导图社区 细胞工程
包含了通过细胞融合或拆合、核质交换或核移植、染色体或基因转录以及经由细胞培养和筛选，按照人们预先的设计。
医学细胞生物学第六章线粒体讲述了形态、数量、结构、化学组成、遗传体系、化学渗透学说、核编码蛋白质的转运。
细胞生物学第七章细胞骨架与囊泡运输，讲述了微管、肌动蛋白丝、中间纤维、细胞运动等，希望梳理的内容对你有所帮助！
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第14章DNA的生物合成读书笔记
细胞工程
通过细胞融合或拆合、核质交换或核移植、染色体或基因转录以及经由细胞培养和筛选，按照人们预先的设计，产生出新的细胞，用于生产、医疗或研发
分类
不同操作对象
动物细胞工程
植物细胞工程
微生物细胞工程
细胞拆合和重组的层次
细胞整体层次
细胞培养、细胞融合、细胞重编程
细胞器层次
核移植
分子层次
基因转移
主要相关技术
大规模细胞培养
定义
细胞的高密度或高浓度培养，培养容量2L以上
目的
制备大量的细胞或特殊细胞产物
体系
悬浮细胞培养
贴壁细胞培养
方法
悬浮培养
血液淋巴细胞及其肿瘤细胞
转化细胞
融合细胞：杂交瘤细胞
悬浮驯化的贴壁生长细胞
制备大量的抗体、疫苗、细胞因子等重组蛋白类似药物
固定化培养
适用于所有动物细胞
常用方法
吸附法
包埋法
优点
细胞以较高密度在较小体积的培养液中生长，培养液易于更换及分析
微载体培养
细胞吸附在微载体表面及其内部进行生长或繁殖的细胞培养技术
三维细胞培养
具有三位结构的不同材料作为载体，与各种不同种类的细胞在体外共同培养，使细胞能够在载体的三维立体空间结构迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物
细胞融合
2个或2个以上的细胞合并成1个细胞的过程，又叫细胞杂交
杂交细胞：细胞融合所产生的细胞
促融方法
病毒法：灭活的仙台病毒
化学法：聚乙二醇（PEG）、溶血卵凝脂、油酸
物理法：电穿孔术
杂交细胞筛选方法
抗药性筛选法
常用HAT培养基
营养缺陷筛选
温度敏感筛选
细胞核移植
显微操作仪
化学药物
用细胞松弛素及离心方法去核，采用PEG使细胞核融入另一个细胞
体细胞核移植的应用
细胞工程领域
同源克隆
细胞治疗克隆
治疗性克隆
生殖性克隆
将外源基因导入受体细胞并整合至受体细胞的基因组中，使受体细胞遗传性状及表型发生一定改变的技术
步骤
外源目的基因的选择与获取
将外源基因导入受体细胞
对整合有目的基因的细胞进行筛选、扩增及鉴定
若受体为卵细胞，进行体外培育，植入合适动物子宫
筛选并获得转基因动物
物理法
电穿孔法、显微注射法、裸DNA直接注射法
化学法
磷酸钙共沉淀法、脂质体包埋法、DEAE－葡聚糖法
生物法
病毒介导法、体细胞核移植法、精子载体法、胚胎干细胞转染法
细胞重编程
将已分化细胞的核基因组恢复其分化前的功能状态。不改变基因组序列的情况下，通过表观遗传修饰如DNA甲基化来改变细胞的命运
特点
具有类似胚胎干细胞的多能性，又避开了胚胎干细胞应用的伦理学限制
具有患者特异性或疾病特异性
可显著减少免疫反应
类型
多能性重编程
将已分化细胞在特定条件下去分化恢复到全能性或多能性状态
途径
核移植、细胞融合、多能细胞提取物共培养、iPS重编程
谱系重编程
不经过多能干细胞阶段，直接将已分化的成熟转化为另外一种成熟细胞或干细胞的重编程策略
转分化、去分化、转分化、特定类型的化生
组织工程
运用细胞生物学和工程学的原理，研究和开发能修复或改善损伤组织的形态和功能的生物代谢物，将其填入机体，恢复失去或下降的功能
