分枝杆菌属笔记梳理

分枝杆菌属一般不易着色，经加温或延长染色时间着色后，可抵抗盐酸和酒精的脱色作用，因而又称抗酸性杆菌。下图介绍了结核分枝杆菌、折叠麻风分枝杆菌、非结核分枝杆菌，需要的收藏下图学习吧！

分枝杆菌属

• 是一类细长略弯曲的杆菌，因有分支生长趋势而得名； 显著特征：基因组中G+C的百分比高，介于62%-70%； 细胞壁中含有大量脂质，也称抗酸杆菌； 脂质是主要致病物质； 生长缓慢，代时为2-20小时； 所致感染多为慢性感染过程。
• 结核分枝杆菌
  • 结核分枝杆菌——人类结核病的主要病原菌； 牛分枝杆菌——牛、人类的结核病； 非洲分枝杆菌——非洲国家部分结核病； 田鼠分枝杆菌——野鼠，豚鼠等的结核病变。
  • 生物学性状
    • 形态与染色
      • 细长略带弯曲，单个或分枝状排列，无鞭毛、无芽孢、具有微荚膜； G+，但不易着色； 齐-尼抗酸染色； 细胞壁：具有革兰阴性菌类似的外膜层；含大量脂质，与抗酸性、抗药性及毒力密切相关。 抗酸染色： 石炭酸复红，加热五分钟，水洗； 3%盐酸酒精，水洗； 碱性美兰，一分钟，水洗； 结果：抗酸染色阳性——红色； 抗酸染色阴性——蓝色。
    • 培养特性
      • 懒：生长缓慢，12-24小时繁殖一代，3-4周形成可见菌落； 馋：专性需氧菌，营养要求高，在含有蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等的改良罗氏培养基上才能生长； 丑：菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似菜花样。
    • 生化反应
      • 不活泼，是鉴别分枝杆菌菌种的关键。
    • 抵抗力
      • 较强。与菌体所含脂质有关； 四抗：抗干燥；抗酸碱；抗碱性染料；抗青霉素等； 四怕：怕湿热、怕酒精、怕紫外线；怕抗结核药物。
    • 变异性
      • 形态结构：L型； 菌落：粗糙——光滑（S-R变异）； 毒力：在人工培养基连续传代毒力减弱； 耐药性：单耐药：对1种抗结核药物耐药； 多耐药：对1种以上的抗结核药物耐药，不包括同时对异烟肼和利福平耐药； 耐多药：至少对异烟肼和利福平耐药； 广泛耐药：耐多药且对任意1种喹偌酮类和二线抗结核药物至少1种耐药。
  • 致病性
    • 致病物质
      • “三无”——无侵袭性酶，不产生内、外毒素； 菌体成分： 脂质-主要为毒力因子，多为糖脂形式，种类多； 蛋白质； 荚膜。
      • 脂质
        • 海藻糖6，6’-二分枝菌酸（TDM）
          • 索状分子，主要致病物质，与肉芽肿形成有关；属于分枝菌酸。
        • 甘露糖脂
          • 脂阿拉伯甘露糖、脂甘露聚糖、磷脂酰肌醇甘露糖苷等，与细菌胞内存活有关。
        • 硫酸脑甘脂
          • 与细菌胞内存活有关。
        • 磷脂
          • 与结核结节和干酪样坏死有关。
        • 分枝酰-阿拉伯半乳糖苷-肽聚糖复合物（mAGP）
          • 佐剂作用，与超敏反应产生有关；蜡质D。
      • 蛋白质
        • ESX-1型分泌系统
          • 分泌ESAT-6和CFP10，与免疫逃逸、超敏反应有关。
        • DosR-DosS基因
          • 细菌在肉芽肿内生存适应有关。
        • 复苏促进因子（RPF）A-E
          • 与潜伏感染后细菌再激活有关。
        • 结核菌素
          • 是细菌分泌的蛋白质且耐热的部分，与具有佐剂活性的糖脂结合引起迟发型超敏反应。
      • 荚膜
        • 主要成分是多糖，部分脂质和蛋白质
        • 与细菌黏附、入侵细胞和抵抗免疫因子杀伤等有关
    • 所致疾病
      • 人普遍易感，多数导致潜伏结核病感染（LTBI）
      • 感染方式：经呼吸道消化道和破损的皮肤粘膜感染
      • 侵犯多种组织器官，以肺结核多见
      • 可分为原发感染和原发后感染
        • 原发感染
          • 多见于儿童，易扩散； 原发综合征：X线胸片中，原发病灶、淋巴管炎和淋巴结肿大显示哑铃状阴影； 形成结核结节：结核病的特征性病理变化； 原发感染的结局：原发灶大多可纤维化和钙化而自愈，少数原发感染者体内结核分枝杆菌可经淋巴、血流扩散，极少数可导致全身粟粒性结核或结核性脑膜炎； 原发灶内可长期潜伏少量结核分枝杆菌（持留菌、休眠菌）。
        • 原发后感染
          • 也成继发感染，多见于成年人； 大多数为内源性感染，原发感染的残留菌复燃或再激活； 少数由外源性感染所致； 原发后感染特点：病灶局限，一般不累计邻近的淋巴结；病变发生迅速且剧烈（迟发型超敏反应）；主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死； 原发后感染的结局：浸润型肺结核和慢性纤维空洞型肺结核等；少数严重者细菌可经血液、淋巴液扩散到肺外组织器官；痰菌被咽入消化道可引起肠结核、结核性腹膜炎等；极少数免疫力极度低下者有可能造成全身播散性结核。
  • 免疫性
    • 抗体仅对细胞外的细菌有一定作用； 抗结核免疫主要是细胞免疫（在感染后3-6周建立）； 超敏反应：迟发型超敏反应→单核细胞浸润→干酪样坏死、空洞； 细胞免疫与迟发型超敏反应同时存在：机体获得对结核分枝杆菌免疫力的同时，细菌的部分蛋白质与糖脂等也可共同刺激T淋巴细胞，形成超敏状态。体内被所致敏的T淋巴细胞再次遇到结核分枝杆菌时即释放出淋巴因子，引起强烈迟发型超敏反应。
