医学微生物中各种细菌的培养特性

本内容来自医学微生物，内容包括了书本上的重点微生物的培养特点和相应的生化反应，重点部分有相应的符号表示，如金黄色葡萄球菌，脑膜炎奈瑟菌，破伤风梭菌，支原体等内容非常全面，适合考研与医师考试。有些内容稍有折叠，毕竟整理了很久，欢迎大家下载观看，祝大家学习愉快。

细菌培养特性

• 球菌
  • 金黄色葡萄球菌
    • 需氧或兼性厌氧。营养要求不高, 在普通培养基中,37℃生长良好。在普通琼脂平板上孵育24~48小时后,形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的菌落,直径在2mm左右。属内不同菌种可产生金黄色、白色或柠檬色等不同颜色的脂溶性色素并使菌落着色。 致病性葡萄球菌菌落呈金黄色,于血琼脂平板上生长后,在菌落周围还可见完全透明溶血环(β溶血)
    • 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不产气。致病性菌株能分解甘露醇,产酸。1⃣️触酶(过氧化氢酶)阳性,可与链球菌相区分。
  • A群链球菌
    • 多数菌株兼性厌氧。营养要求较高，在含血液、血清、葡萄糖培养基上生长良好。 在血清肉汤中易形成长链,管底呈絮状沉淀。 在血琼脂平板上,形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，多数菌株菌落周围形成较宽的透明溶血环(β溶血现象)。
    • 分解葡萄糖,产酸不产气。链球菌一般不分解菊糖，不被胆汁溶解,可用这两个特性来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。链球菌与葡萄球菌不同,不产生触酶
  • 肺炎链球菌
    • 营养要求较高, 在含有血液或血清的培养基中オ能生长。兼性厌氧。在血半板上的菌落细小、形成草绿色溶血环、肺炎链球菌产生足量的自溶酶, 自溶酶能破坏细胞壁, 使菌溶解。平板培养菌落中的菌体溶解, 菌落中央下陷呈肚脐状。 在血清肉汤中孵育, 初期呈混浊生长, 稍久自溶酶使细胞自溶, 培养液渐变澄清。 自溶酶可被胆汁或胆盐等活性物质激活, 从而促进培养物中菌体的溶解。
    • 肺炎链球菌分解葡萄糖麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。可靠的鉴别法是胆汁溶菌试验。
  • 脑膜炎奈瑟菌
    • 营养要求较高，需在含有血清、血液等培养基中方能生长。常用经80℃以上加温的血琼脂平板;色似巧克力,故名巧克力(色)培养基, 专性需氧,在5%CO2 条件下生长更佳。最适pH为7,4-7.6。最适生长温度37℃,孵育24小时后形成直径1.0～1.5mm的无色、圆形、光滑、透明,似露滴状的菌落。在血琼脂平板上不溶血。在血清肉汤中呈混浊生长。产生自溶酶,人工培养物超过48小时常死亡。自溶酶经60℃30分钟或甲醛液处理均可使之破坏。
    • 大多数脑膜炎奈瑟菌分解葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气
  • 淋病奈瑟菌
    • 专性需氧.初次分离培养时须供给5%C02。营养要求高.巧克力(色)血琼脂平板是适宜培养基,最适生长温度为35~36度,抚育48小时后,形成凸起、圆形、灰白色,直径0.5~1.0mm的光滑型菌落
    • 只分解葡萄糖, 产酸不产气, 不分解其他糖类。氧化酶试验阳性
• 肠肝菌
  • 大肠杆菌
    • 兼性厌氧或需氧。营养要求不高 在普通琼脂平板上可形成直径2~3mm湿润光滑、灰白色的中等大小菌落 在血琼脂平板上,有些菌落可产生溶血环;在液体培养基中,呈均匀混浊生长。
