概念:蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳。根据支撑物的不同,可分为薄膜电泳、凝胶电泳等。
薄膜电泳:纸电泳和醋酸纤维素薄膜电泳等,醋酸纤维素溶于有机溶剂,干燥后形成细密微孔薄膜,支撑电泳。
凝胶电泳:琼脂电泳、琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺电泳(PAGE),构成网孔型凝胶,支撑电泳。
SDS-PAGE:常用于蛋白质分子量的测定。将蛋白质溶液与SDS混合,SDS为界面活性剂会破坏蛋白质的二级结构等使其变性,并包覆变性蛋白质,使其带有一致的负电荷和一致的形状(长条形)。进行电泳时,分子量较小的较容易落下,相反的分子量较大的则卡在起点附近。
等电聚焦电泳:通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。利用两性电解质在凝胶内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处形成一个很窄的区带,从而分离。
双向凝胶电泳:是蛋白质组学研究的重要技术。第1向用等电聚焦分离,第2向用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。