2.无菌检查MDD实验室调查专用鱼骨图

2.无菌检查MDD实验室调查专用鱼骨图， 无菌检查环境中分离菌的微生物鉴别方法是否与样品分离菌的鉴别方法相同？ 注：不同的微生物鉴别技术和/或数据库可能产生不同的结果。

无菌检查过程偏差

• 人员
  • 面谈，描述整个过程
  • 分析员是否具有适当的资质，是否在运行检验方面有足够经验并且受到最新的培训？
  • 所有分析员是否接受过正确使用设备的培训？
  • 是否有新分析员与主分析员一起工作？
  • 分析员是否适当更衣，穿戴适当的检验用个人防护用品（例如，面罩、无菌套袖、无菌手套等）？
• 物料耗材
  • 用于培养基和溶液配制的水的质量和体积是否适宜？
  • 除了正在调查的之外，是否有任何微生物培养基呈现出微生物计数和/或浑浊？
  • 检验是否使用了合适的物料、培养基、稀释剂和耗材？
  • 洁净服是否适当清洁和/或灭菌，并且包装完整？
  • 所有进入检验区域的物料是否适当处理？
  • 装微生物培养基的容器或包材是否完整（即，无裂缝或缺损）
  • 物料、培养基和稀释剂的批号信息是否适当记录？
  • 玻璃器皿和材料是否按照程序在使用前适当清洁和/或灭菌？
  • 玻璃器皿怎样清洁和灭菌是否发生了变更 （例如，新员工、新清洁剂、新清洗器、新灭菌器）？
  • 是否对过去发生偏差的试剂和培养基进行了历史数据的审核？
  • 消毒剂是否按照标示的要求进行配制的？
  • 无菌检查用培养基是否通过检查（pH、外观、容器完整性、促生长和无菌检查？
  • 商用培养基和设备（集菌培养器、预配制培养基、稀释剂）的COA是否可接受？
  • 无菌检查用培养基的有效期和储存条件是否经过确认？
  • 该产品是否有无菌失败事件的历史？
  • 产品和培养基容器以及其他用品在放入层流罩或隔离器之前是否进行适当消毒？
  • 是否有任何可疑的玻璃器皿含有产品污染（例如，玻璃器皿内出现来自先前样品或其他污染源的残留物料）？
  • 产品的容器密封完整性是否经过确认？
  • 用于分离的原始检验平皿是否显示可能已经存在的污染（即，在琼脂表面没有划线条纹的位置生长或在表面下生长）？
  • QC的记录是否显示对无菌检查所用的所有设备和培养基进行了适当的灭菌（例如，管道、冲洗液、培养基、镊子、剪刀）？
  • 在到达无菌检查区域之前，样品是否用于任何其他类型的QC非破坏性检测？
• 机器设施设备
  • 微生物实验室是否经历过任何可能危及实验室检验区域的异常事件 （例如，施工、开门、积水、温度超标、泄露、空调故障）？
  • 检验用的设备、仪器和移液器辅助工具是否适当维护和校验？
  • 检验设备（如移液管、移液管辅助工具）在使用前适当清洁和/或灭菌？
  • 检验是否需要水浴或超声仪？是否进行适当清洁、消毒，并使用适宜质量的水？
  • 是否进行计划性的或非计划性的设备维护？是否对检验或结果有潜在影响？
  • 无菌检查隔离器、手套箱或层流罩是否满足要求的验证标准？
  • 是否有检验设备（如过滤装置、过滤器）与其他近期的无菌问题有关？
  • 隔离器等设备是否进行化学消毒，如VHP？消毒过程是否验证？
  • 手套是否泄露？审核完整性测试和环境监测EM数据，包括指尖取样
  • 无菌检查设备是否已按SOP进行消毒？在MDD出现之前，使用的消毒剂近期是否有变更？
  • 洁净区HEPA验证是否已如期进行？其是否满足空气洁净度、风速、压差、温湿度的要求？
• 检验程序
  • 检验方法是否正确并且适宜于被测样品？
  • 检验方法是否按照现行的标准操作规程执行？
  • 是否对适用的样品类型进行了方法适用性试验？
  • 现行的标准操作规程是否和确认的方法一致？
  • 程序和/或检验方法是否清晰明确，或是否可以解释？
  • 是否使用了所需的培养时间和温度？
  • 培养基和稀释剂的阴性对照是否都正确执行并可接受？
  • 除了正在调查的信息外，是否有任何异常或可疑信息记录在原始检验数据中？
  • 将原始数据转换为最终检验结果的所有计算是否科学合理、适当、正确？
  • 实验室管理人员是否审核了所有原始检验数据，以确定是否有任何可纠正的实验室错误发生（例如，书写错误、数学错误、转录错误）？ 是否重新观察了偏差检验阶段的所有容器和培养皿？
  • 无菌检查方法（例如，直接接种法、封闭膜过滤法）易受污染程度如何？是否有风险缓解措施？
  • 无菌检查在隔离器、手套箱或层流台中进行？
  • 审核自制培养基的记录确认污染趋势
  • 检查外购培养基、耗材的控制
  • 在进入无菌检查环境之前，检验样品的外表面是否用杀孢子剂进行消毒？
  • 化验员报告无菌检查过程中是否有不正常的情况或事件发生？
• 检验环境
  • 检验区域是否采用经确认的消毒剂进行消毒？是否所有消毒剂都在其有效期内？
  • 样品是否在受控环境采用适宜的无菌技术进行检验？
  • 检验区和辅助区是否按照当前实验室程序要求的频次进行了消毒？
  • 是否对检验区域及其毗邻区域（例如，转移室、培养箱等）的EM数据进行回顾？
  • 房间条件是否可接受（例如，温度、压差、湿度）？
  • 在MDD后，进行划线分离操作的区域是否能防止导致影响鉴定结果的外来污染？
  • 实验室工作区是否凌乱？是否有未消毒的表面可能导致培养皿的污染？
  • 在样品分析期间，工作台（或隔离器）中使用的EM、人员培养皿上是否有生长？
  • 是否进行了足够的环境监测以检测到可能存在的低水平的微生物污染？
  • 样品的培养基和培养条件是否足以检测到污染？ 注：只有微生物能被回收，环境监测培养皿的结果才有意义；没有回收不能保证无菌检查工作环境的无菌性。
  • 样品、环境分离菌或对照中微生物鉴别
• 无菌过程中的鉴别
  • 根据检验的关键性（如无菌检验），调查中涉及的微生物鉴别是否通过菌株分型或分子指纹鉴定得到确认？
  • 从样品分离菌是否在常规环境监测中出现（空气、表面和人员）？
  • 鉴定无菌检查期间的EM分离菌如果菌种匹配，可能需要进行菌株分型，例如，部分核糖体RNA测序或核糖体印迹
  • 如果样品分离菌与实验室标准菌是同一属或种，则建议对这两种分离菌进行基因型谱分析。参考USP<1113>
  • 无菌检查环境中分离菌的微生物鉴别方法是否与样品分离菌的鉴别方法相同？ 注：不同的微生物鉴别技术和/或数据库可能产生不同的结果。