第四章酶学检验技术

酶学检测技术是一种通过测定体液中的酶活性来判断病理过程的实验室诊断方法。

第四章酶学检验技术

• 临床常用生化项目
  • 多
    • 病变损伤定位
    • 损伤程度评价
    • 诊断疾病有用
  • 广
    • 检测效率高
    • 灵敏干扰少
    • 检测物质好用
• 什么是酶学检测技术
  • 以酶作为检测目标物的临床酶学检测技术
  • 以酶作为检测试剂的代谢物酶法分析技术
• 为什要测酶/目的
  • 病变部位诊断 淀粉酶AMY、肌酸激酶CK/CKMB
    • 淀粉酶
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    • 肌酸激酶
      • 同工酶检测
        • 同工酶：催化的化学反应相同，但酶蛋白的分子结构、理化性质、免疫学性质不同的一组酶称为同工酶
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        • 免疫抑制法：测CK-MB活性浓度
        • 化学抑制法：硫氰酸胍抑制剂测定LDH1活性
        • 化学发光免疫分析法CLIA：测CK-MB质量浓度
        • 荧光酶免疫法FEIA（案例）
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  • 疾病严重程度判定 转氨酶AST/ALT
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• 怎么测酶
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  • 活性浓度 质量
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  • 惯用单位
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  • 国际单位
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  • 法定单位
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  • 临床使用单位
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  • 分级
    • 零级反应
    • 一级反应
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  • 分期
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    • 延滞期
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    • 线性期
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    • 非线性期
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  • 酶活性测定法
    • 定时法
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    • 连续监测法
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  • 酶法分析（案例）
    • 平衡法
      • 平衡法（终点法）：在待测物酶促反应中，随着 时间的延长，待测物浓度逐渐减小而产物逐渐增 多，一定时间后反应趋于平衡，指示信号逐渐达到稳定。测定平衡后底物或者产物变化的总量，计算出待测物浓度。GPO法测TG：37°C，5分钟检测
    • 速率法
      • 速率法（动力学法）：根据酶促反应动力学，准确测定反应的初速度，采用标 准浓度对照法求得待测物的浓度的方法。 脲酶-谷氦酸脱氢酶法测尿素
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• 怎么用酶测代谢物
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  • 乙酰丙酮显色法
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  • 甘油三酯方法的升级
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  • 酶偶联法
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    • 辅助反应
    • 指示反应
    • 过氧化物酶指示系统
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    • 脱氢酶指示系统
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