导图社区 沉淀反应读书笔记1
沉淀反应读书笔记，介绍了凝胶内沉淀反应、液体内沉淀反应、免疫电泳技术的知识，希望这份脑图会对你有所帮助。
免疫原和抗体的制备读书笔记 思维导图，免疫原是能刺激机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
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沉淀反应
凝胶内沉淀反应
概念
可溶性抗原与相应抗体在凝胶介质中结合在有电解质的条件下出现肉眼可见的沉淀线
单向扩散试验
原理
将一定量的抗体混入琼脂凝胶中，使待测抗原在凝胶中自由扩散，与相应抗体结合形成沉淀环，沉淀环大小与抗原浓度呈正相关。
类型
试管法、平板法
影响因素
①抗原分子量：与扩散速度、沉淀环反相关；②抗体种类：兔抗血清优于马、羊；③抗体稀释度：抗体浓度大，沉淀环小④扩散时间：抗原含量高，扩散时间长；⑤扩散温度：4~37℃内温度与扩散速度 正 相关；⑥琼脂板厚度：与沉淀环 反相关。
双向免疫扩散试验
将可溶性抗原和抗体置于琼脂凝胶板的对应孔中，两者各自在凝胶中向四周自由扩散当抗原与抗体相遇在比例合适时形成沉淀线。
试管法
平板法
抗原或抗体的存在与否及其相对含量的估计
抗原或抗体相对分子质量的分析
抗原或抗体性质的分析
抗体效价的滴定
抗原或抗体纯度鉴定
免疫电泳技术
将电泳技术与沉淀反应相结合的技术。在电场的作用下抗原或抗体或者二者在凝胶介 质中定向移动发生的沉淀反应。
对流免疫电泳
原理：在电场作用下抗原、抗体在凝胶中定向移动形成沉淀线。
双向免疫扩散+电泳
火箭免疫电泳
电泳原理：带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动。 单扩原理：待测抗原溶液从局部向琼脂内◇含抗体◇自由扩散◇在一定区域形成沉淀环。 火箭免疫电泳：在电场作用下抗原在凝胶中定向移动形成沉淀峰。
方法评价
简便、快速、敏感度高（ug/ml)，重复性好
注意事项
①电泳顶部云雾状或圆形，应继续电泳。②琼脂应为无电渗或电渗很小。 ③标本多时，应将琼脂板置于电泳槽上，搭桥并开启电源后加样，否则形成宽底。 ④样本为IgG时为防止电渗作用，应先将IgG甲酰化⑤使IgG只带负电荷。
免疫电泳
先将待检标本进行区带电泳，然后与电泳方向平行挖一小槽，加入含相应Ab的血清，与已分离的Ag在琼脂内作双扩散，各区带在相应位置与Ab形成沉淀弧。
①抗原抗体比例不当，需测抗原抗体最适比； ②抗血清的抗体谱，混合抗血清的使用 ③电泳条件直接影响分辨率
应用
纯化抗原和抗体成分的分析 正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定 多发性骨髓瘤患者血清检测
免疫固定电泳
先将待检标本进行区带电泳加入含相应抗血清与已分离的Ag在琼脂内发生沉淀反应，通过漂洗染色对标本进行分析。
①最常用于M蛋白的鉴定与分型；②用于尿中本周氏蛋白质的检测与k、λ分型；③脑脊液中寡克隆蛋白的检测与分型
优点
分辨率强，敏感度高，操作周期短，仅需数小时，结果易于分析。
交叉免疫电泳
已从同时对多种抗原进行分析，也可以鉴定抗体。
液体内沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合出现可见沉淀的现象
絮状沉淀试验
将可溶性抗原与相应抗体混合在电解质存在的条件下抗原抗体结合形成肉眼可见的絮状沉淀物
抗体稀释法、抗原稀释法、方阵滴定法
优点：方法简单、快速 缺点：敏感度较低、易受抗原抗体比例影响
临床意义
测定抗原抗体反应的最适比
免疫浊度测定
浊度
是指溶液对光线通过时所产生的阻碍程度，它包括 悬浮物对光的散射和溶质分子对光的吸收
当可溶性抗原与相应抗体特异结合，形成小分子免疫复合物在增浊剂作用下形成较大的免疫复合物使反应液出现浊度
分类
根据抗原抗体反应的动力学差异分： 速率比浊法、终点比浊法
根据检测仪器的位置及光信号性质分：免疫透射浊度、免疫散射浊度
抗原抗体的比例：反应体系中保持抗体过量； 抗体的质量：特异性强，效价高（>1:20)，亲和力强(R型）; 抗原抗体反应溶液：最适PH6.5~8.5、离子强度、种类（常用：磷酸盐缓冲液PBS);使用増浊剂：PEG、Tween-20
血液、体液中蛋白质的测定
自动化免疫浊度分析系统
免疫透射浊度分析系统
原理：抗原与抗体在一定缓冲液中形成IC当光线透过反应溶液时，IC吸收透射光，当Ab过量时，吸光度与IC的量成正比表示。与已知浓度的抗原标准品比较，可测定标本中抗原的量。
免疫散射浊度分析系统
原理：抗原抗体在液相中特异性结合产生一定大小的IC当一定波长的光线照射IC时部分光线发生散射。散射光的强度与IC的含量、散射光夹角0呈正比，与入射光波长成反比。
定时散射浊度法 速率散射浊度法
