取1 - 5 ml过夜培养的菌液,加入离心管中,10000 × g离心11min。弃培养基,倒扣于吸水纸上吸尽残液
向留有菌体沉淀的离心管中加入250 μl Buffer P1,用移液器或涡旋振荡混匀
向步骤2中加入250 μl Buffer P2,温和的上下颠倒混匀8 - 10次,使菌体充分裂解
向步骤3中加入350 μl Buffer P3,立即温和地上下颠倒8 - 10次让溶液彻底中和Buffer P2,出现白色絮状沉淀,13,000 × g离心10 min
将FastPure DNA Mini Columns吸附柱置于Collection Tube 2 ml收集管中,将步骤4上清用移液器小心转移至吸附柱中,注意不要吸到沉淀,13,000 × g离心30 - 60 sec,倒掉收集管中的废液,把吸附柱重新放回收集管中
加入600 μl Buffer PW2至吸附柱中,13,000 × g离心30 - 60 sec,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中
把吸附柱置于一个新的灭菌的1.5 ml离心管中,加入30 - 100 μl Elution Buffer至柱吸附柱的膜中央,室温静置2 min,13,000 × g离心1 min洗脱DNA
弃去吸附柱,DNA产物保存于-20℃,以防止DNA降解