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药物分析
药学考研、药物分析资料汇总：亚硝酸钠滴定法（有芳伯氨基或潜在芳伯氨基），用永停滴定法指示反应终点；非水溶液滴定法；注射用盐酸利多卡因。
编辑于2022-04-09 20:26:10- 药学考研
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药物分析
第一章
药品标准的内涵
真伪鉴别
纯度检查
品质要求
药品质量研究内容
药物结构确证
供试品纯度大于99.0%；杂质含量小于0.5%
一般采用有机光谱分析法
多肽类药物应研究化学纯度、对映体或非对映体纯度
多糖的相对分子量及分子量分布测定可采用凝胶色谱
单一对映体的绝对构型确证方法
比旋度测定
手性柱色谱
单晶X射线衍射（直接方法）
旋光色散ORD
圆二色谱CD
物理常数
熔点
方法
毛细管法
DSC
显微熔点仪观测
含杂质的被测药物熔点往往低于纯品，熔程增大
注意事项
1、毛细管内径大，全熔温度偏高0.2～0.4摄氏度
2、升温过快，每分钟升温3.0摄氏度，熔点偏低约1摄氏度
比旋度
用于鉴别或检查光学活性药品的纯杂程度、测定光学活性药品的含量
药物检查
安全性检查
异常毒性
热原
细菌内毒素
升压物质
降压物质
无菌检查（眼用制剂、烧伤或严重创伤治疗外用制剂）
微生物
过敏性
有效性检查
动物试验为基础，临床疗效评价
均一性检查
体现各单位剂量间的均匀程度
纯度检查/杂质检查
含量在0.1%及其以上的杂质，及含量在0.1%以下的具强烈生物作用的杂质或毒性杂质，予以定性或确证结构
含量测定
容量分析法
化学原料药
光谱分析法
色谱分析法
药物制剂
辅料不干扰时，UV法
主药含量很低、无较强发色团，比色法或荧光分光光度法
生物检定法
稳定性试验
内容
原料药稳定性试验内容
影响因素试验
供试品用1批原料药物进行，将供试品置于适宜开口的容器中，摊成小于等于5mm厚的薄层，疏松原料药摊成小于等于10mm厚的薄层，进行以下试验
高温试验
60℃温度下放置10天，第5天和第10天取样；若有明显变化，40 ℃同法试验
高湿度试验
25 ℃ 90% ±5%条件下放10天，第5天和第10天取样；若吸湿增重5%以上，则在75% ±5%条件下同法试验
NaCl饱和溶液（相对湿度75% ±1%，15.5～60 ℃
KNO3饱和溶液（相对湿度92.5%，25 ℃）
强光照射试验
照度为4500lx ±500lx放置10天，第5天和第10天取样
破坏试验
加速试验
3批供试品按市售包装于40℃ ±2℃、相对湿度75% ±5%条件下放置6个月，于1、2、3、6个月末分别取一次样，不符合则在30 ℃ ±2 ℃ ，相对湿度65% ±5%检查
温度特别敏感的药物： 25 ℃ ±2 ℃ 、相对湿度60% ±10%进行
长期试验
3批供试品按市售包装于25℃ ±2℃、相对湿度60% ±10%条件下放置12个月
药物制剂稳定性试验内容
影响因素试验
加速试验
长期试验
配伍稳定性试验
药物晶型
粉末X射线衍射（直接区分）
红外吸收光谱
熔点
热分析
偏光显微镜法
结晶溶剂
热重分析—药物的吸附水/溶剂、结晶水/溶剂➕初步的分解温度
干燥失重方法—可得药物中的结晶水或溶剂吸附水或溶剂的含量
单晶X射线衍射SXRD提供药物元素组成、分子量、结构、药物中以结晶水形式存在的水或溶剂的种类、数量、存在方式、相对或绝对构型的测定
元素组成
元素分析法（可得元素种类、含量）偏差不超过0.3%
高分辨质谱法
仪器
红外测试
固态药物红外测试
压片法
糊法
薄膜法
液态药物红外测试
液膜法
气态药物
气体池
热分析法TA
热重分析TG
差示扫描量热分析DSC
质谱MS
药物的分子式、分子量测定、同位素分析、定量分析
高分辨质谱
确定药物的分子式
国外药典
USP美国药典
BP 英国药典
EP欧洲药典
不收载制剂标准
JP日本药局方
Ph.Int.国际药典
药品标准
国家食品药品监督管理总局
CFDA
国家药品监督管理部门的药品检验机构负责标定国家药品标准品、对照品
检验程序
取样（检品收检）
检验
留样
检验报告
第二章 药物鉴别试验
鉴别项目
物理常数
相对密度
馏程
熔点
凝点
比旋度
折光率
黏度
吸收系数
碘值
皂化值
酸值
一般鉴别试验
有机氟化物
有机酸盐
芳香第一胺类
托烷生物碱类
无机金属盐类
无机酸根类
专属鉴别试验
鉴别方法
化学鉴别法
呈色反应鉴别法
芳香第一胺—重氮化-偶合反应
托烷生物碱类—Vitali反应
肾上腺皮质激素类—四氮唑反应
羰基—苯肼反应
氨基酸及氨基糖苷类—茚三酮反应
氨基醇类—双缩脲反应
沉淀生成反应鉴别法
荧光反应鉴别法
气体生成反应鉴别法
使试剂褪色
测定生成物的熔点
光谱鉴别法
紫外
红外
专属性很强，主用于组分单一、结构明确的原料药（尤其适合磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素类）