    • 过氧化氢酶阳性,能还原硝酸盐为亚硝酸盐, 氧化酶阴性,在鉴别肠道杆菌和其他发酵与不发酵的革兰阴性杆菌上有重要价值，产酸并产气
  • 志贺菌属
    • 营养要求不高,在普通琼脂平板上经过24小时生长,形成直径达2mm大小、半透明的光滑型菌落。志贺菌属中的宋内志贺菌通常出现扁平的粗糙型菌落
    • 分解葡萄糖,产酸不产气。除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖(一般需3~4天)外, 均不发酵乳糖
  • 沙门氏菌
    • 兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通琼脂平板上可生长,在SS选择鉴别培养基上形成中等大小、无色、半透明的S型菌落
    • 不发酵乳糖或蔗糖。对葡萄糖、麦芽糖和甘露糖发酵,除伤寒沙门菌产酸不产气外,其他沙门菌均产酸产气。
• 弧菌属
  • 霍乱弧菌
    • 兼性厌氧,在氧气充分的条件下生长更好,营养要求不高。生长繁殖的温度范围18-37℃)故可在外环境中生存。耐碱不耐酸,在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好,因其他细菌在此pH中不易生长，常用碱性蛋白胨水增菌
    • 霍乱弧菌为2⃣️过氧化氨酶阳性,氧化酶阳性,能发酵很多常见的单糖、双糖和醇糖,如葡萄糖、蔗糖和甘露醇, 产酸不产气;不分解阿拉伯糖;能还原硝酸盐、吲哚反应阳性
  • 副溶血性弧菌
    • 嗜盐(Ikdophilic).在培养基中以含35g/L NaCl最为适宜, 无盐则不能生长,但当Nacl浓度高于80g/L时也不能生长。 在盐浓度不适宜的培养基中.细菌呈长杆状或球杆状等多形态。不耐热,90度1分钟即被杀死，不耐酸
    • 副溶血性弧菌在普通血平板(含羊、免或马等血液)上不溶血或只产生α溶血 特定培养基：神奈川现象
• 幽门螺旋杆菌
  • 生长时需5%~10%的CO2 和5%的O2 , 营养要求高,培养时需动物血清或血液,最适生长温度为37T ,另外还需一定湿度(相对湿度98%),培养3-6天可见针尖状无色透明菌落。传代培养后可变成杆状或圆球体形。
  • 生化反应不活泼, 不分解糖类。3⃣️过氧化氧酶和氧化酶阳性,尿素酶丰富, 可迅速分解尿素释放氛, 是鉴定该菌的主要依据之一
• 厌氧芽胞属
  • 破伤风梭菌
    • 菌落疏松, 不规则,看似ℹ️羽毛状,边缘不整齐,呈锯齿状。严格厌氧。 在血平板上,37℃培养48小时后始见薄膜状爬行生长物,伴β溶血。
    • 不发酵糖类,不分解蛋白质。 芽胞通常100℃、1小时可被完全破坏,在干燥的土壤和尘埃中可存活数年。
  • 产气荚膜梭菌
    • 厌氧,但不十分严格。 20~50℃均能旺盛生长,在其最适生长温度42℃,易于分离培养。 在血琼脂平板上,多数菌株有双层溶血环, 内环是由θ毒素引起的完全溶血, 外环是由α毒素引起的不完全溶血。
    • 在蛋黄琼脂平板上,菌落周围出现乳白色混浊圈,是由细茵产生的卵磷脂酶(a毒素)分解蛋黄中卵解脂所致。若在培养基中加入毒素的抗血清,则不出现混浊。Nagler反应,为本菌的特点。本菌代谢十分活跃,可分解多种常见的糖类,产酸产气。具有“汹涌发酵”现象。
  • 肉毒梭菌
    • 严格厌氧,可在普通琼脂平板上生长,能产生脂酶;在卵黄培养基上,菌落周围出现混浊圏。
    • 肉毒毒素不耐热,煮沸1分钟即可被破坏
• 分枝杆菌属（抗酸）
  • 结核分枝杆菌
