化学发光免疫分析

临床免疫检验的化学发光免疫，参考自广州医科大学的检验课堂。

化学发光免疫分析

• 掌握
  • 掌握：酶促、直接
  • 熟悉：电化学
  • 了解：光激化学
• 特点
  • 高特异性（免疫分析）
  • 高敏感性（光信号检测)
  • 快速、高自动化
• 概述
  • 发光：物质由电子激发态恢复到基态释放的能量表现为光的发射
  • 化学发光：吸收了氧化还原反应产生的能量的发光
  • 分类
    • 酶促:需要发光剂、发光底物
    • 直接化学：碱性环境、H2O2
    • 电化学：需要电激发、电子供体
    • 光激发：标记物与微球偶联，不与抗原抗体偶联
• 酶促化学发光免疫LEIA
  • 酶蛋白标记
  • 酶催化发光底物
    • HRP
      • 鲁米诺及其衍生物（自己发射光子）
      • 对羟基苯乙酸（需要激光）
    • ALP
      • AMPPD（自己发射光子）
      • 4-MUA（需要激光）
        • 严格属于酶免疫
  • 检测光信号
• 直接化学发光免疫CLIA
  • 吖啶酯AE：不需要催化剂、外界干扰少、标记简单稳定，瞬时发光
  • 检测过程
    • 磁性微球分离法
      • 携带的功能基因可以与蛋白质直接偶联
      • 有效检测范围广
      • 反应易达到平衡，省时
      • 洗涤方便，高度自动化
    • 测定光信号
• 电化学发光免疫ECLIA
  • 电极表面进行电化学反应而发光
  • 三联吡啶钌：经过修饰可以直接标记抗原或抗体，电子供体为三丙胺
  • 特点
    • 标记物稳定
    • 电化学反应周而复始，光信号强持续久
    • 液相反应，省时
    • 生物素-亲和素系统参与——提高敏感性
    • 动态洗涤，分离好
• 光激化学发光免疫
  • 发光物质偶联于感光-发光微球表面
  • 能量传递取决于两者的距离
  • 均相定量分析