高效液相色谱分析

这是一篇关于高效液相色谱分析的思维导图，介绍了特点、影响因素、高效液相色谱仪、主要类型及其分离原理等。

高效液相色谱分析

• 特点
  • （1）高压（2）高速（3）高效（4）高灵敏度（5）实验范围宽（70-80%）
• 影响因素
  • （1）涡流扩散项He——颗粒越小，填充均匀，柱效增大。
  • （2)纵向扩散项Hd（可忽略）——扩散系数越小，流速越大，扩散减小
  • （3）传质阻力项Hs——固定液的厚度越小，阻力越小。
• 高效液相色谱仪
  • （1）高压泵：输送流动相
  • （2）梯度洗提：改变被分离组分的容量因子k和选择性因子，以提高分离效果
  • （3）进样装置：将试样进入分离柱
  • (4）色谱柱：分离试样中的各组分
  • （5）检测器: 检测从色谱柱流出的各组分，并且得到色谱图（紫外光检测器、荧光检测器、示差折光检测器、电导检测器、电化学检测器
• 主要类型及其分离原理
  • （1）液-液分配色谱
    • ①分离原理：试样组分在固定相和流动相之间的相对溶解度存在差异,因而溶质在两相间进行分配。
    • ②正向色谱法：流动相的极性小于固定相的极性；反向色谱法：流动相的极性大于固定相的极性。
    • ③固定相：a.全多孔型：颗粒小而均匀，传质快（距离短），柱效高。b.表层多孔型：孔穴浅（固定相仅为表面的一薄层，传质速度快，易于填充均匀，柱效高，但柱子容量低，需要配用高灵敏检测器。
    • ④流动相：a.尽量使用高纯度试剂做流动相；b.应避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂；c.对试样要有适宜的溶解度；d.溶剂的粘度小些为好；e.应与检测器相匹配。
  • （2)液-固色谱法
    • ①分离原理：通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的
    • ②固定相：采用的吸附剂有硅胶，氧化铝，分子筛，聚酰胺等，可分为全多孔型和薄壳型两种。
    • ③流动相：是影响分离性能的主要因素，常用的溶剂种类与化学键合相色谱相同。
  • （3）离子交换色谱法
    • ①分离原理：通过组分与固定相间亲和力差别而实现分离的。
    • ②固定相：是影响分离的关键因素，应用最广泛的固定相是离子交换树脂，它可分为全多孔型和薄壳型两类。
    • ③流动相：又称为洗脱液或淋洗液，流动相中的离子类型对试样组分的保留值有显著的影响
  • （4）空间排阻色谱
    • ①分离原理：利用凝胶固定项的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系。
    • ②固定相：可分为软质，半硬质和硬质凝胶三种。
    • ③流动相：成分一般不会改变分离效果。a.流动相能充分溶解试样；b.黏度小；c.流动相与检测器匹配；d.流动相必须与固定相匹配。