细胞生物学第二章研究方法

细胞生物学第二章研究方法的思维导图，整理了细胞培养和细胞工程、生物大分子、模式生物的内容，有需要的小伙伴可以参考。

研究方法

• 细胞培养和细胞工程
  • 动/植物细胞培养
    • 动物细胞培养
      • 细胞培养：细胞培养技术是细胞生物学研究方法中最有价值的技术，通过细胞培养可以获得大量的细胞，也可通过细胞培养研究细胞的运动、信号的转导、细胞的合成代谢等。
      • 分类
        • 原代细胞
        • 传代细胞
      • 培养液：添加小牛或胎牛血清，含有生长因子，利于细胞生长。
      • 相关概念
        • 细胞贴壁
          • 分散的细胞悬液在培养瓶中很快贴附在瓶底
        • 单层细胞培养
          • 分散呈圆球形的细胞，贴壁后迅速铺展开始有丝分裂，逐渐形成致密的单层细胞
        • 细胞系
          • 原代细胞传40-50 代次，并且仍保持原来染色体的二倍体数量及接触抑制的行为，这种传代细胞称作细胞系。
        • 细胞克隆
          • 单细胞克隆培养或通过药物筛选的方法，从某一细胞系中分4离出单个细胞，增殖形成具有基本相同遗传性状的细胞群体
    • 植物细胞培养
      • 单倍体细胞培养
        • 花药或花粉在人工培养基上培养，通过发育成胚状体，然后长成单倍体植株;或通过愈伤组织诱导分化出芽和根，最终长成植株。
      • 原生质体培养
        • 体细胞经纤维素酶处理去掉细胞壁的原生质体经诱导分化长成植株。
  • 单克隆抗体
    • 细胞融合
      • 两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合 常用的融合方法有:病毒、聚乙二醇、电融合
    • 单克隆抗体技术
      • 1975年英国科学家Milstein和Kohler所发明，并获得1984年诺贝尔医学和生理学奖。
    • 原理
    • 图示
  • 显微操作
    • 细胞拆合
      • 把细胞核与细胞质分离开来，然后把不同来源的胞质体和核质体相互结合，形成核质杂交细胞 物理法:显微注射法 化学法: 细胞松弛素B处理
    • 显微操作技术
      • 显微镜下用显微操作装置对细胞进行拆合或微量注射，如核移植、显微注射基因等。
• 生物大分子
  • 荧光漂白恢复技术
    • 用于检测所标记分子在活体细胞表面或细胞内部运动及其迁移速率
  • 酵母双杂交
    • 在体内分析蛋白质 - 蛋白质相互作用利用转录激活因子的DNA 结合域(DDB)和转录激活域(AD)结合在一起才具有完整转录激活功能的原理
  • 荧光共振能量转移
    • 利用放射性同位素的电离射线对乳胶(含AgBr 或AgC1)的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究 将放射性同位素标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，制片，放射性曝光使乳胶感光
• 模式生物
  • 模式生物通常个体较小，容易培养，操作简单，生长繁殖快由于基因在进化上的保守性以及遗传密码的通用性，从一种实验生物得到的有关基因性质或功能方面的信息往往也适用于其他生物。
    • 线虫
    • 斑马鱼
    • 小白鼠
    • 动物模式生物
    • 拟南芥
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