GhP2015 标准图谱对照法
USP 对照品法
近红外光谱NIR
原子吸收法
核磁共振法NMR
质谱法MS
USP-大分子多肽或蛋白类药物的鉴别
粉末X射线衍射法
结晶物质鉴别和纯度检查，用于分子式和晶体结构的测定
色谱鉴别法
显微鉴别法
生物学法
指纹图谱和特征图谱鉴别法
鉴别试验条件
溶液浓度
溶液温度
溶液酸碱度
试验时间
鉴别方法验证
专属性
耐用性
第三章 杂质检查
杂质限量的控制方法
限量检查法
对照法
灵敏度法
比较法
定量检查法
杂质检查方法
化学方法
显色反应检查法
沉淀反应检查法
滴定法
生成气体的检查法
色谱方法（检查有关物质的首选方法）
薄层色谱法TLC
杂质对照法
适于已知杂质并且能够制备杂质对照品的情况
供试品溶液的自身稀释对照法
适于杂志结构不确定，或者已知杂质结构，但无杂质对照品的情况
两法并用
对照药物法
高效液相色谱法
特点
分离效能高，专属性强，检测灵敏性好
检测杂质方法
外标法（杂质对照品法）
加校正因子的主成分自身对照测定法
适用于已知杂质的控制
不加校正因子的主成分自身对照法
无杂质对照品的情况
面积归一化法
只适用于供试品中结构相似、相对含量较高、限度范围较宽的杂质含量的粗略考察（面积比是浓度比）
高效气相色谱法
测定药物中挥发性特殊性杂质（药物中残留溶剂的检查）
检测杂质方法
外标法（杂质对照品法）
加校正因子的主成分自身对照测定法
适用于已知杂质的控制
不加校正因子的主成分自身对照法
无杂质对照品的情况
面积归一化法
只适用于供试品中结构相似、相对含量较高、限度范围较宽的杂质含量的粗略考察（面积比是浓度比）
标准溶液加入法
毛细管电泳法
多肽、酶类
光谱方法
紫外-可见分光光度法
红外分光光度法
检查药物中特定的晶型杂质
原子吸收分光光度法
微量金属元素的分析（药物中重金属杂质的检查）
其他热分析法
热重分析法TG
差热分析法DTA
差示扫描量热分析DSC
酸碱度检查法
一般杂质的检查
氯化物
➕硝酸避免弱酸银盐（碳酸银、磷酸银、氧化银）的干扰 、加速氯化银的生成产生较好的浑浊
硫酸盐
铁盐
ChP2015、USP38。硫氰酸盐
BP 巯基乙酸
重金属
铅
硫代乙酰胺法
溶于水、稀酸、与水互溶的有机溶剂，且不含可与金属离子强配位的药物
炽灼后的硫代乙酰胺法
适于难溶于水、稀酸、与水互溶的有机溶剂，且含有可与金属离子强配位的药物
硫化钠法
适于溶于碱性水溶液，难溶于稀酸、稀酸中生成沉淀的药物（磺胺类、巴比妥类）
砷盐
药典方法
BP古蔡氏法、次磷酸法
USP 二乙基二硫化甲酸银法（DDC-Ag）
ChP、JP古蔡氏法、二乙基二硫代氨基甲酸银法
注意事项
古蔡氏法
2ug的As的检查
DCC-Ag法
1-10ug的As的检查
白田道夫法
20ug
次磷酸法
硫化物、亚硫酸盐、含锑药物的砷盐检查
干燥失重测定法
常压恒温干燥法
受热较稳定药物
（恒温）减压干燥法
熔点低或受热易分解
干燥剂
无水氯化钙
硅胶
五氧化二磷
干燥剂干燥法
受热分解或易升华的供试品
干燥剂
硫酸
硅胶
五氧化二磷
水分测定法
费休氏法
实际上： 碘：硫酸： 吡啶=1:3:5 甲醇过量
易与碘、二氧化硫反应的药物不适用（醛、酮、共轭多烯等有机物）
库伦滴定测定法
卡尔-费休反应为基础，永停滴定法测水分
通过测量电量总消耗量测水分总量
适于（0.0001%-0.1%）供试品。特别适用于测定化学惰性（烃、醇、酯）的水分
炽灼残渣检查法
一般使用瓷坩埚
含氟药品—铂坩埚
易碳化物检查法
比色用对照液
“溶液颜色检查”项下的不同色调色号的标准比色液
比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比色用硫酸铜液按规定方法配制成的对照液
高锰酸钾液
残留溶剂测定法
第四章 药物的含量测定与分析方法的验证
药物分析方法的验证
定量分析方法
容量分析法
相对误差0.2%以下
滴定度
光谱分析法
紫外可见分光光度法
常用汞灯或氘灯、钬玻璃校正波长
吸光度的准确度
重铬酸钾的硫酸溶液
含量测定
对照品比较法
吸收系数法
计算分光光度法
一般不宜用作含量测定
比色法
荧光分光光度法
色谱分析法
仅适用于能够气化的物质—主要用于具有挥发性或者衍生物具有挥发性的人药物及相关物质的分析
常用载气源
氮气
进样方式
溶液直接进样
自动进样
顶空气体进样
适用于固体和液体供试品中挥发性组分的分离测定
高效液相色谱法
检测器
质谱检测器
不得使用含不挥发性盐组分的流动相
选择性检测器
电化学检测器
荧光检测器
紫外-可见分光检测器（包括二极管阵列检测器）
选用色谱级有机溶剂
通用型检测器
示差折光检测器
蒸发光散射检测器
响应值与被测物质的量成指数关系，需对数转换
不得使用含不挥发性盐组分的流动相
系统适用性试验
理论板数
评价其分离效能
分离度R
评价待测物质与被分离物质间的分离程度，是衡量色谱系统分离效能的关键指标
待测物质峰与相邻色谱峰间的分离度大于1.5
