革兰阴性无芽胞杆菌

革兰阴性无芽胞杆菌思维导图：包含李氏杆菌属，归于李氏杆菌科，归并为四个群，20个种，致病的存在于第一群，对人，家畜，家禽，野生动物均有致病性存在于河水，污泥，屠宰场废弃物，青贮饲料、乳及其制品、水产品等等等

革兰阴性无芽胞杆菌

• 李氏杆菌属
  • 归于李氏杆菌科，归并为四个群，20个种，致病的存在于第一群
    • 代表：产单核细胞李氏杆菌
  • 产单核细胞李氏杆菌
    • 对人，家畜，家禽，野生动物均有致病性 存在于河水，污泥，屠宰场废弃物，青贮饲料、乳及其制品、水产品等
    • 形态及染色特性
      • 短杆状，两端钝圆，多单在，有时呈“V”形或短链
      • 老龄培养物或粗糙型菌落，长丝状
      • 革兰阳性，无芽胞和荚膜，30°C时形成4根鞭毛
    • 培养及生化特性
      • 需氧或兼性厌氧菌，0-45°C均可生长，30-37°C最适，4°C可缓慢增殖
      • 营养要求不高，血清、全血琼脂培养基上生长良好 加入0.2-1%葡萄糖或2-3%甘油生长更加
      • 液体培养基或液态奶中的世代时间为1.5-3d
      • 血液琼脂培养基，可见其周围狭窄的β溶血环
      • 液体培养基中不形成菌环，菌膜
      • 半固体培养基，穿刺培养，沿穿刺线生长。
      • CAMP阳性 可分解多种糖 触酶阳性 尿素酶阴性 不还原硝酸盐
    • 血清型
      • 基因多态性
        • 谱系Ⅰ 1/2b，3b，4b，4d和4e
        • 谱系Ⅱ 1/2a，1/2c，3a，3c
          • 常见分离谱系
        • 多数人李氏杆菌病原（粗体）
        • 谱系Ⅲ
        • 谱系Ⅳ
        • 4a，4c型和非典型4b型
          • 分离率低，主要为动物源
    • 致病机理及致病性
      • 致病机理
        • 兼性胞内菌，可穿过肠道，血脑和胎盘屏障
        • 经口感染，轻则肠炎，重则败血症，脑膜炎，胎膜炎等
        • 鼻粘膜和眼结膜
        • 毒力因子
          • 主要两种
            • 内化素
              • 细菌黏附
              • 细菌侵袭
            • 李氏杆菌溶血素O（LLO）
              • 维持细胞内感染
              • 躲避宿主免疫系统
              • 主要保护性抗原
          • 其他
            • 两种磷脂酶C
            • 转录激活因子Prfa
            • 非编码RNArli38
            • 吞噬体膜破裂，细菌在巨噬细胞中增殖及毒力因子调控有关
      • 致病性
        • 可自然感染多种家畜，牛，羊易感
        • 犊牛或羔羊出现败血症或肝等脏器坏死灶。
        • 成年牛羊表现神经症状（转圈病），孕畜流产
        • 家兔和小鼠易感性最强，豚鼠与大鼠次之
        • 人误食，死亡率20-30%，孕妇流产症状，致流产
        • 细胞免疫水平低下的成人及儿童感染可出现神经症状
    • 微生物学诊断
      • 分离培养与鉴定
        • 分离培养
          • 采集患畜的血液，脑脊液或脑组织研磨液，加入胰蛋白胨肉汤中增菌，，移植到胰蛋白胨琼脂培养基及加有绵羊红细胞胰蛋白胨培养基37度48小时观察β溶血现象或蓝绿光泽的菌落。
          • 严重污染的样品，选择商品化李氏杆菌选择培养基
          • 对于含菌数较少的神经系统样品，采用冷增菌法
          • 取具有神经症状的病畜脑组织，加营养肉汤制成10%悬液，置4度下，每周接种血琼脂平板一次，直至12周
        • 鉴定
          • 肝，脾，脑组织等，培养物，革兰染色，溶血检查，运动性检查，生化特性鉴定及血清学检查
          • PCR鉴定特异性基因
          • 食源性李氏杆菌污染源的追溯，脉冲场电泳，多位点序列测定与分析等
      • 动物实验
        • 将细菌悬液滴入接种家兔，豚鼠或小鼠眼结膜囊内。脓性结膜炎，兔反应明显
        • 小鼠腹腔接种，剖检，可见肝及脾局灶性坏死，并能从肝和心血中分离出细菌。
        • 可借助凝集反应进行血清学检查。
    • 免疫与治疗
      • 灭活强毒菌株接种小鼠产生数月免疫力，但不能通过血清被动转移。
      • 控制污染，避免用污染的青贮饲料喂食动物。
      • 患病初期用敏感的抗生素治疗。
• 丹毒丝菌属
  • 5个种 代表：猪丹毒丝菌 猪丹毒病的病原体
  • 猪丹毒丝菌
    • 形态及染色特性
      • 直或稍弯曲的细杆菌，两端钝圆，单在或呈V形，堆状或短链排列，易形成长丝状
      • 革兰阳性，有荚膜，无鞭毛，不产生芽胞
    • 培养及生化特性
      • 微需氧菌，实验室培养是兼性厌氧
      • Ph在6.7~9.2范围内均可生长，最适ph 7.2~7.6，生长温度为5~42度，最适温度为30~37度。
      • 有光滑型（致病性）和粗糙型菌落（无致病性）。
      • 血琼脂平板：透明，灰白色，露珠样的圆形小菌落，有狭窄的α溶血环（致病细菌）。
      • 麦康凯培养基不生长。
      • 在肉汤中呈轻度浑浊，不形成菌膜和菌环。
      • 过氧化氢阴性，H₂S阳性
      • 明胶穿刺沿穿刺线生长，呈试管刷状，不液化明胶。
    • 抵抗力
      • 抵抗力较强：腐败和干燥环境，病死猪熏制的火腿3个月后仍能检测到细菌
      • 对热，光直射，常用消毒剂敏感，对青霉素很敏感
    • 抗原结构
      • 依据种特异性热不稳定蛋白和对热，酸稳定的多糖抗原，可分23个血清型
    • 致病机理与致病性
      • 消化道感染进入血液，定殖在局部或引至全身的感染。
      • 借助表面蛋白发挥粘附作用。
      • 荚膜，抵抗吞噬细胞的吞噬。
      • RSPA是一种共同保护性抗原，制亚单位疫苗。
      • 透明质酸酶和唾液酸酶：细菌入侵和扩散
      • 以猪分离率最高，可致猪急性败血症，死亡率高； 亚急性疹块状，慢性疣状心内膜炎，心脏有菜花样赘生物。
      • 小鼠和鸽最易感。
    • 微生物学诊断
      • 涂片镜检：格兰阳性纤细的小杆菌，初步诊断。
      • 分离培养：10%马血清肉汤及琼脂平板，α溶血环。
      • 血清学诊断：培养凝集试验（ESCA)，又称生长凝集试验。
    • 免疫与治疗
      • 猪丹毒GC₄₂或C₄T（10）弱毒菌株制成冻干苗。
      • 灭活苗有较好的保护效果。
      • 用牛或马制备的抗猪丹毒血清可用于紧急预防和治疗。
      • 青霉素治疗
• 肾杆菌属
• 形态规则，不产生芽胞，需氧，微兼性厌氧或微需氧的革兰阳性杆菌，非抗酸染色