黄铜类化合物的鉴定

介绍了利用薄层色谱（TLC）法进行黄酮类化合物分析的方法及解读TLC色谱图的技术细节。内容涵盖了黄酮类化合物在不同条件下的色谱行为、紫外光谱特性及解释这些光谱以确定化合物的结构特征。

黄铜类化合物的鉴定

• 色谱法
  • silica gel TLC
  • Polyamide TLC
  • 2D paper TLC 双向纸色谱
    • 一维
      • 分配色谱
      • 流动相：有机相（n-BuOH-HAc-H2O）
      • 固定相：水
      • Rf：甘元＞单糖苷＞双糖苷（原因：极性大的与固定相结合牢固，Rf值小）
    • 二维
      • 流动色谱
      • 流动相：水
      • 固定相：纸纤维
      • Rf：双糖苷＞单糖苷＞甘元（原因：实际的固定相是纸纤维，极性大的与流动性结合牢固，Rf值小）
  • 上节课内容
• 紫外光谱
  • band I:苯甲酰基220-280nm （-OH连接在B环上，波长红移）
  • band II：桂皮酰基300-400nm （-OH连接在A环上，波长红移）
  • 具体化合物
    • 黄酮、黄酮醇
      • 峰带Ⅰ
        • 黄酮304-350nm
        • 黄酮醇（3-OH取代）328-357nm
        • 黄酮醇（3-OH游离）352-385nm
      • 峰带II
        • 240-285nm
    • 查尔酮、橙酮
      • 峰带I（强峰）
        • 查尔酮340-390nm
        • 橙酮370-430nm
      • 峰带II（次强峰）
        • 查尔酮220-270nm
    • 异黄酮、二氢黄铜
      • 峰带I（弱峰）
        • 肩峰
      • 峰带II（强峰）
        • 异黄酮245-270nm
        • 二氢黄酮270-295nm
    • 利用诊断试剂， 判断-OH位置（考研）
      • NaOMe确定4’-OH
        • 带I位移40-60nm，强度不降。有4’羟基
      • NaOAc确定7’-OH
        • 带II红移5-20nm，有7’-OH
        • 带I红移40-60nm，有4’-OH
      • NaOAc/H3BO3确定邻二OH
        • 带I红移12-13nm，B环具有邻二酚羟基
        • 带II红移5-10nm，A环具有邻二酚羟基（除5,6-二OH）
      • AlCl3及AlCl3/HCl确定3-OH，5-OH，邻二-OH
        • AlCl3/HCl与AlCl3中光谱比较
          • 相同时：无邻二酚羟基
          • 不同时：带I紫移30-40nm，B环有邻二酚羟基
        • AlCl3/HCl与MeOH中光谱比较
          • 相同时：无3-OH，无5-OH
          • 不同时：带I红移，有3-OH及（或）5-OH
  • 上节课内容
• 核磁共振氢谱
  • A环上的H
    • 5，7-di-OH
      • δH-6，8 5.7-6.9，d，J≈2Hz（6，8间位偶合，6位H是两个羟基的邻位，双重δ减小作用）
      • δH-8＞δH-6（8位也收到双重减小作用，但不如6位强）
    • 7-OH （AMX偶合系统）
      • δH-5：7.7-8.2，d，J＝8Hz（大d峰）
        • 受C环上C＝O的屏蔽作用，δ↑
      • δH-6：6.4-7.1，dd，J＝8，2Hz
      • δH-8：6.3-7.0，d，J＝2Hz（小d峰）
        • 两个含O取代基邻位作用，δ↓
  • B环上的H
    • 4'-OR （AA'XX'偶合系统）
      • 2',6'-H: δ7.1-8.1，d，J＝8Hz
      • 3',5'-H: δ6.5-7.1，d，J＝8Hz
      • 峰形：两组dd峰 两组H化学等同，磁不等同