灵敏度（S/N表示）
评价色谱系统检测微量物质的能力
定量测定
S/N不小于10
定性测定
S/N不小于3
拖尾因子T
评价色谱峰的对称性
以峰高作定量参数时，T值应在0.95～1.05间
重复性
评价色谱系统连续进样时响应值的重复性能
外标法
取对照品溶液连续进样5次，处另有规定外，峰面积测量值的相对标准偏差不大于2.0%
内标法
制备80%、100%、120%的对照品溶液，加入内标溶液得不同浓度的溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子，相对标准偏差不大于2.0%
色谱柱
反向色谱柱
非极性填充剂
正相色谱柱
硅胶填充剂
离子交换色谱柱
离子交换填充剂
手性分离色谱柱
手性填充剂
验证的分析项目
准确度
原料药的含量测定
制剂的含量测定
数据要求
规定范围内取同一浓度的供试品至少测定6份样品的结果进行评价
设计3种不同浓度，每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9份样品的测定结果进行评价
精密度
含量测定
杂质的定量测定
验证内容
重复性
中间精密度
重现性
专属性
鉴别试验
杂质检查
含量测定方法
检测限
反映方法是否具备足够的检测灵敏度
药物鉴别试验
杂质检查方法
无需准确定量
常用方法
直观法
信噪比法
S/N=3:1 或2:1
定量限
微量或痕量药物分析、定量测定药物杂质与降解产物
常用方法
直观法
信噪比法
S/N=10:1
基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法
线性
含量测定、杂质定量检查、溶出度测定
测定方法
至少制备5份不同浓度的对照品溶液
范围
含量测定、含量均匀度、溶出度或释放度、特殊元素或特殊杂质的定量检查项目
耐用性
样品的制备方法
直接溶解法
固体分散法（溴化钾压片法）
提取分离法
萃取浓集法
化学分解法
适用于分子结构无特征反应，但是具有潜在特征基团或含金属、卤素等药物分析的制备
分类
水解法
适用于含潜在特征官能团药物鉴别试验和结合不牢固的含金属有机药物的鉴别和含量测定的样品
锌粉还原法
化学衍生化法
适用于无可检测基团（游离或潜在）或特征元素的药物分析的制备
有机破坏法
第五章 体内药物分析
体内药物分析测定方法
色谱分析法
免疫分析法
适用于体内样品中生物大分子类药物的测定
生物学或微生物学法
适用于体内样品中抗生素类药物的测定
分析方法验证内容
分析方法的效能指标
样品稳定性
提取回收率的验证
体内样品
血样
每次采血0.2-5ml
血浆制备的量为全血50%～60%
血清为全血的20%～40%
尿样
用于
药物的物质平衡、排泄途径、尿清除率
pH在4.8～8之间
唾液
漱口后15分钟采集
组织
甲醇/水（缓冲液）-甲醇 组织匀浆
处理方法
沉淀蛋白法
酸水解
碱水解
酶水解法
枯草菌溶素
头发
用于
体内微量元素的含量测定
用药史的估计
临床用药物
非法滥用药物的甄别
毒性药物的检测
处理方法
甲醇直接提取
酸水解（0.1mol/L盐酸）
碱水解（1mol/L氢氧化钠）
酶水解（B-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶）
体内样品的储存与处理
冷藏冷冻
尿样不立即测定，需加入防腐剂（甲苯、二甲苯、三氯甲烷、醋酸、盐酸）4 ℃保存24～36h
血浆与血清最迟2h内分离，4 ℃短期保存
唾液在4 ℃下保存
去活性
体内样品处理方法
蛋白沉淀法
溶剂沉淀法
甲醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃
中性盐析法
强酸沉淀法
10%三氯乙酸溶液➕6%高氯酸溶液
热凝固法
加热至90 ℃
分离与浓集
缀合物的水解
酸水解法
酶水解法
溶剂解法
化学衍生化
药物分子含有活泼氢
体内样品检测方法
色谱分析法
小分子药物药代动力学及代谢产物研究、生物利用度、生物等效性试验、治疗药物监测
免疫分析法
蛋白质、多肽等生物大分子类物质
生物学法
抗生素类药物体内分析
多组分及体内存在活性代谢产物的抗生素的药代动力学➕代谢产物研究应用色谱分析法
体内样品分析方法验证
选择性
定量下限
响应函数和校正范围
准确度
基质效应
分析物在生物基质及溶液中储存和处理全过程中的稳定性试验
第六章 芳酸类非甾体抗炎药
分类
邻羟基本甲甲酸
邻氨基苯甲酸
邻氨基苯乙酸
芳基丙酸
吲哚乙酸
苯并噻嗪甲酸
理化性质
酸性
氢氧化钠直接滴定法
水解性
吸收光谱特性
本类药物溶出度与释放度测定、含量均匀度检查法、部分制剂含量测定
基团或元素特征
酚羟基（对乙酰氨基酚、水杨酸）
三价铁
二苯甲酮（酮洛芬）
二硝基苯肼
硫元素（美洛昔康）
热分解与醋酸铅成黑色硫化铅
鉴别试验
方法
显色反应、沉淀反应、紫外、红外可见分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法
