基因工程制药

这是一篇关于基因工程制药的思维导图，关于基因工程制药的基本知识的总结，内容包括限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶以及载体的定义和作用。

基因工程制药

• 基本知识
  • 工具酶
    • 限制性内切酶
      • 基因的剪刀
        • 定义
          • 能特意地结合于一段被称之为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上，并切割双链DNA
        • 分布
          • 主要在微生物之中
        • 特点
          • 特异性
            • 即识别特定核苷酸序列并切割特定切点
            • 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA分子切割
        • 结果
          • 粘性末端
            • 限制酶错位切断DNA双链而形成的具有彼此互补碱基的单链延伸末端
          • 平整末端
            • 限制酶在同一位点平齐切断DNA两条链而形成的双链末端
    • DNA聚合酶
      • 定义
        • DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，这类酶作用时大多数需要DNA模板并且优先作用于DNA模板，也可作用于RNA模板，但效率较低
      • 实例
        • 大肠杆菌DNA聚合酶I
          • 5’-3‘的聚合酶活性
          • 5’-3‘的核酸外切酶活性
          • 3’-5‘的核酸外切酶活性
    • DNA连接酶
      • 基因的针线
        • DNA连接酶能够催化DNA片段中两个相邻的3-OH和5‘-磷酸基团形成磷酸二酯键，从而使DNA片段或单链断裂形成的缺口连接起来
        • 三种情况
          • 缺口DNA
          • 平末端DNA
          • 粘性末端DNA
  • 载体
    • 定义
      • 把一个目的DNA片段通过重组DNA技术载送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具。
    • 本质
      • DNA，能在宿主细胞中进行自我复制和表达
    • 作用
      • 将外源基因送入受体细胞
    • 条件
      • 能够在宿主细胞中复制并稳定存在
      • 具有多个限制酶切点
      • 具有某些标记基因
    • 种类
      • 质粒
        • 定义
          • 是一些存在于微生物细胞内染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子
        • 地位
          • 质粒时基因工程中一类主要的克隆载体
      • 噬菌体
        • 定义
          • 是“捕食”细菌的生物，是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称
        • 一旦离开了宿主细胞，噬菌体既不能生长，也不能复制
        • 侵染细胞的三个阶段
          • 感染阶段
          • 增值阶段
          • 成熟阶段
        • 组成
          • 蛋白质
          • DNA
        • T2噬菌体在37℃下大约只需四十分钟就可以产生100~300个子代噬菌体
      • 动植物病毒
  • 受体细胞
    • 大肠杆菌
    • 酵母
    • 棉花
    • 昆虫
    • 哺乳动物
• 同尾酶
  • 来源各异的限制酶识别的靶子序列各不相同，但都产生相同的粘性末端