动物体细胞核移植

将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

动物体细胞核移植

• 基础知识
  • “去核”：
    • 实质是将纺锤体—染色体复合物去除
  • 去核的卵母细胞：
    • 需要将卵母细胞培养到MII中期
  • 去核的方法
    • 显微镜操作法
    • 梯度离心法
    • 紫外线短时间照射
    • 化学物质
    • 没有穿透卵细胞透明带，使DNA变形， 对细胞损伤小
  • 重构胚激活的方法
    • 电刺激
    • Ca2+载体
    • 乙醇
    • 蛋白酶合成抑制剂
  • 供、受体区分
    • 供体
      • 核供体：提供细胞核的体细胞
      • 质供体：提供细胞质的卵母细胞
    • 受体：代孕母体
• 进阶知识
  • 选取卵母细胞的原因
    • 细胞质内存在激发细胞核全能性表达的物质MPF（促成熟因子）
    • 卵母细胞体积大，便于操作
    • 含有较多卵黄，营养物质丰富
  • 卵母细胞去核的原因
    • 使核移植动物的核遗传物质全部来自供体的细胞
    • 防止细胞染色体的数量发生变化
  • 在实际操作过程中不是取供体细胞核进行核移植操作， 而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中？
    • 直接将供体细胞注入到去核卵母细胞透明带内， 再诱导（电刺激等）两个细胞融合的方法， 这种方法操作简单，对卵母细胞损伤较小
  • 克隆动物整个过程用到的技术
    • 动物细胞培养
    • 动物细胞融合技术
    • 核移植
    • 早期胚胎培养
    • 胚胎移植
  • 子代克隆动物的遗传物质
    • 细胞核遗传物质核与供体相同
    • 细胞质中的遗传物质主要来自于卵母细胞中
• 细胞工程