    • 专性需氧菌营养要求高。在含有蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等的固体培养基上才能生长。最适pH为6.5～6.8,最适温度为37℃,生长缓慢,约12-24小时繁殖一代, 接种后培养3-4周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、坚硬,表面呈颗粒状、乳酪色或黄色形似ℹ️ℹ️菜花样。
    • 液体培养基中呈粗糙皱纹状菌膜生长,若在液体培养基内加入水溶性脂肪酸, 可降低结核分枝杆菌表面的疏水性,细菌呈均匀分散生长,有利于进行药物敏感试验等。 结核分枝杆菌不发酵糖类,其与牛分枝杆菌的区别在于前者可合成烟酸和还原硝酸盐,而后者则不能。
  • 麻风分枝杆菌
    • 至今唯一不能人工培养的细菌
    • 以麻风分枝杆菌感染小鼠足垫或接种至犰狳可引起动物的行性麻风感染,是研究麻风病的主要动物模型
• 支原体，立克次体、衣原体，螺旋体
  • 支原体
    • 支原体对营养物质的要求高于一般细菌,需加入10%-20%人或动物血清以提供胆固醇与其他长链脂肪酸。多数支原体还需添加酵母浸液、组织浸液、核酸提取物辅酶等才能生长，油煎蛋状菌落
    • 细胞膜分为三层
  • 立克次体
    • 立克次体由于酶系统不完善,缺乏细胞器,故为专性细胞内寄生;以二分裂方式繁殖,生长速度缓慢,9~ 12小时分裂一代,最适生长温度为34度。可用细胞培养法和鸡胚卵黄囊接种进行培养。也可接种动物,常用动物有豚鼠、大鼠、小鼠和家兔。多种病原性立克次体在豚鼠和小鼠体内生长繁殖良好。
  • 衣原体
    • 衣原体为专性细胞内寄生,大多数衣原体能在6~8日龄鸡胚卵黄囊中繁殖于感染后3-6天致鸡胚死亡,并可在鸡胚卵黄囊膜中找到包涵体、原体和网状体颗粒。
    • 衣原体多缺乏主动穿入组织细胞的能力,故可将接种有标本的细胞培养管离心沉淀以促使衣原体穿入细胞
  • 专性胞内寄生
  • 螺旋体
    • 钩端螺旋体
      • 需氧或微需氧。营养要求较高, 液体培养基中28℃培养1周后呈ℹ️半透明云雾状 固体培养基上,28℃培养2周后可形成半透明扁平菌落
    • 苍白密螺旋体苍白亚种
      • 采用棉尾兔单层上皮细胞,在微需氧条件下(1.5%O2、5%CO2、93.5%N2)33℃培养的梅毒螺旋体可生长繁殖并保持毒力。
    • 伯道疏螺旋体（莱姆病）
      • 营养要求高,培养基需含有长链饱和及不饱和脂肪酸、葡萄糖，氨基酸和牛血清白蛋白。微需氧或需氧,5%～10%CO2促进生长。适宜培养温度为35度。生长缓慢
• 诺卡菌属
  • 诺卡菌属为专性需氧菌,营养要求不高,在普通培养基成沙保培养基上,在22或37度条件下生长良好。诺卡菌属生长缓慢, 一般1周左右长出菌落,菌落表面干燥、有皱褶或呈蜡样,不同菌株可产生不同的色素。在液体培养基中表面形成菌膜,液体澄清。
  • 部分诺卡菌属具有弱抗酸性,仅用1%盐酸乙醇延长脱色时间可变成抗酸阴性,据此可与结核分枝杆鉴别。
• 放线菌属
  • 放线菌厲培养比较困难.生长缓慢,厌氧或微需氧,初次分离加5%CO2促进其生长。在脑心浸液琼脂培养基上培养4~6天可形成白色,表面粗糙的大菌落，ℹ️称为“白齿状”菌落
  • 放线菌属能发酵葡萄糖,产酸不产气,过氧化氧酶试验阴性。 衣氏放线菌能还原硝酸盐、分解木糖,不水解淀粉, 牛型放线菌则不能还原硝酸拔,不分解木糖,但能水解淀粉
• 其他细菌
  • 白喉棒状杆菌
    • 需氧或兼性厌氧。在含全血或血清培养基上,置35-37℃时细菌生长良好。在含有凝固血清的吕氏培养基上生长迅速,经12~18小时培养即可形成圆形灰白色的小菌落,菌体形态典型, 异染颗粒明显。
    • 在含有0.03%~0.04%亚碲酸钾血琼脂平板上生长时,能使亚碲酸钾还原为黑色的金属元素碲,故菌落呈黑色或灰色,亚碲酸钾还有抑制其他杂菌生长的作用
