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ELISA法操作,ELISA,即酶联免疫吸附试验,是一种常用的生物化学分析方法,用于检测抗体或抗原的存在与浓度。
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第14章DNA的生物合成读书笔记
ELISA
免疫包被
在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗体
免疫识别
加入待测样,并在37°C环境下孵育一段时间,通常是1-2小时。此时酶标板上的抗体与待测抗原进行特异性识别结合
将未结合的抗原洗掉,加入该抗原所对应的识别抗体并在37°C下继续培养1-2小时,接着将未连接上抗原的抗体洗掉。
信号输出
加入带有辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)标记的酶标二抗,用于和标准抗体结合。在培养30分钟后洗掉未连接的二抗,并加入显色剂显色。根据显色的结果判断抗原的浓度。一般认为,抗原浓度与显色后的发光强度呈正相关
数据处理
利用信号强度,标准样品浓度梯度等信息计算得出待测样中目标抗原的浓度