三氯化铁反应
水杨酸类➕三氯化铁
紫堇色配合物
双水杨酯➕氢氧化钠煮沸水解➕三氯化铁
紫色
二弗尼柳➕乙醇➕三氯化铁
深紫色
酚羟基反应（对乙酰氨基酚）➕三氯化铁
蓝紫色
烯醇式➕三氯甲烷➕三氯化铁
比洛昔康
玫瑰红色
美洛昔康
淡紫红色
缩合反应
酮洛芬的二苯甲酮结构➕二硝基苯肼
橙色偶氮化合物
重氮化偶合反应
芳伯氨基或潜在芳伯氨基（对乙酰氨基酚）
酸性溶液➕亚硝酸钠试液➕碱性B萘酚
红色偶氮化合物
其他反应
水解反应
阿司匹林➕碳酸钠成盐，➕稀硫酸得白色水杨酸沉淀
元素反应
氯元素（氯化物鉴别）
硫元素（美洛昔康）
试管炽灼，产生的气体能使湿润醋酸铅试纸显黑色
光谱法
紫外分光光度法
红外分光光度法
原料药
色谱法
有关物质的检查
阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸的检查
对乙酰氨基酚中对氨基酚、对氯苯乙酰氨的检查
二弗尼柳
有关物质I— TLC
有关物质II— HPLC
甲芬那酸
2，3-二甲基苯胺 —GC
TLC
布洛芬
酮洛芬
含量测定
原料药的含量测定
酸碱滴定法（主）
对乙酰氨基酚（紫外-可见分光光度法）
双氯芬酸钠➕吡罗昔康（非水溶液滴定法）
制剂的检查性定量测定
紫外可见分光光度法
双水杨酯片（酸碱滴定法）
制剂的含量测定
紫外可见分光光度法
HPLC
第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析
具备苯乙胺结构
药理作用
升高血压
收缩血管
散大瞳孔
支气管舒张
驰缓胃肠肌
加速心率
加强心肌收缩率
理化性质
酚羟基
重金属离子配位
遇光/热 易氧化
弱碱性（烃氨基侧链的仲胺氮）
旋光性（手性碳）
紫外254nm（苯环）
鉴别
铁盐
绿色-紫色-紫红色
盐酸去甲肾上腺素➕三氯化铁—紫色
盐酸异丙肾上腺素➕三氯化铁（深绿色）➕5% 碳酸氢钠溶液（蓝色）再变红色
子主题
重酒石酸去甲肾上腺素➕三氯化铁（翠绿色）➕碳酸氢钠（蓝色）再变红色
肾上腺素➕三氯化铁（翠绿色）➕氨试液（紫色）再变紫红色
盐酸多巴胺➕三氯化铁（墨绿色）➕1%氨试液（紫红色）
硫酸沙丁胺醇➕三氯化铁—紫色；➕碳酸氢钠— 橙黄色
甲醛-硫酸
肾上腺素— 红色
盐酸异丙肾上腺素— 棕色—暗紫色
重酒石酸去甲肾上腺素—淡红色
盐酸去氧肾上腺素—玫瑰红—橙红—深棕红
盐酸甲氧明—紫色— 棕色— 绿色
拓展
苯巴比妥的甲醛硫酸反应
还原性反应
氨基醇双缩脲反应
盐酸麻黄碱
盐酸伪麻黄碱
盐酸去氧肾上腺素
➕硫酸铜（蓝色或蓝紫色）➕氢氧化钠（中和盐酸，变成游离态）➕乙醚
乙醚层显紫红色，水层蓝色
盐酸麻黄碱
乙醚层不显色
盐酸去氧肾上腺素
脂肪伯氨Rimini反应-重酒石酸间羟胺
加水溶解，➕亚硝基铁氰化钠➕丙酮➕碳酸氢钠—红紫色
特殊杂质检查
酮体杂质检查
紫外分光光度法（310nm处）
光学纯度的检查
测比旋光度值
手性药物
色谱法
电泳法
有关物质的检查
盐酸去氧肾上腺素-薄层色谱法
其它药物-高效液相色谱法
含量测定
原料药的测定
非水溶液滴定法
PKb >8 的有机弱碱性及其盐类原料药的含量测定
一般是高氯酸非水溶液滴定法
加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液— 消除盐酸对滴定的干扰，
有机酸盐➕磷酸盐
直接滴定
硫酸盐可直接滴定
滴定至硫酸氢盐品；终点不灵敏，采用电位滴定法
硝酸盐
电位滴定法
适用范围
8～10 ；冰醋酸为溶剂
10～12 ；冰醋酸➕醋酐
>12 ； 醋酐
终点指示方法
电位滴定法
指示剂法
溴量法-盐酸去氧肾上腺素、重酒石酸间羟胺原料药及注射液
亚硝酸钠法-盐酸克仑特罗
酸性溶液➕亚硝酸钠➕永停滴定法
制剂的测定
紫外分光光度法
比色法
盐酸克仑特罗栓
盐酸异丙肾上腺素气雾剂
高效液相色谱法-药物及制剂
盐酸氨溴索口服液溶液、片剂、胶囊、缓释胶囊
硫酸沙丁胺醇注射液、片剂、缓释片、缓释胶囊
检验与监督
检验机构
CFDA的国家级药品检验机构： 中国药品检验总所
检验程序
取样
检验
留样
检验报告
第八章 对氨基苯甲酸酯类、酰苯胺类局麻药
对氨基苯甲酸酯类
苯佐卡因
盐酸丁卡因（芳伯氨基被取代）
盐酸普鲁卡因
盐酸氯普鲁卡因
酰苯胺类局麻药
盐酸利多卡因
盐酸布比卡因
盐酸罗哌卡因
理化性质
芳伯氨基特性
盐酸丁卡因除外
水解特性
弱碱性
除苯佐卡因外，侧链有叔胺氮原子
能与生物碱试剂发生沉淀
水中不能直接用标准酸滴定，只能在非水溶剂体系滴定
重氮化-耦合反应 （具有芳伯氨基及潜在芳伯氨基）
重金属离子反应特性
吸收光谱
物理特性
游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水
盐酸盐易溶于水和乙醇
化学结构
亲脂性芳香环
中间连接功能基
亲水性胺基
鉴别
重氮化反应（芳伯氨基/潜在芳伯氨基）
盐酸丁卡因
芳香仲胺
乳白色沉淀
金属离子
盐酸普鲁卡因胺
