医学微生物学——衣原体（Chlamydiae）

《医学微生物学》 人民卫生出版社 第9版 第二十章 衣原体（Chlamydiae）一类严格真核细胞内寄生，具有独特发育周期，能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。

衣原体（Chlamydiae）

• 一、概述
  • 定义
    • 衣原体
      • 一类严格真核细胞内寄生，具有独特发育周期，能通过细菌滤器的原核细胞型微生物
      • 属于广义的细菌学范畴
  • 衣原体的共同特性
    • 圆形或者椭圆形，有细胞壁，革兰阴性
    • 具有独特的发育周期，二分裂方式繁殖
    • 有DNA和RNA两种核酸
    • 有核糖体
    • 严格细胞内寄生，能量代谢系统不完整
    • 对多种抗生素敏感
  • 衣原体的分类地位
    • 衣原体门（the Chlamydiae Phylum）
      • 衣原体纲（the Chlamydiia Class）
        • 衣原体目（the Chlamydiales Order)
          • 衣原体目下属8个科、12个属、21个种
            • 12个属
              • 沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体、兽类衣原体、豚鼠衣原体、流产衣原体、猫衣原体、鼠衣原体、猪衣原体
• 二、衣原体的共同特性
  • 生物学性状
    • 基因组结构
      • 环状双链DNA
        • 大小为1.0-1.24 Mb
      • 多数衣原体具有约7.5 kb的质粒
        • 非接合、非整合、不编码耐药基因
        • 但对促进感染具有重要作用
    • 形态特征
      • 两种不同形态：原体（elementary body，EB）和网状体【reticulate body，RB（始体）】
        • 原体（elementary body, EB）
          • 形态结构
            • 直径0.2-0.4 µm，电镜下可见细胞壁，中央有致密的类核结构
              • 小而致密的颗粒结构
          • 染色
            • Giemsa染色
              • 紫色
            • Macchiavello染色
              • 红色
          • 特点
            • 具有强感染性
            • 在宿主细胞外较稳定
            • 需转变为网状体后方可繁殖
        • 网状体（reticulate body，RB）
          • 又称
            • 始体（Initial body）
              • 大而疏松的网状结构
          • 形态结构
            • 直径0.5-1.0 µm，圆形或椭圆形，电子密度较低，无胞壁
          • 染色
            • Giemsa和Macchivello染色
              • 蓝色
          • 特点
            • 繁殖型
              • 以二分裂方式繁殖
            • 不具感染性
            • 在空泡内增殖后转变为原体
        • 原体与网状体性状比较
    • 发育周期
      • • 包涵体（inclusion body）
          • 定义
            • 当原体进入宿主易感细胞后，宿主细胞膜围绕原体形成的空泡
    • 培养特性
      • 专性细胞内寄生
        • 鸡胚接种
          • 6-8日龄鸡胚卵黄囊中繁殖
        • 组织细胞培养
          • 可在HeLa、McCoy或HL等细胞中生长良好
          • 接种细胞需经过一系列特殊处理
    • 抗原结构
      • 属特异性抗原
        • 位于胞壁的共同抗原脂多糖
          • 类似于G-菌的脂蛋白-脂多糖复合物
      • 种特异性抗原
        • 主要外膜蛋白 （ major outer membrane protein, MOMP）
      • 型特异性抗原
        • 位于MOMP可变区（氨基酸序列不同）
          • 可将每种衣原体分为不同生物型（biovar）及血清型
    • 抵抗力
      • 耐冷不耐热（衣服嘛，想想也对）
        • 耐冷
          • 在-60℃感染性可保持5年，液氮内可保存10年以上，冷冻干燥可保存30年以上
        • 不耐热
          • 60℃仅能存活5-10 min
      • 对常用消毒剂敏感，紫外线照射可迅速灭活
      • 四环素、多西环素、氯霉素和红霉素等可抑制衣原体繁殖
  • 致病性
    • 致病物质与致病机制
      • 肝硫素
        • 作为桥梁吸附于易感的柱状或杯状黏膜上皮细胞
      • 类似G-菌内毒素的毒性物质
        • 定位
          • 细胞壁中，不易与衣原体分开
        • 作用
          • 抑制宿主细胞代谢
          • 直接破坏宿主细胞
      • 主要外膜蛋白 （ major outer membrane protein, MOMP）
        • 阻止吞噬体与溶酶体融合
        • 表位易变异，逃避特异性抗体的中和作用
      • T3SS
        • 可将毒力蛋白，如TARP、Incs等注入宿主细胞，改变宿主细胞正常生理功能
      • 衣原体急性感染诱导大量促炎细胞因子释放
      • 衣原体还可引起持续性感染，生长停滞，炎症反应减弱，可能有助于逃避宿主免疫反应
    • 所致疾病
  • 免疫性
    • 可诱导特异性体液免疫和细胞免疫，细胞免疫为主
    • 免疫力不强、不牢固（反复感染、持续性感染、隐性感染）
    • 迟发型超敏反应（性病淋巴肉芽肿）
• 三、主要致病性衣原体
  • • 沙眼衣原体
      • 分型
        • 包括生物型和血清型
          • 沙眼生物型（Biovar trachoma）
            • 血清型A, B, Ba,C
          • 生殖生物型（Biovar genital）
            • 血清型D, Da, E, F, G, H, I, Ia, J, Ja, K
          • 性病淋巴肉芽肿生物型（Biovar lymphogranuloma venereum, LGV）
            • 血清型L1, L2, L2a, L3
      • 致病性
        • 所致疾病
          • 沙眼
            • 病原体
              • 由A、B、Ba和C血清型感染眼结膜上皮细胞引起
