肠杆菌科

微生物检验技术 细菌检验 沙门志贺特性及检验技术，肠杆菌科包括无芽孢、周身鞭毛或无鞭毛的革兰氏染色阴性直杆菌。化能有机营养，兼营呼吸代谢和发酵代谢。

肠杆菌科

• 大肠埃希菌
  • 生物学性状
    • 多数有周鞭毛，有菌毛，无芽孢
    • IMViC试验
      • ++--
        • 与产气杆菌鉴别
    • 肠道正常菌群，是粪便污染的检测指标
    • 血清学分型
      • 按照OKH顺序
  • 临床意义
    • 致病物质
      • 侵袭力
        • K抗原：抗吞噬 抵抗补体抗体
        • 菌毛：使细菌在肠道定植
      • 内毒素
        • 毒性部位在类脂A
        • 引起发热休克DIC等
      • 外毒素
        • 志贺毒素
        • 耐热肠毒素
          • 引起腹泻
        • 不耐热肠毒素
        • 溶血素A
          • 尿路致病性大肠埃希菌
    • 所致疾病
      • 肠道外感染
        • 败血症、新生儿脑膜炎、泌尿道感染
        • 属于内源性感染、异位感染
      • 胃肠炎
        • 外源性感染，仅某些血清型可致病
        • 分类
          • 血 侵 聚 毒 病
          • 肠出血性大肠埃希菌（EHEC）
            • 作用于大肠，表达志贺毒素，有A/E组织病理损伤
            • 导致出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征
          • 肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）
            • 作用于结肠，不产生肠毒素，类似于痢疾
          • 肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）
            • 作用于小肠，导致婴幼儿和旅行者水样腹泻
          • 肠毒素型大肠埃希菌（ETEC）
            • 作用于小肠，导致婴幼儿和旅行者腹泻
            • 类似于霍乱样腹泻，激活AC和GC，致病物质为肠毒素和定植因子
          • 肠致病性大肠埃希菌（EPEC）
            • 作用于小肠，导致婴幼儿腹泻
            • 不产生肠毒素，无侵袭力，有A/E组织病理损伤，导致微绒毛破坏
  • 微生物学检查法
    • 肠道外感染
      • 血液、尿、脑脊液等标本
      • 初步鉴定：IMViC:++-- MIU:++- KIA:AA+-
        • 吲哚 甲基红 vp 枸橼酸盐
      • 最后鉴定：系列生化反应
    • 肠道内感染
      • 粪便标本
      • ELISA、PCR等
• 克雷伯菌
  • 临床意义
    • 引起原发性肺炎（肺克）
  • 生物学性状
    • 无鞭毛 无芽胞 有明显荚膜
    • 形成较大 凸起 灰白色 黏液型菌落 易与相邻菌落融合 挑丝试验阳性
  • 微生物学检查
    • 氧化酶阴性 触酶阳性 动力阴性
    • KIA:AA+-
    • MIU:--+
    • IMViC:--++
• 志贺菌
  • 生物学性状
    • 无芽孢、无鞭毛、无荚膜，有菌毛
      • 除志贺、克雷伯之外都有鞭毛
    • 除宋内志贺菌缓慢发酵乳糖，其余均不发酵乳糖
    • 抵抗力弱，对酸和消毒剂敏感
  • 致病性
    • 所致疾病
      • 细菌性痢疾
        • 志贺菌感染只局限于肠道，不侵入血液
        • 潜伏期1~3天，黏液脓血便、里急后重、腹痛
    • 致病物质
      • 侵袭力
        • 菌毛、Ⅲ型分泌系统等
          • 黏液脓血便
        • 结肠派尔淋巴结的M细胞
      • 内毒素
        • 主要致病物质
          • 腹痛、里急后重
      • 外毒素
        • A群志贺菌I型和Ⅱ型能产生志贺毒素
        • 损伤上皮细胞，仅毒素入血
          • 溶血性尿毒综合征
  • 免疫性
    • 免疫力不牢固，免疫靠sIgA
  • 微生物学检查法
    • 30%甘油缓冲盐水保存标本
    • Sereny试验阳性
      • 有侵袭力
    • 取可疑菌落（MAC无色不透明 SS不透明透明）
    • 协同凝集试验
