导图社区 血液检验
临床基础检验技术 标本采集 红细胞白细胞检验，该思维导图对上述知识点进行了一个大致的梳理，非常实用具有参考性。
血液检验 红细胞疾病 缺铁性贫血 巨幼细胞贫血 溶血性贫血 医学检验技术
免疫检验技术 抗原抗体制备 抗原抗体结合 免疫标记物质，该思维导图包含了关于上述知识点的一系列大致梳理。
免疫检验技术 免疫凝集 免疫沉淀 临床免疫检验，本思维导图包含对上述知识点进行一个大致的梳理，具有学习价值。
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血液检验
标本采集和处理
标本类型
全血
细胞计数 分类 形态观察
血浆
经抗凝离心去除血细胞成分
血栓止血检测
血清
血液离体凝固后分离出来的液体
生化 免疫学检测
缺乏纤维蛋白原和凝血因子
标本方法
毛细血管采血
采血部位：指端 足跟（婴儿）
操作
按摩采血部位 使组织自然充血
消毒皮肤 干燥后 轻捏采血部位两侧
右手持消毒针迅速刺入 2-3mm 弃去第1滴血液
无菌干棉签压住采血部位止血
注意
切勿用力挤压 混入过多组织液
采血迅速 放置血液凝固
静脉采血
采血部位：肘正中静脉
婴儿：颈静脉 股静脉
穿刺点上6cm扎紧压脉带 嘱其握拳 静脉充盈暴露
碘町和乙醇（或碘伏）消毒穿刺区域
穿刺：左手固定 右手持针 针头以30°角刺入皮肤后放低至 5°刺入血管见回血后 将针头沿血管方向前进少许
松开压脉带
1min内
抽取足够血量后 嘱受检者放开拳头 棉签按压穿刺点 迅速拔出针头
取下针头 将血液缓慢注入试管
多管采血分配原则
1血培养
2血凝分析
蓝管：枸橼酸钠：血液 1：9 血凝试验
颠倒混匀3-4次
其余都是5-8次
黑管：枸橼酸钠：血液 1：4 红细胞沉降率试验
3生化免疫
金黄管：促凝剂/分离胶 生成血清 生化免疫试验
红管
玻璃管：无促凝剂 不需混匀 生成血清 免疫生化试验
塑料管：促凝剂 生成血清 免疫生化试验
4生化
绿管;：肝素锂 肝素钠 生成血浆 生化试验
浅绿管：肝素锂/分离胶 生成血浆 生化试验
5常规
紫管：EDTA-K2/K3 血常规试验
6血糖
灰管：葡萄糖酵解抑制剂 血糖试验
注意事项
严格执行无菌操作
禁止从输液 输血的针头内采取标本
采血过程中 针栓严禁回推 以免形成气栓
动脉采血
多选用桡动脉：主要用于血气分析
标本处理
添加剂
抗凝剂
使用全血或血浆标本时 加入抗凝剂去除或抑制某种凝血因子活性 阻止血液凝固
分类
乙二胺四乙酸盐EDTA
与Ca离子结合 阻止凝固
全血细胞计数
不适用于凝血试验 血小板功能检查
枸橼酸盐
与ca离子结合 阻止凝固
血沉 凝血试验
输血保养液
肝素
阻止凝血酶形成
快速生化检验 血气分析 红细胞渗透脆性试验
不适用于血常规
促凝剂
为迅速获得血清 可加入促凝剂
急诊生化检验
分离胶
分离血细胞和血清
快速分离血清 利于标本冷藏
保存
全血标本
不宜冷藏 室温不宜超过6h
分离标本
4℃ 一周
-20℃ 一个月
-70℃ 三个月
血液一般检验
血涂片制备和染色
预处理
新载玻片用1mol/l HCL浸泡24h
薄血膜
采血
取血一小滴(0.05ml),置载玻片一端1cm处或整片的3/4处中央
涂片
左手持载玻片，右手持推片从血滴前方后移接触血滴，使血液沿推片与载玻片的接触缘展开，至距边缘5mm时，保持推片与载玻片呈30°~45°，匀速、平稳地向前推制成血涂片
干燥
将血涂片在空中晃动，使其迅速干燥
厚血膜
