医学微生物学031疱疹病毒

医学微生物学：先天性感染经胎盘感染的胎儿多死胎或先天性疾病巨细胞包涵体病即肝脾肿大、黄疸、溶血性贫血等；以及神经系统损伤多表现为耳聋和智力低下等。

疱疹病毒

• 概述
  • 1．HHV的特性
    • ·包膜：球形，150～200nm。
    • ·核衣壳：立体对称。
    • ·基因组：dsDNA，编码多种蛋白和酶。
    • ·增殖：核内复制，融合成多核巨细胞。
    • ·感染类型：原发感染、潜伏感染、复发感染。
    • ·免疫：CMI控制HHV感染。
  • 2．人疱疹病毒的分类 见表2-31-1
• 第一节 单纯疱疹病毒
  • 一、生物学性状
    • 1．血清型HSV-1和HSV-2。
    • 2．基因组150kb，编码70多种蛋白，病毒编码蛋白的功能。
    • 3．病毒结构蛋白衣壳蛋白＋包膜糖蛋白即gC、gL、gE等。
    • 4．参与病毒增殖 DNA聚合酶、TK。
    • 5．与宿主细胞相互作用黏附性糖蛋白为gB、gC、gD和gH；融合蛋白为gB等。
    • 6．免疫逃逸 gC，gE／gL复合物。
    • 7．血清型分型 gG（型特异性糖蛋白）；gG-1代表HSV-1,gG-2为HSV-2。
  • 二、致病性与免疫性
    • 1．HSV感染 较普遍。
    • 2．传播途径
      • ·密切接触传播：唾液、阴道分泌物，疱疹液，接吻，共用杯子，牙刷等。
      • ·性接触；垂直传播。
      • ·疱疹液（手、眼、皮肤）传播。
    • 3．发病机制 密切接触和性接触、经黏膜和破损皮肤→上皮细胞内复制（疱疹液中充满病毒颗粒，具有传染性，疱疹基底部见多核巨细胞）→神经细胞为潜伏感染。
    • 4．原发感染
      • ·表现：黏膜与皮肤的局部疱疹。
      • ·HSV-1：腰以上感染为主，如唇疱疹、龈口炎、角膜结膜炎等。
      • ·HSV-2：腰以下及生殖器感染为主，如生殖系统疱疹、新生儿疱疹等。
    • 5．潜伏感染
      • ·原发感染后，HSV 由感觉神经感觉神经节。
      • ·HSV-1：三叉神经节和颈上神经节。
      • ·HSV-2：骶神经节。
      • ·潜伏的HSV不复制，对抗病毒药物不敏感。
    • 6．复发性感染
      • ·非特异性刺激：发热、月经、感染等。
      • ·激活潜伏病毒。
      • ·沿感觉神经纤维下行到末梢（原发部位）。
      • ·感染黏膜或皮肤上皮细胞。
      • ·免疫记忆反应。
      • ·病程短，组织损伤轻，感染局限。
    • 7．免疫
      • ·IFN和NK细胞：限制原发感染发展。
      • ·中和抗体：阻断病毒扩散。
      • ·细胞免疫：控制和消除HSV感染
  • 三、微生物学检查法
    • ·检测核酸：PCR或原位杂交检测HSV的DNA
    • ·检测抗原：刮取疱疹基底部组织；荧光素或酶标记抗体染色；检查细胞内疱疹病毒抗原。
    • ·分离病毒：标本为水疱液、唾液或CSF；细胞为BHK-21，Vero；CPE为细胞肿胀；融合细胞；包涵体
• 第二节 水痘-带状疱疹病毒（VZV）
  • 一、生物学性状
    • 1．水痘-带状疱疹病毒（varicella zoster virus，VZV）与HSV的相似点
      • ·潜伏于神经细胞，引起复发感染
      • ·细胞免疫限制和防治重症水痘。
      • ·皮肤损伤以水疱为特征，疱液中含大量病毒颗粒。
      • ·编码TK等，对抗病毒药物敏感
    • 2．与HSV不同点
      • ·经呼吸道以及接触传播。
      • ·通过病毒血症播散至皮肤。
  • 二、致病性与免疫性
    • （1）水痘（原发感染）：好发于3～6岁儿童，冬春季流行。
