导图社区 分子发光分析法思维导图
这是一篇关于分子发光分析法的思维导图。适合人群:1)课堂基础知识掌握不佳、想要夯实基础的同学2)或基础较好、想要领先预习的同学课程收获。
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第14章DNA的生物合成读书笔记
分子发光分析法
分子荧光分析法
定义
物质的分子吸收光能后发射出波长在紫外、可见(红外)区的荧光光谱,根据其光谱的特征及强度对物质进行定性和定量分析,这种分析方法就是分子荧光分析法
基本原理
发生过程
分子的激发
荧光的发生
影响荧光强度的环境因素
温度
溶剂
溶液ph值
溶液荧光的猝灭
碰撞猝灭
静态猝灭
转入三重态的猝灭
氧的猝灭
自吸猝灭
荧光强度与溶液浓度的关系
当荧光效率(Ф)、入射光强度(I)、物质的摩尔吸光系数(ε)、液层厚度(l)固定不变时,荧光强度(I)与溶液浓度(C)成正比I=KC
定量分析方法
校正曲线法
将贮备标准液稀释为所需要的标准系列,用零浓度调仪器零点后,依次由低到高浓度测量标准液的吸光度(或峰高、面积),同时测定样品和样品空白的吸光度(或峰高、面积),在坐标纸上以标准液浓度为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
比较法
取已知质量纯荧光物质配成在线性范围内的标准溶液,测出荧光强度I(fs)。然后在同样条件下测定试样溶液的荧光强度I(Fs),分别扣除空白I0根据标准溶液和试样溶液的荧光强度,求出试样中荧光物质的含量
多组分混合物的荧光分析
荧光分析仪器
荧光分光光度计
组成
激发光源
单色器
狭缝
样品池
检测器
分子荧光分析法的应用
无机物分析法的应用
无机化合物与有机试剂形成荧光配合物进行荧光分析发测定
有机物分析法的应用
脂肪族有机分子与某些有机试剂反应后生成能发射荧光的衍生物进行测定
分子磷光分析法
化学发光分析法
分类
气相化学发光
化学发光反应在气相中进行称为气相化学发光
液相化学发光
化学发光反应在液相中进行称为液相化学发光
生物发光
生物发光是一种特殊形式化学发光,其量子效率和特异性比化学发光强,它发生在生物体系中。生物发光常涉及酶促反应和发光反应,常用生物发光有萤火虫发光和细菌发光。