避免水合氯醛结晶，加入甘油少许，再加盖玻片
  • 根茎花叶的共性特征
• 生药的理化鉴定
  • 定义
    • 生药的理化鉴定是利用物理或化学的方法，对生药及其制剂中所含主要化学成分或有效成分进行定性和定量分析，来鉴定生药品质优良度的一种方法。
    • 理化鉴定的实验方法一般用少量干粉，切片或生药经初步提取分离后，选择理化反应速度快、灵敏度高的方法进行。
  • 一般理化鉴别
    • 物理常数
      • 包括相对密度，旋光度，折光率，硬度等
    • 呈色反应
      • 利用生药的化学成分能与某些试剂产生特殊的颜色反应加以鉴别。可在试管中、生药切面、粉末中进行理化鉴定的实验方法一般用少量干粉，切片或生药经初步提取分离后，选择理化反应速度快、灵敏度高的方法进行。
      • 甘草粉末置白磁板上，加80％硫酸1-2滴，显橙黄色（示甘草甜素反应）。
    • 沉淀反应
      • 利用生药的化学成分能与某些试剂产生特殊的沉淀反应加以鉴别。
      • 芦荟水提液，加等量饱和溴水，生成黄色沉淀（四溴芦荟素）
    • 泡沫反应和溶血指数测定
      • 生药的泡沫指数或溶血指数作为质量标准。
    • 微量升华
      • 利用生药中所含的某些化学成分，在 定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其形状、颜色以及化学反应作为鉴别特征
      • 大黄粉末升华物有黄色针状（低温时）树枝状和羽状（高温时）结晶，在结晶上加碱液则结晶溶解呈红色，可 进一步确证其为蔥醌类成分。 薄荷的升华物为无色针簇状结晶（薄荷脑），加浓硫酸2滴及香草醛结晶少许，显黄色至橙黄色，再加蒸馏水1滴即变紫红色。 斑蝥的升华物（30~140℃）为白色柱状或小片状结晶（斑蝥素）,加碱液溶解，再加酸液又析出结晶。
    • 显微化学反应
      • 显微化学反应是将生药的干粉、徒手切片或浸出液少量，置于载玻片上，滴加某些化学试剂使产生沉淀或结晶，在显微镜下观察反应结果，或产生特殊的颜色，从而进行鉴定。
      • 如黄连粉末滴加稀盐酸，可见针簇状小檗碱盐酸盐结晶析出 穿心莲叶用水湿润，制作横切片，滴加乙醇加 Kedde 试液，叶肉组织显紫红色（示穿心莲内酯类的不饱和内酯环反应）。
    • 荧光分析
      • 荧光分析是利用生药中的某些化学成分，接受自然光或紫外光照射时，能发生荧光。其特性和强度可以进行定性或定量分析。通常可直接取生药饮片、粉末或其浸出液，置暗处，用荧光仪照射进行观察。
      • 秦皮浸入水中，呈现碧色，浸出液在日光下可见蓝色荧光为真，这证实与秦皮所含的化学成分秦皮甲素和秦皮乙素有关。
  • 分光光度法
    • 紫外可见光分光光度法
      • 根据有机分子对200—760nm波长范围电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法
      • 可以测定有色物质、共轭双键等。适用于测定生药中的大类成分，如总黄酮，总蒽醌，总皂苷的测定
    • 红外分光光度法
      • 专属性强，直接压片鉴别
    • 原子吸收分光光度
      • 测定对象是显原子状态的金属元素和部分非金属元素
  • 色谱法
    • 薄层色谱法（thin layer chronmatograpgy，TCL）
      • 将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使得供试品中的化学成分分离，所得色谱图与对照组同法获得的色谱图对比，达到鉴别的目的
      • 无色物质在紫外光（254、365nm）下检视
    • 气相色谱法（gas chronmatography，GC）
      • 采用气体流动相进行分离的色谱法，最适合分析含有挥发油以及其它挥发性成分的生药。气相色谱—质谱联用技术（GC/MS）适用于分析挥发油的组成
    • 高效液相色谱法（high performance liquid chronmatography，HPLC）
      • 采用高压输液泵将流动相泵入装有填充剂的色谱柱对供试品进行分离测定的色谱分析方法，是生药含量测定的首选方法
      • 填充剂：十八烷基合硅胶
  • 化学指纹图谱
    • 将生药经过适当处理过后，应用现代色谱技术并结合化学计量及计算机方法，对生药所含化学成分的整体特征进行科学表征的专属性很强的图谱
  • 定量分析与方法学验证
    • 准确度（accuracy）
      • 用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率表示
    • 精密度（precision）