浓过氧化氢氧化（氧化成羟肟酸）+三氯化铁—紫红（羟肟酸铁）—暗棕色—棕黑色
盐酸利多卡因
🌟🌟🌟盐酸利多卡因➕碳酸钠溶液+硫酸铜溶液—蓝紫色配合物+三氯甲烷黄色，同条件下，氨基甲酸酯不反应
酸性溶液中➕氯化钴=亮绿色沉淀
🌟🌟🌟硝酸酸化+硝酸汞煮沸=黄色
🌟🌟🌟对氨基苯甲酸酯类-红色或橙黄色
水解产物反应（对氨基苯甲酸酯类）P252
🌟🌟🌟盐酸普鲁卡因与苯佐卡因的鉴别
盐酸普鲁卡因
➕水溶解➕10%氢氧化钠=白色普鲁卡因沉淀；加热，变油状物（普鲁卡因）；加热，蒸气（二乙氨基乙醇）使湿润的红色石蕊试纸变蓝；加热至油状物消失，（生成对氨基苯甲酸钠），放冷，加盐酸，析出白色沉淀（对氨基苯甲酸），溶于过量盐酸。
苯佐卡因
➕氢氧化钠试液煮沸，生成乙醇，➕碘试液，得黄色沉淀，有氯仿臭气
制备衍生物测熔点
盐酸丁卡因
特殊杂质
对氨基苯甲酸酯类
盐酸丁卡因—丁氨基苯甲酸为对照品— 薄层色谱法
盐酸普鲁卡因及注射夜
高效液相色谱法
酰苯胺类局麻药
2，6-二甲基苯胺
含量测定
亚硝酸钠滴定法（有芳伯氨基或潜在芳伯氨基），用永停滴定法指示反应终点
测定主要条件
加入适量溴化钾—加快重氮化反应速度
芳伯氨基碱性越弱，酸性溶液中成盐的比例越小，游离芳伯氨基越多，重氮化反应速度越快
过量盐酸
酸度过大
阻碍芳伯氨基的游离
太浓的盐酸使亚硝酸分解
适宜比例
芳胺类药物： 酸（摩尔比）=1:（2.5～6）
作用
加速重氮化反应
重氮盐在酸性溶液中稳定
防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果
温度
低温
一般温度每升高10℃，重氮化反应速度加快2.5倍，重氮盐分解速度加快2倍（15 ℃）
滴定速度
滴定时将滴定管尖端插入液面下2/3处
最后一滴加入时，搅拌1～5分钟，再滴定终点
GP2015
苯佐卡因
盐酸普鲁卡因
注射用盐酸普鲁卡因
盐酸普鲁卡因胺➕片剂➕注射剂
非水溶液滴定法
盐酸布比卡因
盐酸利多卡因
盐酸丁卡因（乙醇为溶剂）
紫外分光光度法
注射用盐酸丁卡因
HPLC
注射用盐酸利多卡因
第九章 二氢吡啶类钙离子通道阻滞剂 避光
结构
苯基-1，4-二氢吡啶
代表药物
苯磺酸氨氯地平
有硝基
硝苯地平
尼地平
尼伐地平
尼卡地平
尼索地平
尼群地平
尼莫地平
理化性质
还原性（二氢吡啶环）
硝基的氧化性
二氢吡啶环氨基质子解离性，与碱发生解离p-兀共轭而成颜色变化
光不稳定性（光化学歧化反应）
旋光性
吸收光谱特性
鉴别
化学鉴别
硝基的氧化性
亚铁盐反应
尼莫地平、片剂、分散片、胶囊、软胶囊（红棕色）
硝基的还原性
重氮化-耦合反应
（苯环的硝基酸性条件下被锌还原为芳伯氨基） 硝苯地平 红色
二氢吡啶1，4位氢的解离性
药物的丙酮溶液与氢氧化钠试液反应
尼索地平、尼群地平制剂、硝苯地平及制剂呈橙红色
环的弱碱性
🌟🌟🌟沉淀反应（重金属盐类成沉淀）
尼莫地平➕氯化汞— 白色沉淀
尼群地平➕碘化铋钾— 橙红色沉淀
关联
氯氮卓类药物的沉淀反应
分光光度法
色谱法
有关物质的检查
苯磺酸氨氯地平
ChP —TLC正相
USP—HPLC反相
含量测定
铈量法/硫酸铈法（环的还原性）
二氢吡啶原料药
硝苯地平： 硫酸铈=1:2
邻二氮菲作指示剂
非水溶液滴定法（环的弱碱性）
盐酸尼卡地平
非水碱量法
紫外可见分光光度法
GhP2015— 尼群地平软胶囊
JP16—硝苯地平
高效液相色谱法
第十章 巴比妥类及苯二氮卓类药物分析
苯巴比妥类
结构
环状丙二酰脲结构
理化性质
弱酸性
1，3二酰亚胺基团
水解反应
酰亚胺结构遇碱共沸产生氨气
红色石蕊试纸变蓝
🌟🌟🌟区分异戊巴比妥与巴比妥
pH以上，碱度增加，水解速度加快
金属离子
银盐
碳酸钠+过量硝酸银—白色沉淀
铜盐
🌟🌟🌟吡啶溶液中➕铜吡啶溶液
巴比妥类—紫色或紫堇色
含硫巴比妥类
绿色
钴盐
巴比妥类在碱性条件下与钴盐反应—紫堇色配合物—（有机碱- 异丙胺）
汞盐
巴比妥类+硝酸汞—白色沉淀，在氨试液溶解
香草醛（丙二酰脲的H）+浓硫酸—棕红色
紫外吸收光谱
随电离级数的不同而不同
酸性条件下
5，5-二取代与1，5，5-三取代巴比妥类不电离，无明显紫外吸收峰
pH=10—一级电离（240nm）
pH=13
5，5-二取代巴比妥类二级电离（255nm）
1，5，5-三取代巴比妥类不电离（240nm）
硫代巴比妥类药物在酸性条件和碱性条件均有明显的紫外吸收
薄层色谱
显微结晶
用途
（不）同类药物的鉴别；生物样品中微量巴比妥类药物的检验
加热的1%巴比妥类酸性药物
巴比妥
长方形
苯巴比妥
球型变为花瓣型
3%-5%巴比妥药物钠盐的水溶液➕1滴稀硫酸—析出相应巴比妥类药物结晶
巴比妥类药物➕重金属离子结晶
巴比妥+硫酸铜-吡啶——紫色结晶
苯巴比妥+硫酸铜-吡啶——浅紫色不规则洁晶
鉴别试验
丙二酰脲
银盐➕铜盐
特征基团反应
🌟🌟🌟硫元素的鉴别
氢氧化钠➕铅离子得白色沉淀；加热变为硫化铅黑色沉淀
区分巴比妥类与硫巴比妥类
不饱和取代基的鉴别（司可巴比妥）
