转染效率

这是一篇关于杨-转染效率的思维导图。包含乙醇稀释法，微流控：单因素考察、选定处方N/P比考察；细胞实验。

LNP颗粒性质对转染效率的影响

• 前言
  • 肺癌简介
  • 介绍LNP载体特性与优势，颗粒性质对免疫原性的影响
  • mRNA性质及在免疫的应用
  • 转染效率的提高对免疫发挥有利，拟研究粒径（PEG比例，配体修饰）对转染效率的影响
• 第一章
  • 乙醇稀释法
    • 若微流控更有优势，则可将手动与微流控进行对比
    • 若从size，PDI角度手动更有优势，则作为微流控筛选范围的参考
  • 微流控
    • 单因素考察
      • 处方筛选
        • MC3，PEG，buffer浓度，脂质浓度
          • Size
          • PDI
          • zeta 电位
      • 工艺考察
        • 总流速（20,40,80,100ml/h），流速比（1:2,1:3,1:4）
    • DOE
      • 处方重点影响因素
      • 工艺中关键参数
    • 选定处方N/P比考察
      • Size
      • PDI
      • 琼脂糖凝胶电泳
• 第二章
  • 细胞实验
    • Uptake
    • N/P ratio
      • 阳性对照Lipo3000
      • 5,10,20
    • 同一处方，同一N/P比，不同粒径处方EGFP-mRNA transfection
      • lipo3000
      • Formulations with different particle sizes
      • naked mRNA
      • Empty LNPs
• 第三章
  • 动物实验
    • 分布
      • 不同粒径mRNA-Luc LNP在肺癌小鼠体内转染情况
• 缩小范围，定比例