      • 定义：在规定的测试条件下，同一个均匀供试品经过多次取样测定所得结果之间的接近程度
      • 分类
        • 重复性repeatability
        • 中间精密度（intermediate precision）
        • 重现性（reproducibility）
    • 专属性（specificity）
      • 指在其它成分可能存在的情况下，采用的方法能够正确测定出被测成分的特性，也称为选择性
    • 检测限（limit of detection）
      • 供试品中被测成分能被检测出的最低浓度或最小量，无需准确定量
    • 定量限（limit of quantification）
      • 指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应该具有一定准确度和精密度
    • 线型（linearity）
      • 在设计范围内，测试结果和供试品中被测成分浓度直接成正比关系的程度
    • 范围（range）
      • 能达到一定准确度、精密度和线性，测试方法适用的高低浓度或量的区间
    • 耐用性（robustness）
      • 指在测定条件有小变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于常规检验提供数据
• DNA分子标记鉴定
  • 定义
    • 运用DNA分子标记技术对生药进行真伪优劣的鉴定，确定基源，评价质量
  • 特点
    • DNA的遗传稳定性使得DNA分子标记技术更为准确可靠
    • DNA遗传多样性使得DNA分子标记技术有广泛的实用性
    • DNA的化学稳定性使得DNA分子标记鉴别方法有较好的适用性
  • 应用
    • 适用于近源种、易混淆物种、珍稀物种、动物药材、破碎药材、陈旧腐烂药材、样品量极为有限的植物模式标本、中药出土标本、古化石标本等珍贵样品的鉴定
• 生物检定
  • 定义
    • 又称生物测定，利用药物对生物（离体或离体组织）所起的作用，以测定药物的效价或作用强度的一种方法

3、生药的鉴定

• 生药鉴定
  • 定义
    • 综合利用传统的和现代的检测手段，依据（中国药典）、有关政策法规、相关专著和资料，对生药进行真实性、纯度、品质优良的评价，以确保生药的真实性和有效性
  • 意义
    • 生药种类繁多，产区广泛，历史悠久。由于历代本草记载，地区用语，使用习惯的不同，类同品、代用品，民间药物不断涌出，加之一些生药外形相似的因素，导致生药的同名异物，同物异名现象普遍存在，从而严重影响中药化学、药理学研究的科学性、制剂生产的正确性、临床应用的有效性和安全性。因此，开展生药的鉴定，在判断生药的真伪、评价生药质量优劣、保证药品的安全有效等方面，有十分重要的意义。
  • 不良事件
    • 广防己被误当做防己；关木通被误当做木通。由于含有肾毒性马兜铃酸而导致急性肾衰竭。
• 生药鉴定的一般程序方法
  • 生药的取样
    • 同批生药包件的取样原则
      • ＜5件
        • 逐件取样
      • 5～99件
        • 随机取样5件
      • 100～1000件
        • 按照5%取样
      • ＞1000件
        • 按照超过部分的1%取样
      • 贵重生药全部逐个取样鉴定
    • 每一包件的取样量
      • 一般生药
        • 100～500g
      • 粉末状生药
        • 25g
      • 贵重生药
        • 5～10g
    • 抽取总量过多
      • 四分法
  • 生药的常规检查
    • 杂志检查
      • （1）取规定量的样品，摊开，用肉眼或者放大镜观察，取出杂质 （2）通过适当筛选，将杂质分离 （3）将各类杂质分别称重，计算在供试品中所含的百分数
    • 水分测定
      • 烘干法
        • 适用范围
          • 不含或少含挥发性成分
        • 方法
          • （1）取供试品2－5g，平铺于干燥的扁形称量瓶中，精密称定，在100－105℃中干燥5h （2）瓶盖盖好，移至干燥管，冷却30min并称重 （3）再次在100－105℃干燥1h，冷却称重，直至连续两次称重的差异不超过5mg为止 （4）根据减失的重量，计算其水分含量
      • 甲苯法
        • 适用范围
          • 含有挥发性成分
        • 方法