芳环取代基鉴别（苯巴比妥）
硝酸钾➕硫酸得黄色硝基化合物
🌟🌟🌟苯巴比妥与不含有芳基取代基的巴比妥类药物、苯巴比妥与苯巴比妥片
➕硫酸-亚硝酸钠反应的橙黄色产物
🌟🌟🌟甲醛—硫酸反应
苯巴比妥 玫瑰红
其他类 无反应
关联
苯乙胺类药物
熔点
吸收光谱
有关物质检查
酸度
苯基丙二酰脲
乙醇溶液的澄清度
中性或碱性物质
有关物质HPLC
含量测定
银量法
苯巴比妥➕钠盐；异戊巴比妥➕钠盐➕制剂
银-玻璃电极系统电位法指示终点
结果偏高
溴量法
5取代有不饱和键
司可巴比妥钠原料药➕胶囊
淀粉指示液
紫外分光光度法
碱性介质
注射用硫喷妥钠
酸碱滴定法
水—乙醇混合溶剂的滴定
胶束水溶液中进行的滴定
非水溶液滴定法
提取重量法
HPLC法
GC法
电泳法
苯二氮卓类
理化性质
弱碱性
水解性（二苯甲酮衍生物）
UV吸收特性
鉴别试验
化学鉴别
沉淀反应
碘化铋钾试剂
氯氮卓
阿普唑仑
盐酸氟西泮
硫酸—荧光反应
地西泮—黄色
稀硫酸中为黄绿色
氯氮卓—黄色
稀硫酸中为紫色
特征基团
氯化物
芳伯胺
吸收光谱特征
色谱法
有关物质检查
TLC/HPLC
三唑仑
GC法（USP）
HPLC（GhP）
含量测定
非水溶液滴定法
非水碱量法
弱碱性药物
非水酸量法
奥沙西泮➕劳拉西泮
氢氧化四丁基铵滴定液
第十一章 吩噻嗪类（抗精神分裂症）避光
结构
硫氮杂蒽母核
代表药物
氯丙嗪
奋乃静
盐酸异丙嗪
久置为蓝色
主要理化性质
弱碱性
易氧化性（光照易氧化变色，避光保存）
金属离子配合呈色（Pd离子与母核S）
不受氧化物亚砜和砜的干扰
紫外吸收特性
2位卤素取代—红移；2位- SCH3取代（盐酸硫利达嗪） 红移更显著
205nm、254nm（最强吸收）、300nm
参数
最大吸收波长
一定浓度的溶液在最大吸收波长处的吸光度
多个最大吸收波长处的吸光度比值
最大吸收波长处的吸收系数
红外吸收特性
鉴别
化学法
母核鉴别
生物碱试剂沉淀，测生成物熔点
三硝基苯酚
氧化显色反应
Pd离子呈色
卤素取代基药物及制剂
焰色反应
奋乃静—绿色
显色反应
F取代基➕酸性条件➕茜素锆
癸氟奋乃静— 黄色
盐酸氟奋乃静注射液—由红变黄
吩噻嗪的盐酸盐及其制剂
氯化物的鉴别
硝酸银的沉淀
与MnO2的氧化还原
光谱
红外
吩噻嗪类原料药
IR
制剂
提取后IR
紫外
254nm
色谱
TLC
采用薄层色谱法鉴别吩噻嗪类药物及其制剂时，供试品溶液主斑点与对照品溶液主斑点的Rf值应一致
HPLC
采用高效液相色谱法鉴别吩噻嗪类药物及其制剂时，供试品溶液与对照品溶液的主峰保留时间应一致
测定熔点
有关物质检查
盐酸氯丙嗪
不加校正因子的主成分自身对照法
扫尾—乙腈
增强杂质的保留—三氟乙酸
奋乃静
不加校正因子的主成分自身对照法
由于原料药的有关物质在制剂过程中可能增加，与盐酸氯丙嗪的有关物质限量相比，盐酸氯丙嗪制剂的有关物质限量有所增加，放宽了限制
含量测定
酸碱滴定法
非水溶液滴定法
吩噻嗪类药物及其盐酸盐原料药含量测定
玻璃电极为指示电极；饱和甘汞电极为参比电极
乙醇-水溶液的氢氧化钠滴定法
药物盐酸盐含量测定
电位法滴定终点
制剂含量测定
分光光度法
直接分光光度法
适于纯度较高，杂质、辅料无干扰或干扰易排除的吩噻嗪类药物制剂的含量测定
盐酸氯丙嗪片
奋乃静片
提取后分光光度法（排除辅料的干扰）
盐酸异丙嗪口服液
提取后双波长分光光度法（排除辅料、氧化物的干扰）
盐酸氯丙嗪注射液
二阶导数分光光度法（方便的消除）
钯离子比色法
不受氧化物的干扰
吩噻嗪类药物在pH2±0.1的缓冲溶液与钯离子形成红色配合物，在500nm有最大吸收
HPLC
反相高效液相色谱法RP-HPLC
扫尾剂（醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈）
抑制碱性药物与弱酸性硅醇基的作用
离子对高效液相色谱法ion-pair RP-HPLC
离子对试剂
弱碱性吩噻嗪类药物常用烷基磺酸盐阴离子对试剂： 戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠；（可：高氯酸、三氟乙酸、磷酸）
分析复杂样品中的微量药物的首选方法
LC-MS
可用于吩噻嗪类药物的血药浓度监测
反向色谱、离子对色谱— 分离； 紫外检测器—检测
第十二章 喹啉与青蒿素类抗疟药
喹啉类药物
结构与性质
成了药物是奎宁；结构式喹啉：苯环➕吡啶环
弱碱性（奎宁上的氮原子）
旋光性（喹啉类药物基本都具有手性）
荧光特性（硫酸奎宁➕二盐酸奎宁）—稀硫酸中显蓝色
紫外吸收光谱（苯环与吡啶环共轭）
鉴别
绿奎宁反应
硫酸奎宁➕二盐酸奎宁
药物➕氯水/溴水 ➕氨水——得绿色铵盐（成中性为蓝色；酸性为紫红色）
光谱特征
荧光（稀硫酸显蓝色）
紫外
红外
无机酸盐反应
硫酸盐（硫酸奎宁）
氯化钡
醋酸铅
🌟🌟🌟盐酸（区别硫代硫酸盐）
氯化物（二盐酸奎宁）
磷酸盐
磷酸哌喹（还有硫氰酸铵反应）
磷酸伯氨喹（还有钼钒酸铵反应）
