导图社区 生物化学:酶
生化第三章酶和维生素知识总结,包括酶的分子组成与功能、酶的工作原理和酶促反应动力学三部分内容。
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酶
概述
定义:来源于生物活细胞的具有催化功能的大分子蛋白质。
分类
氧化还原酶类
转移酶类
水解酶类
裂解酶类
异构酶类
合成酶类
转位酶类
酶的分子结构与功能
分子组成
单纯酶:不含其他非蛋白成分
结合酶
蛋白质:酶蛋白(决定反应的特异性)
非蛋白质:辅助因子(决定反应类型与性质)
金属离子
金属离子为最常见的辅助因子
按照金属离子与酶蛋白结合的紧密程度分类
金属酶:结合紧密
金属激活酶:结合疏松
金属离子在酶促反应的作用
作为催化基团参与催化反应,传递电子
在酶与底物间起桥梁作用,维持酶分子的构象
中和阴离子,降低反应的静电斥力
根据辅助因子与酶蛋白结合的牢固程度分类
辅基:与酶蛋白共价结合,不能通过透析或超滤等方法将其去除
辅酶:与酶蛋白以非共价键疏松结合
活性中心
定义:酶分子中直接与底物结合,并催化底物发生化学反应的部位
必需基团:与酶活性有关的化学基团
结合基团:直接与底物和辅酶结合,形成酶-底物复合物,决定酶的专一性
催化基团:催化底物敏感键发生化学反应,并将其转变为产物,决定酶的催化能力
活性中心外的必需基团:不参与活性中心的组成,但却为维持酶活性中心应有的空间构象所必须
酶促反应的特点与机制
特点
酶促反应具有极高的催化效率:不需要较高的反应温度,更有效的降低反应活化能,使底物只需要较少的能量便可进入活化状态
酶促反应具有高度的特异性:一种酶仅作用于一种或一类化合物,或一定的化学键,催化一定的化学反应并产生一定的产物
绝对特异性:只能作用于一种特定结构的作用物,进行一种专一的反应,生成一种特定结构的产物(一对一)
相对特异性:作用于结构类同的一类化合物或一种化学键(一对类)
键特异性
基团特异性
立体异构特异性:对底物的光学异构体或几何异构体有特异的选择性,一种酶仅作用于底物的一种立体异构体
酶的作用机制机制
酶-底物结合的方式:诱导契合假说,锁钥假说,三点附着假说
酶的高效催化机制:底物与酶的邻近效应和定向效应,底物形变和张力效应,步价催化酸碱催化,金属离子。
酶活及纯化
别构酶:多个亚基的寡聚酶、V与S呈“S”曲线
酶的分离纯化:材料的选择与预处理→酶的提取→分离纯化(盐析:等电点,有机溶剂等沉淀)
酶的活力测定:分光光度法,荧光法,同位素测定法,电化学法
酶的活力单位:U:在一定条件下,时间内将一定量的底物转化为产物的量。酶催化反应速率越大,酶活力越高。
维生素
维生素B1(看脚气病维生素/硫胺素):硫铵素焦磷酸。
维生素B2(核黄酸):黄素单核苷酸
维生素B3(泛酸)
维生素B5(抗粗糙病维生素),叶酸(见光易失活),
维生素B6(抗皮炎维生素),维生素B12(抗恶性贫血维生素)
酶促反应动力学
指单位时间内礼物的减少量或产物的生成量
影响酶促反应的因素
底物浓度:变化呈 米氏曲线
酶浓度:S>>E,即反应液中几物浓度足以使酶饱和最适条件,E增加,V增大。此时没促反应速率与酶浓度成正比。
温度:低温抑制,高温失活,有最适温度,此时速率最大,呈钟罩形曲线
PH:过酸过碱,酶易失活,有最适PH变化成抛物线式变化。
激活剂:无机离子,有机分子,蛋白酶类激活剂,如:钾离子、钠离子、镁离子、钙离子、氯离子等
抑制剂:不可逆抑制剂,可逆抑制剂