导图社区 核酸
1.本人23考研,南农,第1名上岸,去年自己总结的思维导图。 2.考研414生物化学思维导图,知识点全面,真题我也在导图中进行了标注。 3.并且很多题编了口诀,非常容易记忆。 4.学习过程中,可以结合导图进行复习,事半功倍。
编辑于2023-05-15 08:13:091.考研414生物化学思维导图(核苷酸代谢) 2.本人23考研南京农业大学第1名上岸,我自己制作的导图,上岸神器。 3.本导图覆盖考试重点,并且真题也在导图中标记,结合导图复习,事半功倍。
1.考研414生物化学思维导图(氨基酸代谢) 2.本人23考研南京农业大学第1名上岸,我自己制作的导图,上岸神器。 3.本导图覆盖考试重点,并且真题也在导图中标记,结合导图复习,事半功倍。
1.考研414生物化学思维导图(脂代谢) 2.本人23考研南京农业大学第1名上岸,我自己制作的导图,上岸神器。 3.本导图覆盖考试重点,并且真题也在导图中标记,结合导图复习,事半功倍。
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1.考研414生物化学思维导图(核苷酸代谢) 2.本人23考研南京农业大学第1名上岸,我自己制作的导图,上岸神器。 3.本导图覆盖考试重点,并且真题也在导图中标记,结合导图复习,事半功倍。
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核酸
核苷酸
核酸的组成单位
核苷酸
核苷
碱基
嘧啶
C1-Ν1相连
脲嘧啶(U)
胞嘧啶(C)
胸腺嘧啶(T)
嘌呤
C1-N9相连
腺嘌呤(A)
鸟嘌呤(G)
戊糖
核糖
2',3',5'(三个自由羟基)
脱氧核糖
3',5'(两个自由羟基)
磷酸基团
种类
组成DNA
dAMP
dGMP
dCMP
dTMP
组成RNA
AMP
GMP
CMP
UMP
核苷酸及其衍生物功能
核苷酸功能
1.组成核酸
2.高能分子
ATP
能量代谢通用载体
GTP
促进生物学过程的能量供体
3.酶的辅因子
真题
NAD+
FAD
HS-COA
都含有腺苷酸
4.信号分子
cAMP、GTP
5.糖基载体
ADP、GDP、UDP和葡萄糖结合后才能进一步合成其他糖
衍生物
糖核苷酸
过程
1-磷酸葡萄糖+NTP→NDPG+焦磷酸
酶
核糖核苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶
功能
ADPG
合成淀粉
UDPG
合成糖原,蔗糖
CDP
合成脂肪
cAMP
信号分子调节糖脂代谢
NADH、NADPH、FADH2
参与糖脂代谢
DNA
一级结构
概念
脱氧核糖核苷酸在多核苷酸链上的排列顺序
连接
3',5'磷酸二酯键
方向
5'端
单磷酸酯键连在5'碳上
3'端
3'游离羟基
基因位于DNA分子上
基因
一段有遗传效应的DNA片段
外显子
参与编码的DNA序列
内含子
不参与编码的DNA序列
双螺旋结构
Watson和Crick
Chargaff原则
[A]=[T];[G]=[C]
特点
1.反向平行,右手双螺旋
2.大沟,小沟
3.双螺旋
直径
2.0nm
螺距
3.4nm
每圈
10bp
4.骨架外侧,碱基内侧并与纵轴垂直
5.碱基互补配对
[A]=[T];[G]=[C]
6.遗传信息储存在碱基序列中
意义
第一次提出了遗传信息的存储方式和DNA复制的机理
构象多态性
典型的DNA
相对湿度92%
B-DNA
其它DNA
相对湿度75%
A-DNA
相对湿度66%
C-DNA
左手螺旋
Z-DNA
回文结构与镜像重复结构
超螺旋
正超螺旋
负超螺旋
自然界中均为负超螺旋
L=T+W
L
连接数
T
双螺旋数
W
超螺旋数
拓扑异构体
L值不同的同种DNA分子
拓扑异构酶
I
去除负超螺旋
II
引入负超螺旋
意义
参与DNA解旋
抵抗高温干扰
有助于DNA包装
DNA的包装
核小体
DNA
146bp
左手超螺旋盘绕组蛋白核心
54bp
连接DNA
组蛋白
分类
H1、H2A、H2B、H3、H4
核心
八聚体(H2A、H2B、H3、H4)x2
H1结合在进出口处
RNA
一级结构
17真题
核糖核苷酸以3',5'-磷酸二酯键相连形成的核苷酸排列顺序
二级结构
单链
双螺旋区
突起
内环
发夹结构
作用力
氢键
碱基堆积力
分类
tRNΑ
功能
将氨基酸转运至核糖体
一级结构
组成
分子较小,70-90个核苷酸
稀有碱基含量高
5'端为pG或pC
3'端为CCA
二级结构
18真题
三叶草形
组成
氨基酸臂
氨基酸位点