磷酸氯喹
磷酸咯萘啶
有关物质检查
硫酸奎宁
酸度
三氯甲烷-乙醇中的不溶物
其他金鸡钠碱
HPLC/TLC 的主成分自身对照法/杂志对照品对照法
碘铂酸钾为显色剂
含量测定
非水溶液滴定法
青蒿素类药物
药物
磷酸咯萘啶
酸度
甲醛
四氢吡啶
氯化物
水中不溶物
干燥失重
青蒿素
蒿甲醚（青蒿素的脂溶性衍生物）
青蒿素琥酯（青蒿素的水溶性衍生物）
二氢青蒿素（青蒿琥酯的体内活性代谢物）（青蒿素还原制得）
结构与性质
氧化性（过氧桥的倍半萜内酯类化合物）
旋光性（均为右旋体）
UV吸收特性
水解反应（青蒿素有内脂，可水解；其他不可以）
鉴别试验
呈色反应
碘化钾试液-淀粉（过氧化桥的氧化）
青蒿素： 碘化钾➕淀粉
双氢青蒿素： 碘化钾
羟肟酸铁反应（内酯、羧酸衍生物、一些酯类化合物）
HPLC
IR
香草醛—硫酸
二氢青蒿素
含量测定
青蒿素类原料药物
HPLC
双氢青蒿素片的溶出量
水解后用UV法
十三章 莨菪烷类药物
性质
碱性（易成盐）
水解性（胆碱酯类）
旋光性（硫酸阿托品为外消旋体，无旋光性；其余为左旋）
鉴别
托烷生物碱的Vitali反应
水解成莨菪酸，➕发烟硝酸并加热，➕氢氧化钾显色
硫酸-重铬酸钾反应： 水解成莨菪酸➕硫酸-重铬酸钾加热成苯甲醛，散发出苦杏仁味
生物显色剂/沉淀剂
氢溴酸东莨菪碱
二氯化汞的乙醇溶液成白色沉淀
硫酸盐与溴化物
氢溴酸东莨菪碱
➕氯试液，➕三氯甲烷，成黄色/红棕色
光谱➕色谱
氢溴酸山莨菪碱注射液
TLC
有关物质检查
氢溴酸东莨菪碱
酸度
易氧化物
其他生物碱
➕氨试液不得浑浊
➕氢氧化钾，瞬即发生浑浊
氢溴酸山莨菪碱
TLC
氢溴酸后马托品➕丁溴东莨菪碱
HPLC
硫酸阿托品
旋光性
含量测定
非水溶液滴定法（非水碱量法）/原料药
酸性染料比色法（制剂）
HPLC
丁溴东莨菪碱注射液
硝酸银电位滴定法
丁溴东莨菪碱原料药
十四章 维生素类
维生素A
结构
共轭多烯醇侧链的环己烯，有多个立体异构体
天然维A主要是全反式维生素A
性质
溶解性
不溶于水
不稳定性
多个不饱和键，易被氧化、紫外光裂解
维生素A醋酸酯要比维生素A稳定
维生素A及制剂需密封在凉暗处保存，充入氮气或加入合适的抗氧化剂
紫外吸收特性
第一法（直接测定法）
维生素A醋酸酯
环己烷
第二法（皂化法）
维生素A醇
异丙醇
维生素A、维生素A软胶囊、维生素A D软胶囊中维生素A的测定
饱和无水的三氯甲烷中与三氯化锑呈蓝色
鉴别
三氯化锑
紫外
TLC法
含量测定
紫外可见分光光度法（三点校正法）
HPLC法
三氯化锑比色法
维生素B1 （盐酸硫胺）
结构
氨基嘧啶环➕噻唑环
性质
溶解性（溶于水显酸性）
硫色素反应
碱性介质中开环，➕铁氰化钾氧化成硫色素于正丁醇中显蓝色
氯化物特性
与生物碱沉淀试剂反应
紫外吸收特性
鉴别
硫色素
硫元素反应
与NaOH 共热分解成硫化钠，➕硝酸铅生成黑色沉淀
氯化物
沉淀反应
红外
含量测定
非水溶液滴定法
原料药的首选
2个碱性基团，VB： 高氯酸=1:2
硫色素荧光法
紫外分光光度测定
片剂➕注射剂
维生素C
结构
烯二醇➕内酯环➕旋光性
性质
溶于水显酸性
C3位—OH酸性强
旋光性（2个手性碳）
还原性（烯二醇结构）
水解性
糖类的性质
紫外吸收特性
鉴别
硝酸银反应（➕硝酸银氧化成去氢维生素C，产生黑色银沉淀）
二氯靛酚钠反应
二靛酚钠被还原为无色酚亚胺
其他氧化剂
0.05% 亚甲蓝乙醇溶液，深蓝色褪色
碱性酒石酸铜试液得砖红色沉淀
亚甲蓝、高锰酸钾、磷钼酸
糖类的反应（三氯醋酸或盐酸溶液➕吡咯成蓝色）
TLC
紫外光谱
杂质检查
溶液澄清度与颜色检查（吸光度法）
铁离子、铜离子检查
草酸的检查（维生素C原料药➕注射液）
含量测定
碘量法
二氯靛酚法
制剂
HPLC
制剂➕体液中维生素C的测定
维生素D（固醇衍生物）
性质
遇光易变质
不溶于水
不稳定性
旋光性
显色反应
紫外吸收特性
鉴别试验
显色
醋酐-浓硫酸反应
黄红紫绿
三氯化锑
橙红色
三氯化铁
橙黄色
二氯丙醇➕乙酰氯
绿色
比旋度
TLC HPLC 制备衍生物测熔点
🌟🌟🌟维生素D2与D3区别
➕乙醇➕硫酸
VD2显红色，570nm
VD3显黄色，495nm
杂质检查
VD2检查麦角固醇
前维生素D光照产物检查
有关物质
NP- HPLC
维生素E（a-生育酚及酯类）
苯并二氢吡喃结构
性质
不溶于水（粘稠液体）
加热水解成生育酚
可氧化性
紫外吸收
鉴别
硝酸反应
➕硝酸水解后氧化成生育红显橙红色
三氯化铁反应
碱性水解成生育酚➕三氯化铁➕2，2’-联吡啶显血红色
紫外光谱
杂质检查
酸度（游离醋酸）
天然生育酚（硫酸铈滴定法）
有关物质
残留溶剂
含量测定
硫酸铈滴定法
GC
H PLC
荧光分光光度法
十五章 甾体激素类
结构
环戊烷并多氢菲母核
分类及结构特点
按药理作用
肾上腺皮质激素
结构
A环有🔺4-3酮基
C17为a-醇酮基
部分有卤素取代
11位羟基取代（氢化可的松）
性激素
雄激素及蛋白同化素
结构