          • （1）取甲苯约250ml，加少量蒸馏水，在分液漏斗中充分振摇后放置分层，弃水层，蒸馏后备用 （2）取供试品适量（相当于含水2－4ml），精密称定，置500ml短颈烧瓶，加甲苯200ml （3）连接水分测定管以及直形冷凝管，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满水分测定管的狭长部分 （4）烧瓶加热，等待甲苯沸腾后，调节温度，使每秒溜出两滴 （5）当测定管刻度部分的水量不再增加，将冷凝管内甲苯收集，继续蒸馏5min，冷至室温 （6）使水分与甲苯完全分离，测定其水量并计算百分比
      • 减压干燥法
        • 适用范围
          • 含有挥发性的贵重物品
        • 方法
          • （1）培养皿中加入新鲜的五氧化二磷干燥剂适量，使铺成0.5－1cm的厚度，放入减压干燥器中。 （2）取供试品2－4g，混合均匀，分取0.5－1g，置于已在供试品同样条件下称重的称瓶中，精密称定。 （3）放入减压干燥器中，减压至2.67kPa（20mmHg）以下，持续30分钟，室温放置24h （4）在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管，打开活塞，使得内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，取出后迅速测定其水分百分比数
    • 灰分测定
      • 影响生药灰分含量的因素
        • （1）来源于自然的泥沙，为硅酸盐类：可以通过采收加工过程中清洗的方法降低到正常范围 （2）生药本身的细胞内含物，为草酸钙：是生药自身组织的内含物，可以通过测定酸不溶性灰分（衡量泥沙含量的重要指标）的方法，消除生药自身内含物对灰分值 的影响
      • 方法
        • 总灰分的测定
          • （1）取供试品3－5g，置坩埚中，称定重量 （2）缓缓炙热，避免燃烧，至完全碳化，升温至500－600℃，使得完全灰化并至恒重 （3）若供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热蒸馏水或10%硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，水浴蒸干，再灰化 （4）根据残渣重量计算含灰分百分数
        • 酸不溶性灰分
          • （1）取上方所得灰分，在坩埚中加入稀盐酸10ml，表面皿覆盖后水浴加热10min （2）表面皿用热蒸馏水5ml冲洗，洗液并入坩埚，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用蒸馏水洗于滤纸上，至不再显氯化物为止 （3）滤渣连同滤纸滤过，坩埚内中，干燥，炽灼至恒重，根据残渣含量计算酸不溶成分
    • 浸出物的测定
      • 水溶性浸出物
        • 冷浸法
          • （1）取供试品4g，精密称定，置于250—300ml烧瓶中 （2）精密加水100ml，密塞冷浸，前6h振摇，再静置18h （3）干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液20ml，置于蒸发皿中，水浴蒸干。 （4）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
        • 热浸法
          • （1）取供试品2～4g，称定重量，置250—300ml烧瓶中，精密加蒸馏水50—100ml，密塞，称定重量，静置1h （2）连接回流冷凝管，加热沸腾，保持沸腾1h （3）放冷取下烧瓶，密塞，称定重量，用水补足缺失水分，摇匀，干燥器滤过 （4）精密量取滤液25ml，置干燥蒸发皿中，水浴蒸干。 （5）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
      • 醇溶性浸出物
        • 按照水溶性浸出物测定法测定，但热浸法需要在水浴上加热，溶剂选用稀乙醇、95%乙醇、无水乙醇
      • 醚溶性浸出物
        • （1）取供试品2～4g，称定重量，置于恒重蒸馏瓶的脂肪抽出器中，用乙醚作为融媒，水浴加热4～6h （2）用少量乙醚冲洗回流器，洗液接入蒸馏瓶，低温蒸出乙醚 （3）105℃干燥3h，移动置干燥器中，冷却30min，称重计算
• 生药的基源鉴定
  • 定义
    • 利用植（动）物分类学的基础知识和方法，对生药的基源进行鉴定，确定物种，给出原植动物的正确学名
  • 步骤
    • (1）实地调査和采集标本 (2）观察、记录植物形态 (3）核对文献进行鉴定：《中国植物志》、《中国高等植物图鉴》、《中国中药资源丛书》、《中药志》、《中华本草》和《常用中药材品种整理与质量研究》等。 (4）核对标本：对有疑问的生药进行最后鉴定