取血一小滴于载玻片中央，用推片的一角将血 由内向外旋转涂片，制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形血膜，自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，待红细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去液体，血涂片干燥后即可染色镜检。
质量控制
血涂片质量要求
普通血涂片
厚薄适宜 头体尾分明
至少长25mm 距玻片两侧边缘距离约为5mm
厚薄血膜
疟原虫检查
血量4~ 5μl 位于右1/3处，直径0.8~ 1.0cm,外出圆形厚薄 均匀，无划痕
血量1.0~ 1.5μl,位于1/2~1/3处，外观舌状，厚薄均匀，无划痕
制备操作
血滴越大 角度越大 速度越快 血膜越厚
染色
Wright染色法
最常用的方法 对胞质着色效果好
伊红-酸性染料 亚甲蓝-碱性染料
中性颗粒染成紫红色
硝酸盐缓冲液PH6.4-6.8 -着色稳定
PH小偏红（带正电荷） 大偏蓝
甲醇
使染料解离为离子状态
强脱水性 固定细胞
增强细胞对染液的吸附能力
Giemsa染色法
加强了天青的作用
胞核和寄生虫效果好
W-G染色法
着色鲜艳 对比良好
血细胞计数
改良牛鲍计数板
9个大方格 每个1mm2 容积0.1mm3 （ul）
计数误差
技术误差（系统误差）
固有误差(偶然误差）
红细胞检验
红细胞计数
原理：血液样本稀释200倍后 牛鲍计数板计数中央大方格内5个中方格
Hayem液：氯化钠 硫酸钠 氯化汞 --调节渗透压 防腐
急诊时可用等渗生理盐水稀释
参考区间
＜1.5决定输血
男：4.0-5.5）x1012/l
女：3.5-5.0）x1012/l
新生儿：6-7x1012/l
病理改变
增多
相对性-血容量减少（呕吐 高热 腹泻 烧伤
绝对性-组织缺氧 EPO升高 真红细胞增多症
减少
生成减少-再障 缺铁贫 巨幼贫
破坏增多-生理性膜缺陷 溶贫
红细胞丢失-失血性贫血
血红蛋白Hb
测定方法
氰化血红蛋白测定法HiCN 参考方法
吸光度反应浓度
标本浊度大可能影响结果（高脂 高球蛋白）置换血浆
SDS-Hb测定 次选方法
试剂无毒 重发性好
＜45g/L考虑输血
男：120-160g/L
女：110-150g/L
新生儿：170-200g/L
临床意义
判断贫血的灵敏度优于红细胞
贫血分级
轻度＜120 （女110）
中度＜90
重度＜60
极重度＜30
血细胞比容HCT
一定体积全血中红细胞所占体积相对比值
与红细胞数量 平均体积 血浆量有关
减低
红细胞减少
各种原因所致的贫血、出血
血浆量增多
竞技运动员(生理性适应)、中晚期妊娠、原发性醛固酮增多症、过多补液
增加
红细胞增多
真性红细胞增多症、缺氧、肿瘤、EPO增多
血浆量减少
各种原因所致的液体丢失，如液体摄入不足、大量出汗、腹泻与呕吐、多尿
红细胞平均指数
MCV:单个红细胞体积平均值
80-100
MCH：单个红细胞血红蛋白含量平均值
26-34
MCHC：全部红细胞血红蛋白浓度平均值
320-360
贫血形态学分类
p30
网织红细胞Ret
介于晚幼红和成熟红细胞间过渡细胞
反应骨髓造血功能
成人 儿童：0.5%-1.5%
新生儿：2%-6%
计数方法
玻片法
滴煌焦油蓝乙醇 加血 推片角混匀
原理：活体染料（新亚甲蓝或煌焦油蓝）与网织红细胞RNA结合
新鲜全血EDTA抗凝或末梢全血
正常染色-嗜多色性红细胞
试管法
加染液: 取一试管， 加入染液1滴
加血液: 注入新鲜全血1滴， 立即混匀，室温下放置15~20分钟
制备涂片:取混匀染色血1小滴制成薄血涂片，自然干燥
