临床执医-医学微生物学-008细菌感染的检测方法与防治原则

临床执医-医学微生物学-008细菌感染的检测方法与防治原则主要介绍了细菌感染的实验室诊断、细菌感染的特异性防治

八、细菌感染的检测方法与防治原则

• 《医学微生物学》- 1 细菌感染的实验室诊断
  • 一、临床标本的采集与运送原则
    • 1.早期采集：尽可能在疾病早期、急性期或症状典型时以及使用抗菌药物之前采集标本。
    • 2.无菌采集：严格进行无菌操作，将采集的标本置于无菌容器中，避免标本被杂菌污染。
    • 3.采集适当标本：根据不同疾病以及疾病的不同时期采集目的菌标本。
    • 4.采集双份血清：进行血清学检查时，应采集急性期和恢复期双份血清，只有当恢复期血清抗体效价比急性期的效价明显升高达4倍或以上时，方有诊断价值。
    • 5.尽快送检：大多数细菌标本可以冷藏送检，但对某些不耐寒冷的细菌，送检中要注意保温，为提高该类致病菌的检出率，最好床旁接种。
    • 6.标本做好标记：在相应化验单上详细填写标本种类检验目的和临床诊断，以保证各环节准确无误。
  • 二、细菌的形态学检查
    • 形态学检查包括不染色标本和染色标本的检查法。不染色标本主要用于检查在生活状态下细菌的动力及其运动情况。对涂片标本染色后镜检可观察到菌体形态、大小、排列方式和染色性，并根据其染色性对细菌进行初步分类。
  • 三、细菌的分离培养与鉴定
    • 原则上所有送检标本均应作分离培养，以获得纯培养后进一步鉴定。
    • 1.细菌的分离培养：细菌培养时应选择适宜的培养基，以便提供特定细菌生长所需的必要条件。根据菌落的大小、形态、颜色、表面性状、透明度和溶血性等对细菌作出初步的鉴别。
    • 2.生化试验：细菌对糖类和蛋白质的分解产物不完全一样，故有关代谢产物可作为鉴别细菌的重要依据之一。
    • 3.血清学鉴定：利用已知的特异性抗体检查未知的纯培养细菌，不仅能对分离培养的细菌进行种的鉴定，还可以进一步对细菌进行群和型的鉴别。
    • 4.动物试验：一般不作为临床标本的细菌学常规检查技术，但对测定细菌的毒力或致病性有重要意义，故可选择敏感动物用于疑难的病原菌分离或微生物学的研究。
    • 5.抗菌药物敏感试验：抗菌药物敏感试验简称药敏试验，是测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法。
    • 6.自动微生物鉴定和药敏分析系统：该技术集数学、电子、信息及自动分析技术于一体，将细菌的生化反应模式转换为数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，构建数据库。
  • 四、细菌成分的检测
    • (一)免疫学检验技术
      • 其原理是用已知的特异性抗体检测未知的细菌抗原成分。这些试验特异、敏感、简便，即使是在病人使用了抗生素后采集标本，对细菌的培养不易成功的情况下，细菌抗原仍能被检测出来。
    • (二)分子生物学检验技术
      • 1.聚合酶链式反应(PCR) ：PCR 技术具有快速、灵敏和特异性强等特点，实时定量PCR技术可以检测出病原菌核酸的拷贝数，从而进行细菌定量。
      • 2.核酸杂交技术：核酸杂交技术可从标本中直接检出病原菌基因，不受标本中的杂质干扰。
      • 3.高通量测序技术：高通量测序技术能一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定。经样品核酸的提取、文库构建、测序反应、数据分析等流程获得有关生物物种特征核酸序列的丰富信息。
    • (三)质谱分析法
      • 质谱分析法将有机化合物的分子电离、碎裂，然后按照离子的质荷比大小把生成的各种离子分离，检测其强度并排列成谱，这种研究物质的方法称作质谱法。质谱分析法主要通过检测获得细菌的蛋白质质谱图，将得到的谱图与数据库中的细菌参考谱图比对，实现对细菌的属、种，甚至不同亚种进行鉴定与分类。
    • (四)生物芯片技术