A环有🔺4-3酮基
C17有羟基
母核有19个C、蛋白同化激素有18个C（无角甲基）
孕激素
结构
A环有🔺4-3酮基
C17为甲酮基/乙炔基/羟基
雌激素
结构
A环为苯环
C17有羟基/乙炔基
按取代基不同
雄甾烷
雌甾烷
孕甾烷
鉴别
化学鉴别法
强酸显色（硫酸）
官能团反应
C17-a-醇酮基（还原性）
四氮唑盐
皮质激素类
多伦试液（氨制硝酸银）
醋酸去氧皮质酮（黑色沉淀）
碱性酒石酸铜（斐林试液）
醋酸地塞米松（砖红色沉淀）
酮基显色反应（雌激素没有）
2，4-二硝基苯肼
硫酸苯肼
醋酸可的松（黄色）
异烟肼
黄体酮（黄色）
C17-甲酮基
亚硝基铁氰化钠、间二硝基酚、芳香醛
黄体酮➕亚硝基铁氰化钠（蓝紫色）
专属反应
酚羟基（雌激素）
重氮苯磺酸
苯甲酸雌二醇（红色）
炔基的沉淀
硝酸银
白色炔银沉淀
卤素
有机氟化物
茜素氟蓝➕硝酸亚铈（蓝紫色）
酯类
醋酸去氧皮质酮
➕氢氧化钾➕硫酸有香气
紫外可见分光光度法
🔺4-3-酮基240nm
雌二醇280nm
IR
甾体激素原料药（标准图谱对照法）
色谱法TLC
有关物质与检查
有关物质的检查
色谱法
TLC（自身稀释对照法）
HPLC
硒的检查（硝酸➕二氨基萘比色法）
醋酸地塞米松
醋酸氟轻松
醋酸曲安奈德
残留溶剂的检查
GC法
游离磷酸盐的检查（磷钼酸比色法）
倍他米松磷酸钠
地塞米松磷酸钠
含量测定
反相HPLC
紫外分光光度法
四氮唑比色法
结构
C17-a-醇酮基
盐
氯化三苯四氮唑TTC
蓝四氮唑BT
RT
硝酸银-氢氧化钠滴定法
乙炔基
异烟肼比色法
🔺3-酮基
体内分析与应用
LC-MS/GC-MS
采用尿样检测
尿样中甾体激素药物或代谢物的浓度相对较高
十六章抗生素类
含量或效价测定
微生物检定法
理化方法
B-内酰胺环抗生素
分类
青霉素类
6-APA
氢化噻唑环
头孢类
7-ACA
氢化噻嗪环
性质
不稳定性
旋光性
青霉素3个手性碳； 头孢类2个
酸性；碱金属盐水溶液遇酸析白色沉淀
紫外吸收
鉴别
色谱
HOLC、TLC、 IR、UV（最大吸收波长）
呈色
异羟肟酸铁
双缩脲➕茚三酮
盐的火焰反应
有关物质检查
高分子聚合物（分子排阻色谱法）
有关物质➕异构体（色谱法）
吸光度
有机溶剂
结晶性
含量测定
HPLC
抗生素微生物检定法（黄苄西林钠）
氨基糖苷类抗生素（碱性环己多元醇）
性质
碱性➕水溶性（硫酸盐）
旋光性
苷的水解与稳定性
链霉素、巴龙霉素、新霉素———绛红糖胺结构
紫外
链霉素230nm
鉴别
茚三酮
Molisch 试验（a萘酚/蒽酮）
N-甲基葡萄糖胺反应（Elson- Morgan反应）（对二氨基苯甲醛）
麦芽酚反应（Maltol）
专属反应
坂口反应（Sakaguchi）
专属反应
硫酸盐反应
色谱法
IR➕UV（庆大霉素）
有关物质检查
TLC➕HPLC
硫酸盐检查
含量测定
微生物检定法
HPLC-蒸发光散射法
四环素类（四并苯环/萘并萘）
性质
两性化合物，结晶性物质，引湿性，盐酸盐
旋光性
紫外吸收➕荧光
稳定性
水溶液易差向异构化
四环素➕金霉素酸性条件易差向异构化
降解性质
酸性： 脱水四环素
碱性： 无活性的异四环素
鉴别
HPLC、TLC
IR（除了土霉素）
UV
显色： 四环素遇硫酸显色
有关物质检查
有关物质（HPLC）
杂质吸光度
残留有机溶剂
含量测定HPLC
十七章
合成抗菌药
喹诺酮类
结构
吡啶酮酸并苯环/吡啶环/嘧啶环
性质
酸碱性；水中溶解度小
左氟氧沙星 有旋光性
紫外
分解反应（哌嗪基的还原性— 光毒化反应）
与金属离子成螯合物
🈲️牛奶等含钙和铁的食物和药
鉴别
丙二酸反应（诺氟沙星软膏）
紫外-可见分光光度法
薄层色谱（氧氟沙星、诺氟沙星、氟罗沙星）
HPLC
IR
有关物质检查
HPLC（配合交换手性流动相法）
含量测定
非水溶液滴定法（碱量法）
紫外-可见分光光度法
HPLC（原料药）
磺胺类药物
结构
对氨基苯磺酰胺基
性质
酸碱性；几乎不溶于水
熔融变色
重氮化偶合反应
磺酰胺基反应（硫酸铜）
磺酰胺基的活泼氢被金属离子取代，得到不同颜色沉淀
苯环上的反应
酸性条件下卤代得沉淀
N1取代基反应
N1的杂环取代基磺胺类药物在酸性溶液中与生物碱试剂（苦味酸试液、碘试液、碘化汞钾试液）得沉淀
鉴别
金属离子取代反应
重氮化-偶合反应
钠盐反应
IR与HPLC
有关物质的检查
酸度
碱性溶液的澄清度与颜色
氯化物
有关物质（TLC）
含量测定
HPLC（磺胺嘧啶片剂、混悬剂； 复方磺胺嘧啶片；复方磺胺甲噁唑制剂）
永停滴定法（磺胺嘧啶原料药；磺胺多辛、磺胺嘧啶钠、磺胺嘧啶锌、磺胺醋酰钠原料药➕制剂）
非水溶液滴定法（磺胺异噁唑原料药➕片剂）
沉淀滴定法（磺胺嘧啶原料药）
永停滴定法（磺胺嘧啶银制剂）
紫外-可见分光光度法（柳氮磺吡啶原料药➕制剂）
浮动主题
符号
<
>
℃
≥
≤
‰
°
±
对酸不稳定：路易斯酸/无水氯化氢乙醇溶液可脱水成脱水维生素A
符号
<
>
℃
≥
≤
‰
°
±