观察:低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好的部位
计数
常规法是在油镜下计数至 少1000个红细胞中的网织红细胞
Miller窥盘计数法
推荐方法
小格A内计数所有成熟RBC,
大格B内(含小格)计数网织红细胞数
计算
网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000(常规法)
网织红细胞百分数=大方格B内的网织红细胞数/小方格A内的成熟红细胞数x9(Miller窥盘计数法)
红细胞沉降率
魏氏法：枸橼酸钠抗凝 读取血浆高度
自动血沉仪：浊度改变
缗钱状改变 导致血沉加快
男：0-15mm/h
女：0-20mm/h
生理性增快 月经期、妊娠3个月以上孕妇及60岁以上老年人可轻度增快。 病理性增快 ①各种炎症；②组织损伤或坏死；③恶性肿瘤；④引起球蛋白增高的疾病；⑤其他。 血沉增快也反映了红细胞的聚集性。
红细胞形态
选择细胞分布均匀染色良好 红细胞紧密排列但不重叠的区域
正常红细胞形态
呈淡红色双凹圆盘状，大小基本均匀，直径6～9µm，中心淡染区是直径的1/3 ～ 2/5
异常红细胞p39
大小不均、球形RBC、椭圆形rbc、镰型、靶型、棘形、嗜碱性点彩RBC（铅中毒）、染色质小体H-J、卡波环
白细胞检验
白细胞计数
血液样本稀释至20倍后 牛鲍计数板计数四角4个大方格细胞数
稀酸溶液破坏红细胞
仅反映循环池中的粒细胞数
有核红细胞校正
校正后白细胞/L=校正前白细胞x100/100+有核红细胞
成人：3.5-9.5）x109/L
儿童：5-12）x109/L
新生儿：15-20）x109/L
白细胞分类
参考范围
中性粒 40%-75%
嗜酸性 0.4%-8%
嗜碱性 0-1%
淋巴细胞 20%-50%
单核 3%-10%
中性粒细胞
1.中性粒细胞生理性增多 1）年龄 2）日间变化 3）妊娠与分娩 4)运动、温度等 2.中性粒细胞病理性增多 1）急性感染 2）严重的损伤或大量血细胞破坏3）急性大出血 4）急性中毒5）肿瘤性增多 3.中性粒细胞减少（Neutropenia）： N< 1.5×109/L为粒细胞减少症； <0.5 ×109/L为粒细胞缺乏症。 1）某些感染2）某些血液病3）慢性理、化损伤4）自身免疫性疾病5）脾功能亢进
淋巴细胞
1.淋巴细胞增多 (1)某些传染病：如风疹、百日咳等 (2)某些传染病恢复期和肾移植术后发生排斥反应时 (3)急、慢性淋巴细胞性白血病 (4)某些慢性感染:如结核病(WBC总数正常) (5)各种引起N↓的原因均可导致L相对增多，如再障 2.淋巴细胞减少 (1)多见于传染病急性期，长期接触放射线，细胞免疫缺陷等 (2)各种引起N↑的原因均可导致L相对减少
单核细胞
1.单核细胞增多 (1)某些感染:如结核，伤寒，亚急性感染性心内膜炎或某些感染的恢复期 (2)某些寄生虫病：如疟疾，黑热病等 (3)某些血液病：单核细胞性白血病，恶性组织细胞病及骨髓增生异常综合征等 2.单核细胞减少：意义不大
嗜酸性粒细胞
1.嗜酸性粒细胞增多 （1）过敏性疾患 （2）某些传染病 （3）慢性粒细胞性白血病 (4）伴嗜酸性粒细胞增多急性白血病 2.嗜酸性粒细胞减少 见于伤寒、副伤寒、手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后
嗜碱性粒细胞
1.嗜碱性粒细胞增多 (1)慢粒：嗜碱性粒细胞可>10％ (2)骨髓增生性疾病：如真性红细胞增多症 (3)其他，如淋巴细胞瘤，脾切后和某些转移癌 2.嗜碱性粒细胞减少：意义不大