• 生药的性状鉴定
  • 形状
    • 是指干燥药材的形状。 观察时一般不需预处理，如观察很皱缩的全草、叶或花类，可先浸湿使软，展平后观察。
    • 天麻的红棕色芽顶称为“鹦鹉嘴”
    • 党参跟头具有多数疣状突起的茎痕称为“狮子盘头”
  • 大小
    • 细小种子类生药在放大镜下观察：车前子，菟丝子
  • 色泽
    • 一般应在日光灯下观察。色泽变化与药材质量有关。
    • 黄芩主要含黄芩苷、汉黄芩苷等，如保管或加工不恰当，黄芩苷在黄芩酶作用下水解成葡萄糖醛酸与黄芩素，黄芩素具有三个邻位酚羟基，易氧化成醌类而显绿色，黄芩变绿后质量降低。
    • 玄参要黑，丹参要紫，黄连要黄
  • 表面
    • 是指药材的表面特征是光滑还是粗糙，有无皱纹、皮孔或毛茸等。
    • 白花前胡根的根头部有叶鞘残存的纤维毛状物，是区分紫花前胡根的重要特征；马钱子表面密生银灰色绢状绒毛；蕨类植物根茎常常带有叶柄残基和鳞片
  • 质地
    • 是指接触生药时感知的特征，可分为软硬轻重、黏性粉性
    • 富含淀粉，折断时有粉尘，谓之粉性，如山药；质地柔软，含油润泽，谓之柔润，如当归；质地坚硬，断面半透明或有光泽，谓之角质，如郁金
  • 断面
    • 指药材折断时的现象和状态，如易折断或不易折断。如不易折断可用切断或破碎后观察断面特征和断面的颜色，并注意折断时有无粉尘飞扬及看断面
    • 如苍术易折断，断面放置易起霜；甘草断裂有粉尘；厚朴折断面有小亮星；何首乌有云锦纹
  • 气
    • 生药的特殊香气臭气
    • 薄荷，麝香，肉桂
  • 味
    • 品尝生药的味感
    • 乌梅，木瓜，山楂越酸越好；黄连黄柏越苦越好；甘草党参越甜越好
• 生药的显微鉴定
  • 定义
    • 生药的显微鉴定是利用显微镜对生药及成方制剂中各药的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。 通常适用于性状鉴定不易识别的生药，性状相似不易区别的多来源生药、破碎生药、粉末生药以及用粉末生药制成的丸散锭丹等中药成方制剂的鉴定。
  • 观察生药切片粉末后含物时
    • 淀粉粒
      • 甘油—醋酸试液，蒸馏水
        • 再用偏振光显微镜观察未糊化淀粉粒的偏光现象
    • 糊粉粒
      • 甘油装片
    • 菊糖
      • 水合氯醛试液装片，不加热
  • 注意事项：为了使得生药组织切片或粉末的细胞、组织能观察清楚，需要用水合氯醛试液装片透化，为了避免水合氯醛结晶，加入甘油少许，再加盖玻片
  • 根茎花叶的共性特征
• 生药的理化鉴定
  • 定义
    • 生药的理化鉴定是利用物理或化学的方法，对生药及其制剂中所含主要化学成分或有效成分进行定性和定量分析，来鉴定生药品质优良度的一种方法。
    • 理化鉴定的实验方法一般用少量干粉，切片或生药经初步提取分离后，选择理化反应速度快、灵敏度高的方法进行。
  • 一般理化鉴别
    • 物理常数
      • 包括相对密度，旋光度，折光率，硬度等
    • 呈色反应
      • 利用生药的化学成分能与某些试剂产生特殊的颜色反应加以鉴别。可在试管中、生药切面、粉末中进行理化鉴定的实验方法一般用少量干粉，切片或生药经初步提取分离后，选择理化反应速度快、灵敏度高的方法进行。
      • 甘草粉末置白磁板上，加80％硫酸1-2滴，显橙黄色（示甘草甜素反应）。
    • 沉淀反应
      • 利用生药的化学成分能与某些试剂产生特殊的沉淀反应加以鉴别。
      • 芦荟水提液，加等量饱和溴水，生成黄色沉淀（四溴芦荟素）
    • 泡沫反应和溶血指数测定
      • 生药的泡沫指数或溶血指数作为质量标准。
    • 微量升华
      • 利用生药中所含的某些化学成分，在 定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其形状、颜色以及化学反应作为鉴别特征
      • 大黄粉末升华物有黄色针状（低温时）树枝状和羽状（高温时）结晶，在结晶上加碱液则结晶溶解呈红色，可 进一步确证其为蔥醌类成分。 薄荷的升华物为无色针簇状结晶（薄荷脑），加浓硫酸2滴及香草醛结晶少许，显黄色至橙黄色，再加蒸馏水1滴即变紫红色。 斑蝥的升华物（30~140℃）为白色柱状或小片状结晶（斑蝥素）,加碱液溶解，再加酸液又析出结晶。
    • 显微化学反应
      • 显微化学反应是将生药的干粉、徒手切片或浸出液少量，置于载玻片上，滴加某些化学试剂使产生沉淀或结晶，在显微镜下观察反应结果，或产生特殊的颜色，从而进行鉴定。