    • （2）带状疱疹（复发感染）：病毒潜伏在神经节，病毒激活后引发（紧张压力或免疫力低下等因素）。
    • （3）VSV原发感染和潜伏感染。
    • （4）VZV 复发性感染
  • 三、微生物学检查法与防治
    • 1．诊断临床表现典型，无需进行微生物学检查。病毒检测似HSV：核酸、抗原、病毒分离等。
    • 2．治疗 ①阿昔洛韦等；②IFN：限制疾病、缓解局部症状。
    • 3．预防减毒活疫苗；接触病毒72小时以内，注射VZIG（带状疱疹免疫球蛋白）进行紧急预防（被动免疫）。
• 第三节人巨细胞病毒（HCMV）
  • 一、生物学性状
    • （1）形态结构：与HSV相似。
    • （2）宿主范围：仅感染人，仅成纤维细胞中增殖。
    • （3）复制周期为36～48小时
    • （4）细胞病变出现需2～6周：细胞变圆、膨胀、核变大、形成巨细胞，核内出现嗜酸性包涵体
  • 二、致病性与免疫性
    • 1．HCMV 感染
      • ·病毒增殖：各种腔管道上皮细胞内血、唾液、乳液、尿、阴道分泌物等含病毒。
      • ·传播途径：经胎盘传至胎儿、产道至新生儿；乳液和唾液至儿童；输血和器官移植传播；接触性感染，包括性接触。
    • 2．原发感染 儿童和成人通常隐性感染；单核细胞增多症。
    • 3．潜伏感染 多数长期带毒；潜伏部位为唾液腺、乳腺、肾、白细胞等；长期或间歇地自唾液、乳汁、尿液、精液或宫颈分泌物中排出病毒。
    • 4．复发性感染 器官移植、AIDS、白血病和淋巴瘤等；长期用免疫抑制剂、激活潜伏病毒；引起肺炎、结肠炎和脑膜炎等。
    • 5．新生儿感染 经产道感染或出生后数周由母体（尿或乳汁中的病毒）或护理人员排出的病毒所引起的感染，少数表现为短暂的间质性肺炎、肝和脾轻度肿大、黄疸，多无明显症状但排毒。
    • 6．先天性感染 经胎盘感染的胎儿多死胎或先天性疾病巨细胞包涵体病即肝脾肿大、黄疸、溶血性贫血等；以及神经系统损伤多表现为耳聋和智力低下等。
  • 三、微生物学检查与防治原则
    • 1．细胞培养 成纤维细胞中增殖，生长慢，CPE需2～6周，可用免疫荧光检测病毒抗原。
    • 2．ELISA HCMV-lgM；近期感染；胎儿感染。
    • 3．快速诊断 检测病毒核酸
    • 4．异嗜性抗体的检测
      • ·辅助诊断，传染性单核细胞增多症。
      • ·交叉抗体：M型抗体，有诊断价值（早期诊断、近期感染）；效价>1:224
      • ·非特异凝集牛、绵羊RBC；出现早，发病3～4周内达高峰；恢复期逐渐下降至消失。
      • ·缺点：假阳性（正常人，血清病等）。
    • 5．防治原则 婴儿室发现HCMV感染时应将患儿隔离，孕妇要避免接触HCMV感染者；可用高滴度抗HCMV免疫球蛋白及抗病毒药物更昔洛韦等联合应用治疗严重HCMV感染。
• 第四节EB病毒（EBV）
  • 一、生物学性状
    • （1）形态结构类似疱疹病毒，但抗原结构不同。
    • （2）常规方法不能培养。
    • （3）潜伏在B细胞中
    • （4）增殖性感染产生的抗原
      • ·早期抗原（ntigen，EA）：DNA聚合酶活性，表示EBV增殖；EA抗体为早期抗体，持续early antigen,E几个月表示近期感染。
      • ·衣壳抗原（viral capsidantigen,VCA)：结构蛋白，存在细胞质和细胞核；VCA-IgM出现早，消失快；VCA-IgG出现晚，持续几年
      • ·EBV膜抗原（membrane antigen，MA）：在细胞表面，属包膜糖蛋白；MA-lgM表示近期感染；MA-IgG可持续存在。
    • （5）潜伏感染
      • ·EBV感染B细胞或上皮细胞潜伏感染。
      • ·细胞含EBV基因组（游离或整合）。