  • 微生物学检查法
    • 直接涂片检查
      • 咳痰直接涂片，抗酸染色法染色
      • 采用浓缩集菌提高阳性检出率；可用强酸强碱溶液处理污染标本
    • 分离培养
      • 接种于改良罗氏固体培养基，37℃培养4-8周，菜花状菌落
      • 液体快速玻片培养法可缩短培养时间
      • Bacter TB-460快速培养系统
    • 动物实验
      • 常用豚鼠或地鼠；分离培养接种洪武进行毒力测定
    • 药物敏感性实验
      • 患者分离株进行药敏试验，指导化疗
    • 基因检测
      • PCR、Xpert MTB/RIF试验、16SrRNA高变异区序列测定、限制性长度多态性分析
    • 免疫学检查
      • 结核菌素试验
        • 结核菌素试验： 原理：皮肤迟发型超敏实验； 结核菌素试剂：纯蛋白衍生物（PPD）； 试验方法：分别取两种PPD5单位注入两前臂皮内，48-72小时后观察； 结果分析： ≥15mm为强阳性——可能有活动性结核病； 红肿硬结超过5mm者为阳性：感染、卡介苗接种成功； 红肿硬结小于5mm者为阴性反应：未感染、感染初期、老年人、患严重结核病或其他传染病的患者、获得性免疫功能低； 应用：婴幼儿原发感染的诊断；BCG接种效果测定；结核病流行病学调查；肿瘤患者细胞免疫功能测定。
      • IFN-γ释放试验
        • 原理：感染后，体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞，当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增值，产生多种细胞因子，其中IFN-γ是关键的细胞因子； 方法：以结核分枝杆菌与BCG差异蛋白ESAT-6和CFP10多肽刺激致敏的T细胞分泌IFN-γ，通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）进行检测； 优点：敏感、特异，1-2天获得结果，用于鉴别潜伏结核感染、预测结核发病风险； 缺点：技术操作要求高，试剂盒价格昂贵。
  • 防止原则
    • 预防接种——卡介苗
      • 我国规定新生儿出生后即接种卡介苗，7岁时复种； 成人复种没有保护效果。 卡介苗（BCG Vaccine）是由减毒牛型结核杆菌悬浮液制成的活菌苗，具有增强巨噬细胞活性，加强巨噬细胞杀灭肿瘤细胞的能力，活化T淋巴细胞，增强机体细胞免疫的功能。
    • 治疗
      • 早期、联合、规律、适量、全程，常用药物异烟肼、链霉素、利福平等。
• 麻风分枝杆菌
  • 俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病； 病菌侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿病变；流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲。
  • 生物学性状
    • 形态、染色与结核分枝杆菌相似； 典型胞内寄生菌； 泡沫细胞或麻风细胞； 体外人工培养至今仍未成功； 动物模型：犰狳； 抵抗力：较强，耐干燥、耐低温。
  • 致病性和免疫性
    • 传播方式：主要通过呼吸道、破损的皮肤黏膜和密切接触等方式传播
    • 发病慢，病程长，潜伏期长，一般是6个月至5年
    • 麻风的免疫主要是靠细胞免疫
    • 细菌主要侵犯神经、皮肤
    • 所致疾病
      • 瘤型麻风：多组织、脏器、严重、传染强
      • 结核样型麻风：自限性的，皮肤
        • 麻风分类： 瘤型麻风：为疾病的进行性和严重临床类型，传染性强；主要侵犯皮肤、黏膜，严重时累及神经、眼及内脏；形成麻风结节，“狮面容”是麻风的典型病症；该型麻风患者的T细胞免疫应答有所缺陷，麻风菌素试验反应阴性； 结核样型麻风：为自限性疾病，较稳定，传染性小；主要在皮肤，也可累及神经；患者的细胞免疫正常，麻风菌素试验反应阳性； 界线类：兼有瘤型和结核样型麻风的特点； 未定类：属麻风病的前期病变，大多数病例可转变为结核样型。
  • 微生物学检查法
    • 标本：患者鼻黏膜或皮损处取材
    • 检查：抗酸性染色、显微镜检查
    • 抗酸染色结果
      • 瘤型麻风患者一般阳性
      • 结核样型麻风患者一般阴性
  • 防止原则
    • 预防
      • 无有效疫苗
      • BCG有一定效果
      • 早发现、早隔离、早治疗
    • 治疗
      • 砜类、如氨苯砜等、利福平
      • 多种药物联合治疗
• 非结核分枝杆菌
  • 是结核分枝杆菌符合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌群的统称，又称非典型分枝杆菌； 多存在于自然界、水及土壤环境种，亦称环境分支杆菌。
  • 生物学性状
    • 形态和染色酷似结核分枝杆菌
    • 生化反应各不相同
    • 非结核分枝杆菌有无致病性可用热触试验加以鉴别
    • 根据产生色素情况、生长速度和生化反应等特点，分为4组
  • 致病性
    • 毒力较弱，大多不致病
    • 有些是机会致病菌，可引起人类结核样病变、小儿淋巴结炎和皮肤病等
  • 防止原则
    • 目前我国结合病临床标本中，非结核分枝杆菌菌株分离阳性率为5%-10%
    • 许多非结核分枝杆菌对常用的异烟肼、链霉素等耐药
    • 利福平、乙胺丁醇和异烟肼联合用药以提高疗效