第八章 芳香族硝基和氨基化合物及其代谢

生物材料检验，芳香族硝基和氨基化合物及其代谢，详细的总结了苯胺和联苯胺，硝基苯，三硝基甲苯的理化性质，代谢和生物监测指标，样品采集及保存的知识点。

芳香族硝基和氨基化合物及其代谢

• 苯胺和联苯胺
  • 生物监测指标主要是血中的高铁血红蛋白含量及其在尿或血中的各种代谢产物
  • 理化性质
    • 无色油状液体，易挥发，有特殊气味，久置颜色可变为棕色
  • 代谢和生物监测指标
    • 进入途径：
      • 呼吸道，皮肤，消化道
        • 吸收率随温度和相对湿度的增加而增加
        • 苯胺
          • 经皮肤吸收是引起中毒的主要原因
          • 危害：
            • 急性中毒，慢性中毒，皮肤损伤
        • 联苯胺
          • 经呼吸道吸入是联苯胺及其同类物的主要接触途径
    • 代谢产物：
      • 对氨基苯酚（PAP）
        • 尿中对氨基苯酚部分以结合态存在
        • 排泄率比苯胺高
          • 尿中排出苯胺约1%
            • 尿中苯胺不宜作为生物监测指标
    • 苯胺的生物监测指标
      • 尿中的对氨基酚量
        • 常与血中高铁血红蛋白含量呈平行关系
    • 联苯胺的生物监测指标
      • 尿中排出原形物及其代谢产物
  • 样品采集及保存
    • 采集
      • 尿液（90%）
        • 100ml玻璃瓶收集
        • 苯胺（代谢速度快）：班末或班后2小时内
        • 对氨基苯酚：班后尿
      • 呼出气（极少）
        • 一般不采呼出气
  • 尿中对氨基苯酚的测定
    • 盐酸萘乙二胺分光光度法
      • 原理：
        • 尿样加盐酸水解后，于中性溶液中，用乙酸乙酯萃取对氨基苯酚，再在酸性条件下反萃取至盐酸溶液，经重氮化后，用盐酸萘乙二胺显色，于波长582nm下比色定量
      • 注意事项：
        • 显色强度与酸度有关，故控制酸度在0.05mol/L
        • 对氨基苯酚在常温下与盐酸萘乙二胺显色较慢且不稳定，故60℃水浴保温1小时后即刻比色
          • 30min内测定
    • HPLC
      • 原理：
        • 尿样用盐酸加热水解后，在酸性条件下用乙酸乙酯提取，除去部分干扰物，然后在中性条件下用乙酸乙酯提取尿样中对氨基苯酚，C18柱分离，检测，保留时间定性，峰高或峰面积定量
  • 超高效液相色谱-质谱法测定尿中苯胺和联苯胺（极少，＜1%）
• 硝基苯
  • 难降解，致癌物
  • 理化性质
    • 见光颜色变深
    • 脂溶性化合物
  • 代谢和生物监测指标
    • 进入途径：
      • 呼吸道，消化道，皮肤（主）
    • 生物监测指标
      • 对硝基苯酚
        • 特异性
      • 对氨基苯酚
        • 非特异性
    • 代谢
      • 尿
        • 对硝基苯酚
        • 对氨基苯酚
      • 呼吸道（少）
        • 原形（硝基苯）
        • 苯胺
  • 样品采集及保存
    • 具塞聚乙烯塑料瓶
    • 班后尿
  • 尿中对硝基酚的测定
    • 邻甲酚分光光度法
      • 原理：
        • 尿样水解后，将对硝基苯酚转变成游离态，用有机溶剂萃取，再用氨溶液反萃取，用三氯化钛还原，生成的对氨基苯酚与邻甲酚作用，生成靛酚蓝，再比色定量
    • HPLC
      • 原理：
        • 尿样水解后，加NaCl漩涡混合溶解，乙酸乙酯萃取对硝基苯酚，梯度洗脱，C18柱分离，测定
      • 加入NaCl的目的：
        • 防止和消除乳化现象，提高萃取效率
• 三硝基甲苯
  • 理化性质
    • 爆炸品
    • 溶于水，微溶于乙醇，易溶于有机溶剂
  • 代谢和生物监测指标
    • 进入途径：
      • 皮肤（主），呼吸道，消化道
    • 代谢途径：
      • 尿液（90%）
        • 4-氨基-2，6-二硝基甲苯（4A）
        • 4-氨基-2，6-二硝基甲苯-血红蛋白加合物（4A-Hb）
      • 体内组织囤积（10%）
    • 生物监测指标：
      • 4-氨基-2，6-二硝基甲苯（4A）
      • 4-氨基-2，6-二硝基甲苯-血红蛋白加合物（4A-Hb）
        • 作为职业接触三硝基甲苯人群的生物标志物
        • 反映工人空气接触，经皮肤污染水平和接触时间
        • 反映总接触水平和累积接触的生物监测指标
      • 原形TNT
  • 样品采集及保存
    • 聚乙烯塑料瓶收集100ml班后尿
  • 尿液中TNT代谢产物的测定
    • 分光光度法——只可测总量
    • GC——不可测4-HA
      • 因为4-HA遇热分解
      • 甲苯萃取
      • 碳酸氢钠调节pH，浓盐酸防腐
      • 电子捕获器
    • HPLC-可对异构体进行分离测定
  • 血中TNT代谢产物的测定
    • HPLC——测TNT和4-HA
    • 竞争性抑制酶联免疫法——测4A-Hb