      • 生物芯片是指将核酸片段、蛋白质或酶、抗原或抗体、细胞及组织等生物样品有序地固定于硅片、尼龙膜等固相支持物上，在一定的条件下进行生化反应。反应结果用化学荧光法、酶标法或同位素法显示，通过特定的仪器进行数据读取与收集，最后经专门的计算机软件进行数据分析，从而判断样品中靶分子的种类和数量。
  • 五、细菌感染的血清学诊断
    • 用已知的细菌或其特异性抗原检测病人血清中的抗体及其效价的变化，称为血清学诊断。在血清学诊断中，通常采取双份血清检测。如果恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高4倍以上(含4倍)时，则可确认为现症感染。血清抗体效价受多种因素影响，如早期应用抗菌药物及年老、体弱、免疫功能低下等情况。此时感染，后抗体效价可无明显升高，故抗体效价低时不要轻易否定。
• 《医学微生物学》- 2 细菌感染的特异性防治
  • 概述
    • 特异性防治是应用获得性免疫的原理，给机体注射或服用某种病原微生物抗原或注射特异性抗体，以达到防冶感染性疾病的目的。
  • 一、人工主动免疫
    • 人工主动免疫是将抗原性物质接种于人体，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，从而特异性预防相应病原体感染的措施。
    • 1.死疫苗
      • 死疫苗是指带有免疫原活性的灭活病原体。接种量大，需2~3次。其免疫应答类型为体液免疫，接种后可出现发热、全身或局部肿痛等反应。对机体安全性好，免疫维持时间为0.5~1年。相对稳定、易保存，4摄氏度可保存1年以上。
    • 2.活疫苗
      • 活疫苗亦称减毒活疫苗，是通过自然筛选或人工方法获得的病原微生物的弱毒或无毒株，经培养后制备而成。接种后在体内有生长繁殖能力，接近于自然感染，可激发机体对相应病原体比较持久的免疫力。仅需接种1次，接种后可出现类似轻型感染或隐性感染。免疫应答机制为体液免疫和细胞免疫。维持时间1~5年或更长。对免疫缺陷者有风险。其相对不稳定，不易保存，4摄氏度可存活2周，真空冻干可长期保存。
    • 3.类毒素
      • 类毒素是经0.3%~0.4%甲醛处理后，失去了毒性但仍保持免疫原性的外毒素制成的生物制品。加入吸附剂(佐剂)氢氧化铝后便制成精制类毒素。佐剂可延缓类毒素在体内的吸收时间，刺激机体产生足量的抗毒素。
    • 4.多糖疫苗
      • 多糖疫苗是提取纯化细菌中多糖抗原成分制备而成。多糖疫苗与传统疫苗相比其成分单一，不存在易引起免疫副反应的物质，使得该类疫苗更为安全有效，已成为应用最多的疫苗之一。
    • 5.联合疫苗
      • 联合疫苗指的是由不同抗原组分混合制成的疫苗，包括多联疫苗与多价疫苗。其中，多联疫苗是由两种或两种以上疫苗原液按特定比例配合制成的具有多种免疫原性的疫苗，可同时预防多种疾病。多价疫苗则是由同一种细菌的不同亚型抗原合并组成的含多价抗原成分的一种疫苗。
    • 6.基因工程疫苗
      • 基因工程疫苗是利用基因工程技术将编码病原体抗原的目的基因导入原核或真核表达系统中，利用表达的抗原产物或重组体本身制成的疫苗。
  • 二、人工被动免疫
    • 人工被动免疫是输入含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球蛋白等免疫制剂，使机体立即获得特异性免疫力的过程，可用于某些急性传染病的紧急预防和治疗。但因这些免疫物质不是病人自身体内产生，故维持时间较短。
    • 1.抗毒素
      • 抗毒素是对毒素具有中和作用的特异性抗体。抗毒素主要用于外毒素所致疾病的治疗和紧急预防。
    • 2.丙种球蛋白
      • 血清丙种球蛋白是从正常人血浆中提取的丙种球蛋白制剂。因为大多数成人患过多种感染性疾病、经历过隐性感染及疫苗接种，故血清中含有抗多种微生物的特异性抗体。血清丙种球蛋白主要用于对某些疾病的紧急预防及烧伤病人预防细菌感染。
• 临床执医 医学微生物学 008 细菌感染的检测方法与治疗原则