    • 3'，4'-di-OR
      • 黄酮（醇）
        • H-5': δ 6.7-7.1，d，J＝8.5Hz
        • H-6': δ 7.9，dd，J＝8.5，2.5Hz
        • H-2': δ 7.2，d，J＝8.5Hz
        • AMX偶合系统
      • 异黄酮，二氢黄酮（醇）
        • H-2',5',6': δ 6.7-7.1（磁各向异性↓） 信号重叠在一起不易分辨
    • 3'，4'，5'-tri-OR
      • δH-2',6' :6.5-7.5
        • R＝R'' :s(2H). 对称，2',6'磁等同，不存在偶合
        • R≠R'' : d(2H). 2',6'非磁等同，间位偶合
  • C环上的H （鉴别黄酮类型的依据）
    • 黄酮
      • δH-3～6.3s 原因：2-3位C＝C与C＝O偶合，3位电子云密度大，δ小 （与A环质子重叠）
    • 异黄酮 （自然界不常见）
      • δH-2 7.6-7.8
    • 二氢黄酮 （C2-S构型）
      • δH-2 5.2， dd， J＝5，11Hz
      • δHa-3 2.8-3.0， dd， J＝11，17Hz（与3H邻偶，与2H偕偶）
      • δHe-2 2.8， dd， J＝5，17Hz（与2H邻偶，与3H偕偶）
      • 竖直3H处于C2-C3单键的负屏蔽区 δHa-3＞He-3
    • 二氢黄酮醇 （C2-S，C3-R）
      • δH-2 4.9，d，J＝11Hz
      • δH-3 4.3，d，J＝11Hz
    • 查尔酮
      • δH-a 6.7-7.4，d，J＝17Hz
      • δH-β 7.3-7.7，d，J＝17Hz
    • 橙酮
      • 苄基质子δ 6.5-6.7 s
  • 黄酮苷糖质子
    • 糖的端基质子信号
      • 黄酮醇-3-O-葡萄糖苷 5.70-6.00
      • 黄酮醇-3-O-鼠李糖苷 5.00-5.10
      • 黄酮醇-7-O-葡萄糖苷
      • 黄酮醇-4'-O-葡萄糖苷
      • 黄酮醇-5-O-葡萄糖苷
      • 黄酮类-6及8-C-糖苷
      • 4.80-5.20
    • 糖上其他质子信号 δ3-4
      • 鼠李糖C5-CH3 δ：0.8-1.2，d，J＝6.5Hz
  • 其他取代基：CH3CO-
    • 脂肪族乙酰氧基δ1.65-2.10（确定糖数）
    • 芳香族乙酰氧基δ2.30-2.50（确定酚OH数）
• 核磁共振碳谱
  • 核磁共振碳谱 （母核判断）非重点
    • 判断骨架类型
      • 根据C＝O化学位移确定
        • δ174-184：黄酮（醇），异黄酮，橙酮
        • δ188-197：查尔酮，二氢黄酮（醇）
    • 确定取代模式
      • 根据芳香C化学位移确定
        • A环引入取代基，影响A环化学
        • B环引入取代基，影响B环化学
        • C5-OH影响A环和C2，C3，C4
      • 取代基位移效果
        • -OH
          • Zi＋26.6 ， Zo－12.8 ，Zm＋1.6 ，Zp-7.1
        • -OCH3
          • Zi＋31.4， Zo－14.4 ，Zm＋1.0 ，Zp-7.8
        • 邻位酚羟基δ＜150-160
    • 确定糖苷连接位置
      • 根据苷化位移确定 对于黄酮来说，连糖形成酚苷
        • glycoside a-C＋4.0～6.0
        • glycon a-C -1～2，β-C＋1～2
        • 确定不了位置
          • 以2D-NMR确定苷键位置
    • 确定糖的连接顺序
      • 根据苷化位移规律确定
        • 13C化学位移与糖甲基苷数据进行比较。
• 质谱
  • 下节课内容