      • 诊断感染
  • 药敏试验
    • 对一二代头孢、头霉素固有耐药（大于3代可以
• 沙门菌
  • 生物学性状
    • 胞内寄生菌，有菌毛，大多有周身鞭毛，无芽孢
    • 不发酵乳糖，除伤寒沙门菌外均产酸产气（伤寒沙门菌仅产酸）
    • 尿素酶试验
      • 与变形杆菌鉴别
  • 致病性
    • 致病物质
      • 侵袭力
        • 侵入小肠派尔淋巴结的M细胞
      • 内毒素
        • 主要致病物质，是体温升高、白细胞下降
      • 肠毒素
        • 个别沙门菌（如鼠伤寒沙门菌）可产生
    • 所致疾病
      • 肠热症
        • 伤寒
          • 伤寒沙门菌
        • 副伤寒
          • 甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌
        • 两次菌血症、高热、相对缓脉、肝脾大、玫瑰疹、外周血白细胞下降，严重者出血、肠穿孔
      • 胃肠炎
        • 最常见，水样腹泻，内毒素是主因
      • 败血症
  • 免疫性
    • 主要是细胞免疫
  • 微生物学检查法
    • 标本
      • 肠热症
        • 第1周
          • 外周血
        • 第2周
          • 粪便
        • 第3周
          • 粪便或尿液
        • 第1~3周
          • 骨髓液
      • 胃肠炎
        • 粪便、可疑食物
      • 败血症
        • 血液
    • 分离鉴定
      • 玻片凝集试验确定
    • 肠热症的血清学诊断
      • 肥达实验
        • 抗O抗原抗体（IgM）、抗H抗原抗体（IgG）
        • 结果
          • O高H高
            • 肠热症
          • O低H低
            • 不是病人
          • O低H高
            • 预防接种后、非特异性回忆反应
          • O高H低
            • 感染早期、交叉反应（副伤寒）
    • 检查伤寒带菌者
      • 初筛
        • 检测Vi抗原，效价≥1：10
      • 确定
        • 分离培养
        • 鉴定
          • H2S阳性 脲酶吲哚阴性
  • 防治原则
    • 伤寒Vi荚膜多糖疫苗
    • 环丙沙星
• 其他肠杆菌
  • 耶尔森菌
    • 鼠疫耶尔森菌
      • 两级浓染有荚膜
        • 最适温度25℃-28℃
      • 肉汤培养基 48h形成菌膜 稍加摇动呈钟乳石样下坠
    • 小肠结肠炎耶尔森菌
      • 两级浓染 耐低温（嗜冷性）
    • 假结核耶尔森菌
      • 脲酶阳性 与鼠疫鉴别
  • 沙雷菌
    • 黏质沙雷菌是最小的细菌 用于检查除菌滤器的效果
  • 变形杆菌
    • 动力活泼 产生硫化氢 迁徙生长
  • 弗劳地枸橼酸杆菌
    • 可产生硫化氢
  • 沙门也产硫化氢注意鉴别
• 微生物学检验
  • 分离培养
    • 无菌部位标本
      • 肉汤增菌
    • 泌尿 呼吸道伤口
      • 鉴别培养基：MAC EMB (促进肠杆菌科细菌生长
    • 粪便标本
      • 非选择性培养基 BAP
      • 弱选择鉴别培养基 MAC
      • 沙门志贺强选择培养基 SS
  • 鉴定
    • 科间鉴别
      • 有无鞭毛 氧化酶阴性 触酶阳性 发酵葡萄糖 硝酸盐还原阳性
    • 属间鉴别
      • 苯丙氨酸脱氢酶和葡萄糖酸盐或vp试验
    • 属内鉴别
      • 见个章节
• 生化特性
  • 氧化酶阴性
    • 鉴别肠道杆菌与其他革兰阴性杆菌
      • p103
    • 邻单胞菌除外
  • 发酵葡萄糖 of试验发酵型
  • 乳糖发酵试验
    • 发酵乳糖，产酸，红色
      • 致病肠道杆菌（志贺菌、沙门菌）
    • 不发酵乳糖，不产酸，黄色
      • 非致病肠道杆菌（大肠埃希菌等）
  • 触媒阳性
  • 硝酸盐还原试验阳性
• 共同特点
  • 主要引起腹泻或肠道感染
    • 除志贺菌外均可引起肠道外感染
  • 革兰阴性杆菌，不产生芽孢，抵抗力不强
  • 分型依据
    • O抗原和H 抗原是分群分型依据
  • 除了志贺 克雷伯外都有鞭毛
  • 都有I型菌毛