湿热灭菌法最为常用,在同一温度下,比干热灭菌方法效果好。其原因是:①湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性;②湿热的穿透力比干热大;③湿热的蒸汽有潜热效应存在,水由气态变为液态时放出大量的潜热,可迅速提高被灭菌物体的温度。
(1)巴氏消毒法:用较低温度杀灭液体中的病原菌,以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏。此法由巴斯德创建,用于消毒牛乳、酒类。
(2)煮沸法:在1个大气压下水的煮沸温度为100摄氏度,一般细菌的繁殖体5分钟能被杀死,细菌芽胞需要煮沸1~2小时才被杀灭。此法常用于消毒食具、刀剪、注射器等。
(3)流动蒸汽消毒法:是利用1个大气压下100摄氏度的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体15~30分钟可被杀灭,常不能杀灭全部细菌芽胞。
(4)间歇蒸汽灭菌法:利用反复多次的流动蒸汽间歇加热以达到灭菌的目的。将需要灭菌的物品置于流通蒸汽灭菌器内,100摄氏度加热15~30分钟,杀死其中的繁殖体。取出后放37摄氏度孵箱过夜,使残存的芽胞发育成繁殖体,次日再蒸一次。如此连续三次以上,可达到灭菌的效果。此法适用于一些不耐高热的含糖、牛奶等培养基。