      • 如黄连粉末滴加稀盐酸，可见针簇状小檗碱盐酸盐结晶析出 穿心莲叶用水湿润，制作横切片，滴加乙醇加 Kedde 试液，叶肉组织显紫红色（示穿心莲内酯类的不饱和内酯环反应）。
    • 荧光分析
      • 荧光分析是利用生药中的某些化学成分，接受自然光或紫外光照射时，能发生荧光。其特性和强度可以进行定性或定量分析。通常可直接取生药饮片、粉末或其浸出液，置暗处，用荧光仪照射进行观察。
      • 秦皮浸入水中，呈现碧色，浸出液在日光下可见蓝色荧光为真，这证实与秦皮所含的化学成分秦皮甲素和秦皮乙素有关。
  • 分光光度法
    • 紫外可见光分光光度法
      • 根据有机分子对200—760nm波长范围电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法
      • 可以测定有色物质、共轭双键等。适用于测定生药中的大类成分，如总黄酮，总蒽醌，总皂苷的测定
    • 红外分光光度法
      • 专属性强，直接压片鉴别
    • 原子吸收分光光度
      • 测定对象是显原子状态的金属元素和部分非金属元素
  • 色谱法
    • 薄层色谱法（thin layer chronmatograpgy，TCL）
      • 将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使得供试品中的化学成分分离，所得色谱图与对照组同法获得的色谱图对比，达到鉴别的目的
      • 无色物质在紫外光（254、365nm）下检视
    • 气相色谱法（gas chronmatography，GC）
      • 采用气体流动相进行分离的色谱法，最适合分析含有挥发油以及其它挥发性成分的生药。气相色谱—质谱联用技术（GC/MS）适用于分析挥发油的组成
    • 高效液相色谱法（high performance liquid chronmatography，HPLC）
      • 采用高压输液泵将流动相泵入装有填充剂的色谱柱对供试品进行分离测定的色谱分析方法，是生药含量测定的首选方法
      • 填充剂：十八烷基合硅胶
  • 化学指纹图谱
    • 将生药经过适当处理过后，应用现代色谱技术并结合化学计量及计算机方法，对生药所含化学成分的整体特征进行科学表征的专属性很强的图谱
  • 定量分析与方法学验证
    • 准确度（accuracy）
      • 用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率表示
    • 精密度（precision）
      • 定义：在规定的测试条件下，同一个均匀供试品经过多次取样测定所得结果之间的接近程度
      • 分类
        • 重复性repeatability
        • 中间精密度（intermediate precision）
        • 重现性（reproducibility）
    • 专属性（specificity）
      • 指在其它成分可能存在的情况下，采用的方法能够正确测定出被测成分的特性，也称为选择性
    • 检测限（limit of detection）
      • 供试品中被测成分能被检测出的最低浓度或最小量，无需准确定量
    • 定量限（limit of quantification）
      • 指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应该具有一定准确度和精密度
    • 线型（linearity）
      • 在设计范围内，测试结果和供试品中被测成分浓度直接成正比关系的程度
    • 范围（range）
      • 能达到一定准确度、精密度和线性，测试方法适用的高低浓度或量的区间
    • 耐用性（robustness）
      • 指在测定条件有小变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于常规检验提供数据
• DNA分子标记鉴定
  • 定义
    • 运用DNA分子标记技术对生药进行真伪优劣的鉴定，确定基源，评价质量
  • 特点
    • DNA的遗传稳定性使得DNA分子标记技术更为准确可靠
    • DNA遗传多样性使得DNA分子标记技术有广泛的实用性
    • DNA的化学稳定性使得DNA分子标记鉴别方法有较好的适用性
  • 应用
    • 适用于近源种、易混淆物种、珍稀物种、动物药材、破碎药材、陈旧腐烂药材、样品量极为有限的植物模式标本、中药出土标本、古化石标本等珍贵样品的鉴定
• 生物检定
  • 定义
    • 又称生物测定，利用药物对生物（离体或离体组织）所起的作用，以测定药物的效价或作用强度的一种方法