  • 百日咳鲍特菌
    • 专性需氧,最适生长温度35~36℃,最适pH6.8-7.0。生长较缓慢, 倍增时间为3.5~4小时。营养要求高,初次分离培养用含甘油、马铃薯和血液的鲍-金培养基
    • 生化反应弱,不分解糖类,不产生吲哚,不生成硫化氢,不利用枸櫞酸, 不分解尿素等。4⃣️但氧化酶阳性,触酶阳性。
  • 嗜肺军团菌
    • 为专性需氧菌,2.5%~5%C02可促进生长。最适温度为35度,最适PH 6.4~7.2。 兼性胞內寄生.生长需要多种元素。营养要求较高,生长时需要L-半脱氣酸、甲硫氨酸等。在活性炭-酵母浸出液琼脂培养基上,3~5天可形成1~2mm、灰白色有光泽的S型菌落。若在BCYE培养基中加人0.1g/L溴钾酚紫，菌落呈浅绿色。
    • 该菌不发酵糖类,可液化明胶,5⃣️触酶阳性,氧化酶阳性或弱阳性,不分解尿素,硝酸盐还原试验阴性。
  • 铜绿假单胞菌
    • 专性需氧。在普通培养基上生长良好,最适生长温度为35℃,在4℃ 不生长而在42℃ 可生长是铜绿假单胞菌的一个特点。最适产毒温度为26℃。pH 5～7范围内生长较好,产生带荧光素的水溶性色素青脓素与绿脓素,故使培养基变为亮绿色。在液体培养基中呈混浊生长,常在其表面形成菌膜。
    • 铜绿假单胞菌能够分解葡萄糖,产酸不产气,但不分解甘露醇、麦芽糖、蔗糖和乳糖。分解尿素, 6⃣️氧化酶阳性,不形成吲哚
• 动物源性细菌
  • 布鲁氏菌属
    • 需氧菌 牛布鲁氏菌在初分离时需5%~10%CO2。营养要求较高,在普通培养基上生长缓慢,若加入血清或肝浸液可促进生长。最适生长温度为35～37℃,最适pH为6.6～6.8。经37℃培养48小时可长出微小、透明、无色的光滑型(S)菌落,经人工传代培养后可转变成粗糙型(R)菌落。布鲁氏菌在血琼脂平板上不溶血,在液体培养基中可形成轻度混浊并有沉淀。
    • 大多能分解尿素和产生H2S,根据产生H2S的量和在含碱性染料培养基中的生长情况,可鉴别羊、牛、猪等三种布鲁氏菌
  • 鼠疫耶尔森菌
    • 兼性厌氧，最适生长温度27-30℃,pH为6.9-7.2。在含血液或组织液的培养基上生长,24-48小时可形成细小、黏稠的粗糙型菌落。在肉汤培养管底部开始出现絮状沉淀物,48小时肉汤表面形成菌膜,稍加播动菌膜ℹ️ℹ️ℹ️呈“钟乳石”状下沉,此特征有一定鉴别意义。
  • 炭疽芽胞杆菌
    • 需氧或兼性厌氧,最适温度为30~35℃, 在普通琼脂培养基上培养24 小时,形成灰白色粗糙型菌落,低倍镜观察可见卷发状边缘。 在血琼脂平板上不溶血;在肉汤培养基中由于形成长链而呈絮状沉淀生长。 在明胶培养基中经37℃培养24小时可使表面液化成漏斗状。
• 流感嗜血杆菌
  • 流感嗜血杄菌是第一个被成功全基因组测序的细菌。
  • 需氧或兼性厌氧,培养较困难,最适生长温度为35-37℃。由于该菌氧化还原酶系统不完善,生长时需要“X”和“V”两种生长辅助因子。存在卫星现象
    • “X”因子存在于血红蛋白中,是血红素及其衍生物, 可耐高温,120℃ 30分钟不被破坏,是细菌合成过氧化物酶、细胞色素氧化海等呼吸酶的辅基。
    • “V”因子存在血液中,是辅酶I或Ⅱ,在细菌呼吸中起递氢体作用, 耐热性稍差,120℃ 15分钟可被破坏。
  • 流感嗜血杆菌在巧克力色血平板上生长良好,是因为在制备培养基加热时,红细胞膜上V因子抑制物被破坏,V因子充分释放并发挥作用。培养18-24小时, 菌落微小,无色,透明似露珠,48小时后形成灰白色较大的圆形、透明菌落,无溶血。
  • 流感嗜血杆菌能分解葡萄糖、蔗糖，不发酵乳糖、甘露醇，对半乳糖、果糖和麦芽糖的发酵不稳定,一般粗糙型菌株比有荚膜菌株分解糖的能力强。