形态检查
核象变化
核左移
伴白细胞总数增高的核左移称再生性移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。
白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感染中毒性休克的败血症等。
核右移
中性粒细胞核出现4、5叶（正常时多为3叶，占50~70%）或更多，其百分数 > 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。
常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。
中性粒细胞毒性变化
1）大小不均
骨髓内幼稚中性粒细胞不规则分裂
长时间化脓性感染
2）中毒颗粒
粗大 大小分布不均匀的紫黑色或深紫褐色颗粒
严重化脓性感染或大面积烧伤
3）空泡变性
胞质发生脂肪变性和颗粒缺失
严重感染--败血症
4）杜勒小体
局部嗜碱性区域 呈圆形云雾状 只有一个圈
局部不成熟表现
核变性
中性粒其他异常形态
巨多核中性粒细胞
巨幼贫或抗代谢药物后
棒状小体
见于急性粒细胞白血病 急性单核细胞白血病
急性淋巴细胞白血病没有
遗传性
淋巴异常形态
异型淋巴
主要见于传单 ＞10%
I型(空泡型):亦称浆细胞型，最为常见。其胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形:核呈圆形、椭圆形、肾形或不规则形，染色质呈粗网状或不规则聚集呈粗糙的块状;胞质较丰富，深蓝色，-般无颗粒，含空泡或因具有多数小空泡而呈泡沫状
II型(不规则型):亦称单核细胞型。胞体较I型细胞明显增大，外形不规则，似单核细胞;核圆形或不规则，染色质不如I型致密;胞质丰富，淡蓝或蓝色，有透明感，边缘处蓝色 较深，可有少数嗜天青颗粒，一般无空泡
M型(幼稚型):亦称未成熟细胞型。胞体较大，核大呈圆形或椭圆形:染色质呈细致网状，可有1~2个核仁:胞质量较少呈深蓝色，多无颗粒，偶有小空泡
卫星核
淋巴细胞的主核旁边另有-个游离的小核
常见于大剂量的电离辐射之后
血小板检验
血小板计数
方法
直接计数（普通显微镜）
血液分析仪（电阻抗或散射法）
流式细胞仪（免疫荧光素）
参考区间：125-350x109/L
1.增多： ①原发性增多，见增殖性疾病； ②反应性增多，见感染、急性出血等； 2.减少： ①血小板生成减少，如急白、再障、药物的毒性作用等； ②血小板破坏过多和消耗亢进，如上呼吸道感染、ITP、自身免疫性疾病、DIC等
假性减少
抽血时组织液混入
未颠倒混匀
抽血量/抗凝剂比例失调
圆盘状无核细胞，直径2～3µm，约为红细胞1/3～1/2，Wright染色下胞质内充满紫红色颗粒 。
血液分析仪
检测原理
电学
电阻抗法
三分类
脉冲信号
强弱反应细胞大小
多少反应细胞数量
频射法
内部颗粒成分 核质比
光学
光散射法
低角度散射光-细胞数量 体积
高角度散射光-反应内部颗粒 细胞核
分光光度法
主要用于Hb测定
参数
红细胞 白细胞 血小板
粒系淋巴单核
图形
直方图
白细胞直方图
小细胞群
淋巴
35-95
中间细胞群
嗜酸 嗜碱 单核 幼稚
90-160
大细胞群
中性粒
160-450
红细胞直方图
测定36-360fl内红细胞
50-125 正态分布
125-200 大红细胞 网织红细胞
血小板直方图
测定2-30fl内血小板
左偏态分布
散点图
复检规则
婴幼儿期（1周-4-6岁）淋巴细胞高于中性粒细胞
