导图社区 动物细胞工程
本思维导图是对动物细胞工程相关知识的整理，主要包括：细胞培养、细胞融合、胚胎工程、核移植技术、转基因动物、动物染色体工程。
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第14章DNA的生物合成读书笔记
动物细胞工程
细胞培养
定义
从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖
原理
细胞增殖（有丝分裂）
目的
使动物细胞继续生长增殖，并维持原有的结构和功能
过程
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
胰蛋白酶
单个细胞
加培养液
细胞悬浮液
接触抑制
10代细胞
50代细胞
无限传代
图示
相关名词
原代培养：初次培养，是从供体获取组织后的首次培养
传代培养：细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶的过程称之为传代或者再培养
细胞系：原代培养的细胞一经传代就称之为细胞系
细胞株：细胞系经过进一步的克隆化，便得到由单一细胞组成的细胞群体称之为细胞株
结果
获得新细胞，不产生新个体
条件
无菌无毒的环境：无菌处理，加一定量的抗生素，定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成伤害
营养：葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、维生素、血清
适宜的温度、PH和渗透压
气体环境
95％空气（主要是氧气，细胞代谢所必须）
5％二氧化碳（主要作用是维持培养液的PH）
特性
细胞贴壁：指依赖性贴壁细胞在培养表面上贴附和铺展的过程。
贴壁型细胞：上皮细胞型、成纤维细胞型、游走细胞型、多形型细胞
接触抑制：指细胞在生长过程中达到相互接触时停止分裂的现象。接触抑制可作为区别正常细胞与癌细胞标志之一
密度抑制
应用
培养干细胞：是一类具有自我更新和分化潜能的细胞
特征
本身不是终末分化细胞
无限增殖分裂
可连续分裂，可长时间处于静止状态
分裂的子细胞保持为干细胞或分化为特定细胞
分类
胚胎干细胞：能分化成任何类型细胞
成体干细胞：能分化成单一类型的细胞
细胞融合
又称体细胞杂交或细胞杂交，是指在离体条件下用人工方法将不同种生物或同种生物不同类型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的技术
细胞膜的流动性
方法
病毒融合剂：灭活的仙台病毒诱导法
化学融合剂：聚乙二醇（PEG）诱导融合法
物理融合剂：电融合技术
意义
突破有性杂交法的局限，使远缘杂交成为可能
细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的研究
制备单克隆抗体
定义：机体受抗原刺激后由浆细胞产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白
HAT原理
H:次黄嘌呤核苷酸
A:氨基喋呤（抑制二氢叶酸还原酶活性，从而阻断正常细胞中DNA合成主要途径中二氢叶酸到四氢叶酸合成）
T:嘧啶核苷酸
HGPRT:鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 TK:胸腺嘧啶核苷酸激酶
叶酸及其衍生物是必不可少的媒介，参与嘌呤环和嘧啶甲基的合成
首要步骤：给小鼠注射特定抗原
所需细胞：B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
最后的筛选：产生专一抗体的杂交瘤细胞
特点：特异性强、灵敏度高、化学性质单一、可大量制备
作为诊断试剂灵敏度高，化学性质单一，可大量制备
用于治疗疾病和运载药物（不损伤正常细胞，减少药剂量疗效高，副作用小）
胚胎工程
核移植技术
将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并形成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育成动物个体
类型
胚胎细胞核移植技术：核供体细胞是来自多细胞阶段的胚胎（分化程度低，恢复其全能性相对容易）
干细胞核移植技术
体细胞核移植技术
定义：核供体细胞为动物体的体细胞，分化程度高，恢复其全能性十分困难
供体细胞（供体）
体细胞
卵巢卵母细胞 （MII中期；供质）
去核
无核卵母细胞
概要
子主题
转基因动物
动物染色体工程