            • 传播途径
              • 通过眼-眼或眼-手-眼途径密切接触传播
            • 临床表现
              • 早期
                • 流泪，分泌物增多，结膜充血、滤泡增生
              • 晚期
                • 结膜瘢痕、睑内翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜损害，影响视力甚至致盲
            • 防控意义
              • 导致人类失明的最主要感染性因素
              • 致盲性沙眼在我国已经被消灭
          • 包涵体结膜炎
            • 病原体
              • 生殖生物型
              • 沙眼生物型B、Ba
            • 分2类
              • 婴儿结膜炎
                • 感染途径
                  • 经产道感染
                • 临床表现
                  • 急性化脓性结膜炎（包涵体脓漏眼），不侵犯角膜，能自愈
              • 成人结膜炎
                • 感染途径
                  • 可经两性接触
                  • 经眼-手-眼或污染的游泳池水感染
                • 临床表现
                  • 滤泡性结膜炎（游泳池结膜炎），无后遗症
          • 泌尿生殖道感染
            • 病原体
              • 生殖生物型D-K血清型
            • 传播途径
              • 性接触传播
            • 临床表现
              • 男性
                • 多表现为非淋菌性尿道炎
              • 女性
                • 表现为尿道炎、宫颈炎、输卵管炎与盆腔炎等
          • 婴幼儿肺炎
            • 病原体
              • 生殖生物型D-K血清型
          • 性病淋巴肉芽肿
            • 病原体
              • LGV生物型（性病淋巴肉芽肿生物型）L1、L2、L2a、L3
            • 传播途径
              • 性接触传播
            • 临床表现
              • 男性
                • 侵犯男性腹股沟淋巴结
                  • 引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿，常形成瘘管
              • 女性
                • 会阴-肛门-直肠组织狭窄
      • 微生物学检查法
        • 标本采集
          • 沙眼或包涵体结膜炎
            • 眼结膜刮片、穹隆部及眼结膜分泌物涂片
          • 泌尿生殖道感染
            • 泌尿生殖道拭子、宫颈刮片、精液、病灶部位活检标本
          • LGV
            • 淋巴结脓肿、生殖器溃疡或其它病灶活检标本
        • 标本处理
          • 过滤除菌
          • 含抗生素的二磷酸蔗糖（2SP）运送培养基
        • 直接涂片镜检
          • Giemsa、碘液或荧光抗体染色镜检
            • 观察上皮细胞质内有无包涵体
        • 分离培养
          • 接种于鸡胚卵黄囊或传代细胞，35℃培养，进而用IFA或ELISA检测培养物中的衣原体
        • 抗原与核酸组分检测
          • ELISA
            • 检测沙眼衣原体LPS和MOMP
          • PCR和LCR等扩增技术
            • 检测沙眼衣原体DNA
      • 防治原则
        • 注意个人卫生，避免直接或间接的接触传染
        • 抗生素治疗
          • 多西环素、罗红霉素、阿奇霉素、加替沙星等
        • 目前尚无有效的沙眼衣原体疫苗
          • MOMP是其主要候选抗原
    • 肺炎衣原体
      • 概述
        • 最早分离于1965年
        • Chlamydia Pneumoniae ，又称TWAR
      • 生物学性状
        • 原体为梨形
        • 周浆间隙明显
        • 碘染色阴性
        • 对磺胺类药物不敏感
      • 致病性
        • 传播途径
          • 经飞沫或呼吸道分泌物传播
        • 所致疾病
          • 肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等
            • 临床表现
              • 起病缓慢，一般症状较轻
              • 部分感染者发生哮喘
          • 与冠心病、动脉粥样硬化等慢性病的发生相关
      • 免疫性
        • 以细胞免疫为主、体液免疫为辅
        • 免疫力不持久，可重复感染
      • 微生物学检查法
        • 病原学检查
          • 痰标本、鼻咽拭子、支气管肺泡灌洗液
            • 直接涂片或分离培养
        • 血清学方法
          • 常用微量免疫荧光试验（MIF）
            • 可分别测定特异性IgG和IgM抗体，区分近期感染和既往感染
        • 核酸检测
          • PCR法
      • 防治原则
        • 隔离患者，避免直接接触传染
        • 无可用疫苗
        • 抗生素治疗
          • 大环内酯类、四环素类、喹诺酮类
        • 磺胺类药物无效
    • 鹦鹉热衣原体
      • 生物学性状
        • 包涵体碘染色阴性（不含糖原）
      • 致病性
        • 传播途径
          • 经呼吸道、破损皮肤、黏膜和眼结膜感染
        • 所致疾病
          • 鹦鹉热
            • 定义
              • 人兽共患自然疫源性疾病
            • 临床表现
              • 多表现为非典型性肺炎，偶见系统性并发症
      • 防治原则
        • 对饲养的鸟类加强管理
        • 抗生素
          • 四环素类、大环内酯类、喹诺酮类有效
          • 磺胺类无效