DHU环(二氢尿嘧啶环)
TψC环
反密码环
反密码子碱基互补识别mRNA的密码子
额外环
3'端为CCA
三级结构
倒L形
反密码环与氨基酸接受臂位于两端
mRNA
原核生物
存在形式
多顺反子
一条mRNA上可以翻译多条不同的多肽链
半衰期
很短
结构特点
无5'帽子和3'尾巴
工作形式
转录与翻译偶联
有SD序列
结合原核生物核糖体
起始密码子
AUG,GUG
真核生物
存在形式
单顺反子
一条mRNA只编码一条多肽链
半衰期
较长
结构特点
5'帽子
7-甲基化鸟苷酸经焦磷酸与另一个核苷酸5'端相连
5',5'-三磷酸连接键
3'多聚腺苷酸尾巴
工作形式
转录形成hnRNA,再加工为成熟的mRNA
无SD序列
起始密码子
AUG
rRNA
组成核糖体
原核生物
5S
16S
23S
真核生物
5S
5.8S
18S
28S
核酶
具有催化作用
意义
1.扩展了酶的概念
2.揭示了内含子自我剪接的奥秘,促进了RNA加工机理的研究
3.为生命起源与生命进化提供了新的依据
特殊RNA
smRNA
miRNA
siRNA
核酸的分离与鉴定
核酸分离
DNA的分离
08真题
方法
苯酚-氯仿抽提技术
原则
防止过酸、过碱、高温,保持完整性
提取液中高浓度NaCl
有利于核蛋白的溶解
苯酚
蛋白质变性剂,除去蛋白质
EDTA
螯合掉Mg2+
Mg2+是DNase的辅因子
SDS,蛋白酶K
使蛋白质变性,DNase失活
乙醇
沉淀分离DNA
洗涤DNA
RNA的分离
原则
尽可能抑制RNase的活性
核酸密度梯度超离心
沉降平衡
均匀介质溶液与核酸混合
介质
氯化铯(CsCl)
核酸密度
G-C含量高,密度大
单链>双链
超螺旋>环状>线性
核酸电泳
琼脂糖凝胶电泳
指示剂
溴酚蓝
根据溴酚蓝的迁移距离判断电泳距离
染色剂
EB(溴化乙锭)
紫外灯下显色
迁移速度影响因素
电场强度
电泳凝胶浓度
核酸大小
分子构象
超螺旋>线状>环状
PAGE
RNA,小于1kb的DNA
PFGE
可达1万kb
分子杂交
概念
两条来源不同,但有碱基互补关系
单链分子之间
形成双链
应用
是否存在同源基因
外源基因的整合
同一基因的拷贝数
Southern blot
DNA印迹
Northern blot
RNA印迹
过程
酶切
样品酶切
电泳
电泳分离
转膜
变性后转移到硝酸纤维素膜上
探针
带有标记的核酸探针进行杂交反应
柱层析
羟基磷灰石柱层析
双链DNA结合紧密
结合温度改变可以按碱基组成分离
亲和层析
DNA序列测定
化学法
Sanger法(双脱氧链终止法)
定量方法
钼蓝比色法
磷
地衣酚显色
RNA戊糖含量
二苯胺显色
DNA脱氧核糖含量
核酸的性质
水解
酸水解
糖苷键
3',5'-磷酸二酯键
碱水解
生成3'核苷酸和2'核苷酸
酶水解
按作用底物
DNA酶
RNA酶
按作用方式
核酸外切酶
核酸内切酶
限制性内切酶
18真题
概念
一类能识别双链DNA分子内部的特异位点并水解磷酸二酯键的核酸内切酶
特点
异源
降解异源DNA
识别
专一性识别具有回文特征的DNA序列,定点切断磷酸二酯键
稳定
性质稳定,需要Mg2+
末端
同时水解DNA两条链,形成黏性末端或平末端
意义
维持原核生物的遗传稳定性
酸碱性质
磷酸基,含氮碱基
生理条件下带负电
紫外吸收
260nm
Α260/A280判断样品纯度
比较纯
DNA 1.8-2.2
RNA>2
A260=1
33μg/ml,单核苷酸
40μg/ml,单链DNA
50μg/ml,双螺旋DNA
变性与复性
变性
氢键断裂
紫外吸收升高
黏度下降
生物活性丧失
复性
重新结合为双螺旋
Tm值
概念
双螺旋丧失一半时的温度
影响因素
DNA均一性
介质中离子强度,离子强度低,Tm低
G-C含量,含量越高,Tm越高
本章总结
1.经常和蛋白质合成章节结合起来考
2.可能会出实验题
知乎@小谷同学
b站@别抱cc
小红书@是个泡泡
注意
读序列
从下向上阅读
试剂
dNTP
原料
ddNTP
导致链终止
口诀:南方DNA,北方RNA,西方蛋白质
为什么选择氯化铯?
核酸分子密度大,黏度大
氯化铯溶解度大
高浓度,高密度的溶液
氯化铯黏度小,易扩散
利于核酸分离
口诀:异源识别,稳定末端
口诀:“多短多单帽子尾” 多:原核生物为多顺反子 短:原核生物半衰期很短 多:原核生物一条mRNA可以翻译多条不同多肽链 单:真核生物为单顺反子 帽子:5'帽子 尾:3'尾巴
口诀:“小稀35倒三L” 小:分子较小 稀:稀有碱基 3:3'端为CCA,三叶草形 5:5个臂或者环 倒三L:三级结构为倒L