      • ·选择性表达潜伏期抗原，刺激B细胞增生或永生化。
    • （6）EBV 潜伏期抗原
      • 1）核抗原（EB nuclear antigen，EBNA）
        • ·B细胞核内，为DNA结合蛋白。
        • ·维持EBV 基因组在感染细胞内
        • ·感染细胞逃避CTL杀伤
        • ·与细胞永生化有关。
        • ·EBNA 抗体：感染晚期，持续存在。
      • 2）潜伏膜蛋白（latent membrane protein，LMP）
        • ·B细胞表面，致癌蛋白。
        • ·改变细胞功能，抑制细胞凋亡。
        • ·阻止潜伏病毒激活功能。
  • 二、致病性与免疫性
    • 1．Burkitt 淋巴瘤
      • ·96％～100％与EBV相关。
      • ·瘤细胞含 EBV、DNA和EBNA。
    • 2．鼻咽癌
      • ·广东、湖南等地。
      • ·血清：高效价抗VCA、EA的及IgM抗体。
      • ·抗体升高常在肿瘤之前。
      • ·癌组织：EBNA和LMP阳性；PCR查到EBV基因组。
      • ·鼻咽癌治疗后好转，抗体滴度下降。
    • 3．传染性单核细胞增多症
      • ·EBV→唾液，接吻，共用杯子和牙刷等→口咽部上皮细胞增殖→感染淋巴组织中的B细胞→入血→全身性 EBV感染→表现单核细胞增多。
      • ·传染源：抗体阳性的隐性感染者和病人。
      • ·传播途径：唾液感染，输血传播，未见垂直传播。
    • 4．免疫性
      • ·EBV 在人群中广泛存在，EBV抗体阳性率达90％以上。
      • ·中和抗体能阻止外源性病毒再感染。
      • ·细胞和体液免疫不能清除体内潜伏的EBV。
    • 5．EBV 病毒感染致病机制见图2-31-1。
    • 6．EBV特异性抗体检测
      • ·VCA-IgM阳性。
      • ·VCA抗体阳性和EBNA抗体阴性。
      • ·EBNA抗体阳性。
      • ·VCA抗体和EBNA抗体阳性。
• 第五节新型人疱疹病毒
  • 1．人疱疹病毒6型（HHV-6）
    • ·形态结构类似HSV，嗜CD4＇T淋巴细胞，也可感染单核巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞等。
    • ·传播途径：通过唾液飞沫经呼吸道传播。
    • ·细胞免疫：限制感染，促进恢复
    • ·婴儿玫瑰疹（roseola）：潜伏期4～7天。
    • ·多见于6个月至2岁婴幼儿
    • ·高热及呼吸道症状，4天左右热退，颈部、躯干出现斑丘疹，维持24～48小时。
  • 2．人疱疹病毒7型
    • ·AIDS病人T细胞中分离的新病毒。
    • ·持续感染唾液腺
    • ·多数人唾液分离出HHV-7
    • ·部分玫瑰疹与HHV-7感染有关
    • ·HHV-7与疾病的关系尚待证实。
  • 3．人疱疹病毒8型
    • ·AIDS病人卡波西肉瘤活检组织发现DNA序列
    • ·形态与疱疹病毒相似，基因序列与疱疹病毒有高同源性。
    • ·性接触可能是HHV-8重要的传播方式。
    • ·卡波西肉瘤：混合细胞型的血管性肿瘤，常见于艾滋病患者，多发于皮肤，也有发生于消化道和内脏，常造成致死性后果。
    • ·内皮样梭状细胞含HHV-8
    • ·诊断：PCR核酸检测、免疫荧光、ELISA、免疫印迹等方法检测血清抗原或抗体。
    • ·目前尚无特异性预防和治疗HHV-8感染的有效措施
    • ·抗疱疹病毒有效的药物如更昔洛韦等可用于预防卡波西肉瘤的发生，但对已形成的肿瘤无效。
    • ·积极地抗HIV治疗可有效控制艾滋病患者的KS发生率。