医学考研思维导图——常用分子生物学技术的原理及其应用

这是一篇关于考研—常用分子生物学技术的原理及其应用的思维导图，包含了生物大分子相互作用、 基因诊断与治疗、印迹技术、 PCR等内容。

常用分子生物学技术的原理及其应用

• 印迹技术
  • 将凝胶中分离的生物大分子（Pr、DNA、RNA）转移到固定化介质上加以分析
  • DNA印迹技术
    • Southern bloting
  • RNA印迹技术
    • Northern bloting
  • 蛋白质印迹技术
    • Western bloting
• PCR
  • ——聚合酶链反应
    • 本质：体外的DNA复制
  • 合成体系
    • 模板DNA
    • 特异引物（DNA）
    • 耐热DNA-pol
    • dNTP
    • 含Mg2+缓冲液
    • PCR仪
  • 合成过程——PCR循环
    • 变性：加热至95℃，双链变单链
    • 复性（退火）：缓慢冷却至55~60℃，引物与模板DNA特异性结合
      • 引物：人工合成的DNA
      • V.S.重组体筛选：序列~
    • 延伸：温度升至72℃，合成DNA双链
    • 下一轮循环：总共循环25~30次，扩增至百万（2^n）
  • 用途
    • 获得目的基因
    • DNA的微量分析
    • 基因表达的检测（RNA的微量分析）——RT-PCR（逆转录PCR）
    • DNA序列分析（测序）
    • 基因突变的分析
    • 基因的体外突变
• 生物大分子相互作用
  • 蛋白质相互作用的研究
    • 酵母双杂交技术
      • “双黄蛋”
    • 标签蛋白质沉淀
  • DNA与蛋白质相互作用的研究
    • 电泳迁移率变化分析
      • “爷爷带着孙子去游泳”
    • 染色质免疫沉淀技术
• 基因诊断与治疗
  • 见记忆技巧